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        酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)在梅毒檢驗(yàn)中的應(yīng)用

        2021-01-10 16:31:56韋清青
        中國藥學(xué)藥品知識倉庫 2021年16期
        關(guān)鍵詞:血清檢測

        韋清青

        摘要:目的 對比分析甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(tolulized red unheated serum test,TRUST)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)在梅毒檢驗(yàn)中的價(jià)值。方法 將2019年4月至12月本院收治的233例疑似梅毒患者給予TRUST與梅毒螺旋體明膠顆粒凝聚試驗(yàn)(treponema pallidum particle assay,TPPA)檢驗(yàn),并與2020年1月至12月233例實(shí)施ELISA+TPPA+TRUST檢驗(yàn)結(jié)果對比。結(jié)果 TRUST+TPPA+ELISA檢出率高出TRUST+TPPA12.44%,存在差異(P<0.05)。結(jié)論 TRUST+TPPA+ELISA檢驗(yàn)方式在梅毒中檢出率更高,值得臨床廣泛推廣應(yīng)用。

        關(guān)鍵詞:梅毒螺旋體感染;甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn);梅毒螺旋體明膠顆粒凝聚試驗(yàn);梅毒;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

        【中圖分類號】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】2107-2306(2021)16-01

        近年來,隨著人們生活方式與理念的改變,梅毒感染人群越來越多。梅毒由梅毒螺旋體(treponema palludim,TP)感染所致,具有較大危害性、傳染性,常見傳播方式為性行為傳播、血液傳播、胎盤垂直傳播等[1-2]。另外,該病臨床癥狀較復(fù)雜,早期多于生殖器官上出現(xiàn)硬下疳,且隨臨床分期加重,病原體隨血液循環(huán)向全身擴(kuò)散,逐漸侵襲體內(nèi)多器官,進(jìn)而威脅到患者生命健康[3]。目前針對梅毒主要以早確診、早治療,血清學(xué)檢測是臨床診斷常用方式包含梅毒螺旋體明膠顆粒凝聚試驗(yàn)(treponema pallidum particle assay,TPPA)、甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(tolulized red unheated serum test,TRUST)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)等,TPPA雖臨床診斷準(zhǔn)確性高,但其費(fèi)用極高,存在一定局限性,難以作為常規(guī)篩查項(xiàng)目[4-5]。現(xiàn)就其他兩種檢測進(jìn)行對比,分析其在梅毒檢測中的臨床價(jià)值。如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        將2019年4月至12月本院收治的233例疑似梅毒患者給予TRUST與梅毒螺旋體明膠顆粒凝聚試驗(yàn)(treponema pallidum particle assay,TPPA)檢驗(yàn),其中,男性65例,女性168例,年齡20~70歲,平均(45.02±1.04)歲,與2020年1月至12月233例實(shí)施ELISA+TPPA+TRUST的患者中男性64例,女性169例,年齡20~70歲,平均(45.10±1.09)歲。納入兩組疑似梅毒患者一般資料對比無差異(P>0.05)。

        1.2 方法

        所有患者就診后給予TRUST、ELISA、TPPA進(jìn)行TP陽性檢測。(1)TRUST:在加樣卡片圈中放置50ul血清樣本,均勻涂在整個(gè)卡片圈,輕搖勻抗原液,試劑盒由上海榮盛生物藥業(yè)有效公司所產(chǎn),試劑盒提供針頭加入抗原液1滴,之后將卡片放置到立體脫色搖床上,且以100r/min速度進(jìn)行振蕩,搖勻8分鐘,在亮光下立即觀察結(jié)果。通常以圓圈內(nèi)出現(xiàn)紅色或粉色絮狀物為陽性。(2)ELISA(英科新創(chuàng)(廈門)科技有效公司):具體操作:分別在相應(yīng)孔中加入100uL陰、陽性對照血清或待測樣本,覆上封板膜置37℃溫育60分鐘,用洗滌液充分洗滌5次,洗滌后扣干(每次應(yīng)保持30-60秒的浸泡時(shí)間),并分別在每孔中加入酶標(biāo)記抗原100uL,隨后再次覆上封板膜溫育30分鐘,洗滌5次,洗滌后扣干(每次應(yīng)保持30-60秒的浸泡時(shí)間),之后每孔加底物A、B各50uL,輕拍混勻,暗置30分鐘后每孔加入終止液50uL,混勻。測定時(shí)用酶標(biāo)儀單波長450nm或雙波長450nm/630nm測定各孔OD值(用單波長測定時(shí),需用空白對照孔調(diào)零),并記錄結(jié)果。操作完畢將兩組檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行觀察和對比。

        1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

        采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)分析軟件,符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以()表示,兩組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率表示,兩組間比較采用X2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        TRUST+TPPA+ELISA檢出率高出TRUST+TPPA 12.44%,存在差異(P<0.05),見表1:

        3 討論

        近些年來,我國梅毒感染患者持續(xù)增加,成為報(bào)告病例數(shù)最多的性病梅毒傳染性強(qiáng)、潛伏期長,潛伏期及Ⅱ期患者臨床癥狀不明顯,多表現(xiàn)為皮膚病,易被患者所忽略,而梅毒患者感染艾滋病是健康人群5倍以上,對此,加強(qiáng)對TP的檢測極為重要[6-7]。

        TPPA是敏感性、特異性高的檢測方式具有良好的診斷準(zhǔn)確性,但其收試劑價(jià)格的限制,從而難以被臨床廣泛使用,因此,無法作為常規(guī)篩查的項(xiàng)目[8]。ELISA法是以已經(jīng)工程重組抗原研制的方式,可對血清中梅毒特異性抗體檢測,在梅毒診斷中具有極高敏感度,適于大規(guī)模數(shù)據(jù)篩查和疾病的診斷。TRUST是以非特異類脂質(zhì)抗原進(jìn)行抗心磷脂抗體檢測,該類抗原多數(shù)和其他非特異行抗體出現(xiàn)交叉反應(yīng),故診斷性不高[9-10]。由本文研究結(jié)果呈現(xiàn),TRUST+TPPA+ELISA檢出率高出TRUST+TPPA 12.44%,存在差異(P<0.05)。并和周曉玲[11]學(xué)者研究結(jié)果相似。就其原因,ELISA法酶純度高、催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高,具有較高專一性,并且性能穩(wěn)定,靈敏度顯著高于凝集反應(yīng),該方式可同時(shí)用于檢測血清中梅毒抗體IgM和IgG,因此,易檢出梅毒抗體弱陽性標(biāo)本,結(jié)合酶化學(xué)反應(yīng)的抗體與抗原反應(yīng)的特異性和敏感性,故有效提高了該方式的減出率[12-13]。

        綜上所述,TRUST+TPPA+ELISA檢驗(yàn)方式更具有價(jià)值,患者檢出率更高。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 何小霞,馮月平. 梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)及梅毒螺旋體明膠顆粒凝集確證試驗(yàn)在梅毒血清學(xué)檢測中的應(yīng)用價(jià)值分析[J]. 中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2021,15(9):74-76.

        [2] 宋勝偉,曾茜茜. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)法檢測梅毒螺旋體感染的臨床價(jià)值[J]. 醫(yī)療裝備,2020,33(11):66-67.

        [3] 李春樹. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)法診斷梅毒螺旋體感染的臨床價(jià)值比較[J]. 中國民康醫(yī)學(xué),2020,32(19):98-99.

        [4]張暢. 酶聯(lián)免疫吸附法檢測與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)在梅毒檢驗(yàn)中應(yīng)用價(jià)值的比較[J]. 臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志,2019,6(84):147-148.

        [5] 吳曉燕,藍(lán)蔚蔚,譚曉霞,等. 酶聯(lián)免疫吸附法檢測與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)在梅毒檢驗(yàn)中的價(jià)值對比[J]. 中國地方病防治雜志,2019,34(5):577,579.

        [6] 吳昊. 酶聯(lián)免疫吸附法與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)在梅毒檢驗(yàn)中診斷價(jià)值的比較[J]. 國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2017,38(23):3298-3299,3302.

        [7] 馬潔瓊,邢文革,蔣巖. 干血斑樣本用于梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測方法的初步評價(jià)及應(yīng)用研究[J]. 中國艾滋病性病,2020,26(5):517-521.

        [8] 姜黎黎,張玉萍,尚愛民. 梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)作為初篩方法的梅毒逆向篩查程序的可行性分析[J]. 中國性科學(xué),2018,27(11):112-114.

        [9] 蔣剛健. 酶聯(lián)免疫吸附法檢測與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)在梅毒檢驗(yàn)中對比分析[J]. 黑龍江醫(yī)藥科學(xué),2017,40(5):170-171.

        [10]梁服泉,朱秀蘭,彭健華. 酶聯(lián)免疫吸附法檢測與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)在梅毒檢驗(yàn)中應(yīng)用對比[J]. 中國實(shí)用醫(yī)藥,2016,11(13):20-21.

        [11] 周曉玲,駱佳柱. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)在梅毒檢驗(yàn)中的效果比較[J]. 中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥,2019,26(6):52-53.

        [12]李胡煥,潘寶龍. 梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)在梅毒檢測中的應(yīng)用[J]. 醫(yī)療裝備,2016,29(17):60-62.

        [13]周占東. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法和甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)法在各期梅毒螺旋體抗體檢測中的效果對比觀察[J]. 實(shí)用醫(yī)技雜志,2019,26(5):582-584.

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