羅純清，王 興，羅黎霞，賀 燦，陳 可，謝嘉馳，易華平

(湘潭市中醫(yī)醫(yī)院，湖南 湘潭 411100)

銀黃解毒消腫方為湘潭市中醫(yī)醫(yī)院的臨床經驗方，由牡丹皮、赤芍、大黃、知母、連翹、山銀花、黃連等藥味組成，功專涼血解毒、散結消腫，多用于熱毒瘀血之急喉痹、疔癰瘡癤等的治療。我院臨床一直以協(xié)定處方“外科一號方”中藥湯劑的形式廣泛應用。因中藥湯劑需要臨時煎煮，費時費力、不易保存、不便攜帶，故擬按相關技術原則將其開發(fā)成醫(yī)院制劑-銀黃解毒消腫膠囊[1]。膠囊劑型具有劑量更準確、方便攜帶、美觀、掩蓋不良氣味等優(yōu)勢。急性毒性試驗即單次給藥毒性試驗，其對初步闡明藥物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要意義，并能提供一些與人類藥物過量所致急性中毒相關的信息[2]。本研究根據相關技術指導原則，觀察ICR小鼠經口灌服銀黃解毒消腫膠囊后出現的急性毒性反應和死亡情況，并預測人體用藥過量時可能出現的毒性反應，初步觀察其用藥安全性，為其安全性評價奠定基礎。

1 材料與試劑

1.1 動物

SPF級ICR小鼠40只，雌雄各半，體質量范圍：18.2～22.0 g，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，實驗動物生產許可證號：SCXK(湘)2011-0003。每籠5只進行飼養(yǎng)，飼養(yǎng)室溫度：21.4～23.9 ℃，濕度：42.3%～59.8%，換氣次數：15～20次/h，12 h/12 h交替照明，動物檢疫合格、適應環(huán)境飼養(yǎng)后進行稱重、分組和給藥。

1.2 試藥

銀黃解毒消腫膠囊(自制，取膠囊內容物，含量：5.34 g生藥量/g，批號：20131110)；羧甲基纖維素鈉(CMC-Na，天津市恒興化學試劑制造有限公司，批號：20121222)。

1.3 儀器

TP-1200C型電子天平(湘儀天平儀器設備有限公司)。

2 方法

2.1 劑量設置

由于藥物濃度的限制，本試驗采用最大濃度0.47 g干膏/mL，按累積劑量200.784 g生藥/kg，當日給藥2次。給藥前禁食12 h以上，6 h后進行第2次給藥，具體見表1。

表1 試驗劑量及分組設計

2.2 藥液的配制

稱取銀黃解毒消腫膠囊內容物14.1 g，加0.5% CMC-Na溶液適量，攪拌混勻，后定容至30 mL，即得0.47 g干膏/mL的藥液。

2.3 急性毒性最大耐受量法試驗

選擇檢疫合格的SPF級ICR小鼠40只，雌雄各半，按性別體重采用區(qū)段隨機方法分為兩組，每組20只，分別為溶媒對照組和銀黃解毒消腫膠囊組。給藥前禁食12 h以上，以40 mL/kg的劑量經口灌胃給予相應供試品。銀黃解毒消腫膠囊累積劑量為200.784 g生藥/kg，分兩次給藥，間隔6 h。給藥當天，尤其在給藥后0～4 h內密切觀察并記錄各組動物的中毒表現和特點、毒性反應出現及恢復時間以及死亡情況等。然后每天觀察2次，即上、下午各1次，連續(xù)觀察14天。分別于給藥前及給藥后第7天、第14天，使用電子天平對小鼠體質量進行稱量。所有小鼠在試驗結束后腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉處死，并予以大體解剖，肉眼觀察臟器的位置、大小、色澤、粘連等情況，并檢查臟器表面和切面的質地、積液及腫瘤等異常改變。在試驗過程中若有非計劃死亡的動物(包括瀕死動物)，均應進行大體解剖。

2.4 觀察指標

小鼠一般活動狀況；中毒癥狀及死亡情況；體質量變化；大體解剖檢查。

2.5 統(tǒng)計學分析

3 結果

3.1 小鼠一般活動狀況

給藥前和14天觀察期間，溶媒對照組和銀黃解毒消腫膠囊組小鼠自主活動如常，未見異常和死亡現象。

3.2 小鼠中毒癥狀及死亡情況

整個試驗期間未見小鼠異常及死亡現象。

3.3 體質量變化情況

分別于給藥前、給藥后第7天和第14天稱重，結果與溶媒對照組比較，銀黃解毒消腫膠囊組小鼠體重變化無顯著性差異，且體質量增長在正常范圍內，說明經口灌服銀黃解毒消腫膠囊對ICR小鼠體質量增長無明顯影響，具體見表2、表3、表4。

表2 銀黃解毒消腫膠囊對小鼠體質量的影響

表3 銀黃解毒消腫膠囊對雌性小鼠體質量的影響

表表4 銀黃解毒消腫膠囊對雄性小鼠體質量的影響

3.4 大體解剖檢查結果

兩組小鼠各器官表面和切面均未見明顯異常情況。

4 討論

急喉痹即現代醫(yī)學所指的急性咽炎，是指咽黏膜、黏膜下及其淋巴組織的急性炎癥，臨床上常表現為咽部的紅腫熱痛和咽部干癢等[3]。風熱痰學說已成為現代急喉痹病因學說的主流，并形成了廣泛的共識[4]。我院醫(yī)生在臨床實踐中發(fā)現急喉痹多屬實證熱證，其病因病機多為外邪侵襲，上犯咽喉或肺胃熱盛，上攻咽喉。銀黃解毒消腫膠囊處方來源于我院醫(yī)生的臨床長期實踐，并以協(xié)定處方的形式在院內使用多年，療效肯定。

本課題組在前期已對銀黃解毒消腫膠囊的抗炎鎮(zhèn)痛作用及其對急性咽炎模型大鼠的治療作用進行了研究，顯示其具有較好的治療作用。本試驗在肯定其療效的前提下，對該制劑的安全性進行評價。結果在本試驗條件下，ICR小鼠經口灌胃給予銀黃解毒消腫膠囊(0.47 g干膏/mL)，最大劑量40 mL/kg，每天給藥2次(累積劑量為200.784 g生藥/kg)，對其一般活動狀況和體質量增長無明顯影響，未見明顯急性毒性反應。根據《中藥、天然藥物急性毒性研究技術指導原則》[5]，計算小鼠最大耐受藥物倍數，以耐受人臨床用量的100倍以上為安全，而本試驗中小鼠最大耐受藥量相當于70 kg成人臨床擬用量的627倍，提示銀黃解毒消腫膠囊口服用藥安全性較高。