吳優(yōu)，彭家清

（長(zhǎng)江大學(xué)第二臨床學(xué)院，湖北 荊州 434020）

1 HE4分子生物學(xué)

HE4最早是由人附睪遠(yuǎn)端上皮細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的一種蛋白酶抑制劑，通過(guò)4,2-硫化物核心結(jié)構(gòu)域或WAP基序發(fā)揮自然免疫作用，細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化中發(fā)揮十分重要的作用[1]。HE4是一種N-糖基化蛋白，由位于染色體20q12-13.1上的WFDC2基因編碼，屬于跨類蛋白酶抑制劑家族，可抑制各種絲氨酸、天冬氨酸和半胱氨酸蛋白酶[2]。HE4和β2微球蛋白等小分子物質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量相近，當(dāng)腎臟功能受損時(shí)，其濾過(guò)和重吸收受到影響，HE4的水平會(huì)隨著腎臟損害加重而升高[3]，一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，HE4血清濃度隨著腎小球?yàn)V過(guò)率（eGFR）的降低而增加[4]。這可能是腎臟疾病進(jìn)展機(jī)制之一。

2 HE4與CKD

有研究收集112例CKD患者HE4血清標(biāo)本進(jìn)行分析，證明CKD各分期之間血清 HE4的表達(dá)水平有顯著差異，血清HE4的水平升高與腎臟存活率降低相關(guān)，提示HE4可能是CKD進(jìn)展的一個(gè)血清生物學(xué)標(biāo)志物[5]。一項(xiàng)對(duì)女性CKD患者的血清HE4研究結(jié)果提示，不同CKD分期組之間血清HE4水平差異顯著(P＜0.05)：HE4在無(wú)婦科腫瘤的女性CKD患者中顯著升高，并且隨著 CKD臨床分期的增加而逐漸增高[6,7]。實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步通過(guò)檢測(cè)136例CKD患者和67名健康對(duì)照組的血清HE4、血清胱抑素C和肌酐水平研究發(fā)現(xiàn)，血清HE4濃度在非婦科腫瘤的CKD患者中明顯升高，并隨著CKD分期的加重，且血清HE4的異常檢出率與血清胱抑素C相當(dāng)，均優(yōu)于肌酐異常檢出率，說(shuō)明在腎功能損害早期，血清HE4與胱抑素C是較肌酐更靈敏的反映早期腎功能損害的檢測(cè)指標(biāo)。在當(dāng)CKD3-5期腎功能出現(xiàn)中、重度損害時(shí)，隨著GFR進(jìn)一步下降，CKD患者血清HE4、血清胱抑素C和血清肌酐水平隨著CKD病情的加重顯著升高[8,24]。結(jié)果表明，HE4水平對(duì)CKD有較強(qiáng)的預(yù)測(cè)作用。

3 HE4與LN

狼瘡性腎炎（Lupusnephritis，LN）是系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemiclupuserythematosus，SLE）并發(fā)癥中最常見(jiàn)且嚴(yán)重疾病之一，導(dǎo)致心血管疾病、終末期腎病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)明顯升高，是SLE主要的合并癥和死亡原因[9]。另有文獻(xiàn)指出，慢性腎臟疾病造成腎臟受損后，腎遠(yuǎn)曲小管可釋放HE4進(jìn)入血液，導(dǎo)致其血清含量異常升高[10]。一項(xiàng)研究通過(guò)對(duì)82例LN患者及80例未合并LN的SLE患者，統(tǒng)計(jì)對(duì)比兩者人院時(shí)、治療6個(gè)月后血清HE4水平，結(jié)果證明血清HE4在LN中呈高表達(dá)狀態(tài)，提示HE4是影響預(yù)后的重要因素，可作為預(yù)后不良的預(yù)測(cè)因子[11]。一項(xiàng)多因素分析顯示，HE4的增加與LN顯著相關(guān)，ROC曲線顯示診斷LN在SLE的臨界值為150.1pm（敏感性為76.8%;特異性為91.1%），血清升高HE4水平與SLE患者LN的發(fā)生密切相關(guān)[20]。有助于早期識(shí)別診斷LN，為病情變化做出判斷。

4 HE4與AKI

近期研究表明，我國(guó)住院患者急性腎衰竭（Acute kidney injury，AKI）的檢出率僅為0.99%，需要腎臟替代治療的AKI病死率高達(dá)50%～80%[18]，因此，開(kāi)展AKI的前瞻性研究是十分必要的。Lunshan Wang等人通過(guò)收集不同原因腎損害住院患者血清259份，檢測(cè)血清HE4水平，結(jié)果提示：HE4水平在急性腎損傷組和慢性腎臟病組最高。HE4與肌酐、尿素、胱抑素C采用Pearson相關(guān)分析呈正相關(guān)，與eGFR呈負(fù)相關(guān)，線性相關(guān)分析提示：血清HE4對(duì) AKI患者的診斷價(jià)值高于肌酐、尿素和胱抑素 C[19]。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，AKI組的敏感性和特異性均為 100%（截止值為193.75 pmol/L），HE4水平在不同的eGFR分期之間也有顯著差異[12]，表明HE4可作為AKI的診斷和預(yù)后生物標(biāo)志物。

研究發(fā)現(xiàn)HE4是一種直接參與腎纖維化過(guò)程的細(xì)胞外分泌蛋白，提示HE4可能是腎纖維化和腎小球減少的可靠生物標(biāo)志物過(guò)濾納入標(biāo)準(zhǔn)包括急性和慢性腎損害，各種疾病引起的輕度腎功能不全。然后將這些患者與正常健康人群進(jìn)行比較。結(jié)果表明，急性和慢性腎損害患者的HE4水平最高，其他各組的HE4濃度也明顯高于對(duì)照組。相關(guān)分析表明，HE4與肌酐、cysta tin C呈正相關(guān)，說(shuō)明HE4與常規(guī)腎功能指標(biāo)有關(guān)。我們的研究表明，隨著腎小球功能的降低，血清HE4水平逐漸升高，并且在不同eGFR分期之間有顯著差異。值得注意的是，ROC曲線分析顯示，HE4和血清肌酐對(duì)急慢性腎損傷的診斷價(jià)值相當(dāng)高，其診斷價(jià)值優(yōu)于尿素和胱抑素C。因此，HE4可作為腎功能異常的可靠生物標(biāo)志物。在以前的研究中，HE4濃度隨著腎小球?yàn)V過(guò)率的降低或CKD的嚴(yán)重程度而增加，并且與肌酐濃度呈正相關(guān)，HE4水平也與心力衰竭的嚴(yán)重程度相關(guān)，顯示出較高的預(yù)后價(jià)值[19,20]。以前的研究表明，180例卵巢癌患者的平均血清HE4水平為（355.2±221.29）pmol/L；而我們的研究顯示，慢性腎損傷患者的HE4濃度為（1729.5±1217.5）pmol/L。

通過(guò)以上研究表明，HE4隨腎小球功能下降而升高，對(duì)AKI有較高的診斷價(jià)值。

5 HE4與腎臟纖維化

HE4被證實(shí)是絲氨酸蛋白酶抑制劑，它抑制了絲氨酸蛋白酶和基質(zhì)金屬蛋白酶的活性，抑制了它們降解I型膠原的功能，進(jìn)而促進(jìn)了腎纖維化[13,22]。作為對(duì)損傷的反應(yīng)，腎小管上皮細(xì)胞釋放生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子、趨化因子和基質(zhì)金屬蛋白酶來(lái)啟動(dòng)宿主修復(fù)和再生反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞損傷和宿主反應(yīng)的惡性循環(huán)，導(dǎo)致慢性纖維化，所以阻止這個(gè)過(guò)程獲得可以恢復(fù)功能性腎小管上皮細(xì)胞，減少病理分泌，減輕細(xì)胞周期停滯，促進(jìn)器官功能的改善[27]。

HE4過(guò)表達(dá)通過(guò)NF-κB轉(zhuǎn)錄激活組P65通過(guò)磷酸化和核移位激活NF-κB途徑，結(jié)果在HK2細(xì)胞系和CKD腎組織供體中實(shí)驗(yàn)得到證實(shí)，通過(guò)抑制基質(zhì)金屬肽酶2的活性來(lái)抑制細(xì)胞外基質(zhì)降解，研究結(jié)果表明，缺氧通過(guò)上調(diào)HE4和激活HIF-1α/HE4/NF-κB信號(hào)通路而導(dǎo)致腎纖維化[21]。纖維化是腎移植失敗的一個(gè)重要原因，Valerie S等人進(jìn)行了HE4基因表達(dá)譜分析及生物學(xué)驗(yàn)證，實(shí)時(shí)PCR分析顯示纖維化相關(guān)成纖維細(xì)胞中HE4上調(diào)12倍，在纖維化腎臟中也觀察到HE4表達(dá)升高，通過(guò)表達(dá)譜數(shù)據(jù)確定了HE4是一個(gè)新的基因，可能與腎臟纖維化有關(guān)[14,15,26]，同樣有研究證明在IgA腎病中，患者HE4及Scr水平的表達(dá)量與腎臟纖維化程度相關(guān)[25]。

有進(jìn)一步研究通過(guò)對(duì)103例腎移植患者檢測(cè)血清HE4濃度、進(jìn)行腎活檢發(fā)現(xiàn)，血清HE4的濃度隨著纖維化程度顯著增加，ROC分析區(qū)分腎纖維化患者和非腎纖維化患者，HE4的敏感性和特異性分別為82.1%和84.0%，研究結(jié)果表明，腎活檢標(biāo)本中HE4表達(dá)增加與腎纖維化密切相關(guān)，腎移植患者腎功能減退、腎纖維化患者血清HE4濃度明顯升高[16]，提示了HE4有可能是一種新的臨床標(biāo)志物用于評(píng)估腎功能和預(yù)測(cè)腎纖維化的程度。

已有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，在糖尿病腎病（DiabeticNephropathy,DN）患者及動(dòng)物模型中，HE4在腎組織中的表達(dá)隨著DN腎臟纖維化的進(jìn)展而逐漸增多，且在病變的腎小球系膜細(xì)胞及問(wèn)質(zhì)腎小管上皮細(xì)胞大量表達(dá)，這提示HE4在DN腎臟纖維化的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用[17]，HE4可能成為早期發(fā)現(xiàn)DN腎纖維化的標(biāo)志物[23]。

6 總結(jié)

綜上所述，由于目前HE4多在女性腫瘤方面研究較為深入，在HE4對(duì)于腎臟病的相關(guān)性研究國(guó)內(nèi)尚缺乏大規(guī)模的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析，有證據(jù)表明在AKI、LN、CKD 和腎纖維化疾病患者中血清HE4的表達(dá)水平有明顯增高，HE4可作為腎臟病臨床預(yù)測(cè)AKI、LN、CKD 和腎纖維化疾病的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，但目前研究報(bào)道不多，HE4在腎臟病的發(fā)生發(fā)展機(jī)制還需繼續(xù)深入研究。