馮會(huì)利 王海棚 趙文斌 劉守鉉 銀 嶺 朱金鳳

（河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院,河南鄭州 451450）

非洲豬瘟（African Swine fever,ASF），是一種急性、熱性、濾過性病毒所引起的高傳染性疾病，其特征是發(fā)病過程短，死亡率高達(dá)100%，病豬臨床表現(xiàn)為發(fā)熱，皮膚發(fā)紺，淋巴結(jié)、腎、胃、腸粘膜明顯出血。在缺乏有效疫苗的情況下，只有嚴(yán)格遵守控制措施，才能防止ASF在養(yǎng)豬場的傳入和傳播。本文系統(tǒng)回顧了國際上防止ASF在養(yǎng)豬場傳播的現(xiàn)有措施，以及近年來非洲豬瘟傳播途徑的研究進(jìn)展，以找出最重要的知識(shí)缺口，并將其作為未來的研究重點(diǎn)，結(jié)果將用于制定和優(yōu)化控制策略，以防止和控制ASF的進(jìn)一步蔓延。

1 豬與豬之間的傳播

最近的試驗(yàn)研究提供了豬感染ASFV后血液、排泄物和分泌物病毒含量的范圍。在立陶宛、格魯吉亞和俄羅斯流行的高致病性ASFV菌株感染豬后，血液中可檢測到高達(dá)109HAD50/mL（50%血球吸附劑量），唾液、尿液或糞便中可檢測到高達(dá)105HAD50/mL的量（表1）[1]。在歐洲其他地區(qū)ASF暴發(fā)期間，豬感染了具有中等毒性的ASFV株后，觀察到了類似的值[2-3]。一些康復(fù)豬（30%～50%）感染這些中等毒力的病毒，病毒DNA也可以在感染后的急性期和較長的持續(xù)期4～70 d的空氣樣本中間歇性檢測到。空氣樣本中的檢測與糞便中病毒DNA的間歇性檢測結(jié)果顯著相關(guān)[4]。

一些試驗(yàn)研究表明，與感染性家豬直接接觸是ASFV傳播的有效機(jī)制。與感染ASFV的豬一起飼養(yǎng)，易感豬在1～9 d內(nèi)感染[5]。用固體隔板將健康豬與帶毒豬隔開飼養(yǎng)時(shí)，易感豬在6～15 d內(nèi)感染。馬拉維和坦桑尼亞聯(lián)合共和國豬感染高毒性ASFV也有類似的結(jié)果[6]。使用葡萄牙的低毒力ASFV在家豬之間進(jìn)行傳播，比使用高毒力ASFV傳播效率低，42%～50%的豬感染低毒力ASFV發(fā)病，感染高毒力ASFV的豬100%發(fā)病[7]。

對(duì)不同ASFV菌株在外界和試驗(yàn)條件下的傳播方式做了分析。馬耳他島ASFV株的基本再生數(shù)（R0,由一種傳染動(dòng)物引起的新動(dòng)物感染的平均數(shù)量）為18.0（95%置信區(qū)間：6.9～46.9）[8]，格魯吉亞和俄羅斯ASFV株的R0為1.4（95%置信區(qū)間：0.6～2.4），2.8（95%置信區(qū)間：1.3～4.8）[9]和 9.8（95%置信區(qū)間：3.9～15.6）[10]，具體取決于感染途徑（表2）。由于估計(jì)方法的不同，對(duì)這些數(shù)據(jù)進(jìn)行比較很困難。

目前，缺乏關(guān)于豬成為病毒攜帶狀態(tài)（可以傳播ASFV但沒有任何臨床癥狀，是潛在的傳染源）方面的知識(shí)。在高加索、東歐國家出現(xiàn)過豬感染ASFV后成為病毒攜帶狀態(tài)。在立陶宛、格魯吉亞和俄羅斯這些國家豬感染ASFV后主要表現(xiàn)為急性型[11]。豬在接種后3～5 d內(nèi)通常具有傳染性，且存活時(shí)間不超過7～13 d。ASF的慢性型僅在試驗(yàn)條件下可觀察到，ASFV來自歐洲過去ASF暴發(fā)期間的弱毒力毒株[12]。但最近的2項(xiàng)研究表明，在俄羅斯和立陶宛，一些感染了從野豬身上分離出ASFV的豬可能會(huì)發(fā)展出更長的病毒攜帶狀態(tài)，高達(dá)21 d[13]或沒有臨床癥狀。從以上案例推測家豬也可能發(fā)展成為病毒攜帶狀態(tài)。

表1 歐洲各國家豬感染ASFV流行株及血液、分泌物和排泄物中ASFV的定量研究

表2 實(shí)驗(yàn)和野外條件下家豬和野豬非洲豬瘟病毒 （ASFV）傳播的定量研究

2 食物傳播途徑

國際研究指出了易感豬可能食用被ASFV污染的食品范圍。ASFV可在豬肉、脂肪和皮膚以及不同類型的豬肉產(chǎn)品（如香腸和臘腸）中，在負(fù)溫和室溫下保存數(shù)月[14]。有報(bào)道指出在俄羅斯境內(nèi)肉制品中檢測到ASFV，在拉脫維亞境內(nèi)肉制品中也檢測到ASFV（42個(gè)肉制品樣本中有6個(gè)ASFV基因呈陽性）[15]。這都強(qiáng)調(diào)了通過食物傳播途徑的潛在相關(guān)性。所以，在全球自由放養(yǎng)和家庭農(nóng)場養(yǎng)殖方式范圍內(nèi)[16]，泔水飼養(yǎng)作為傳統(tǒng)養(yǎng)豬系統(tǒng)中的普遍做法，在ASFV向家豬的傳播中發(fā)揮重要作用。俄羅斯的大多數(shù)ASF案例都是自由農(nóng)場和家庭農(nóng)場在先，大型商業(yè)農(nóng)場在后暴發(fā)。最近的流行病學(xué)調(diào)查也表明，被感染野豬分泌物污染的新鮮草和種子可能是自由放養(yǎng)豬只的感染源。

然而，對(duì)通過受污染食物傳播ASFV的重要因素了解的很少。Greig等人用受污染的牛奶進(jìn)行了傳播試驗(yàn)，在這項(xiàng)研究中高毒性Tanzania ASFV菌株感染劑量中位數(shù)（要求在50%的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成感染的微生物劑量，特殊情況下的有效劑量中位數(shù)）ID50被測定為105.4HAD50/mL[17]。一項(xiàng)研究還表明，家豬在食用被Kenya ASFV毒株污染的糞便和尿液時(shí)受到感染，通過攝入受該菌株污染的豬組織進(jìn)行感染需要高劑量病毒（至少105HAD50/mL）才能有效感染豬[18]。Parker等人將East Africa ASFV株的鼻內(nèi)ID50中位數(shù)確定為102.9HAD50/mL，但是家豬沒有食用同一高劑量病毒污染的食物而受到感染，這提示根據(jù)ASFV存在于食物中或直接口服接種，可能存在不同的感染劑量。一些研究已經(jīng)調(diào)查了接種途徑、感染劑量和毒力水平之間的關(guān)系。Howey等人指出當(dāng)使用較低的感染劑量時(shí)，鼻腔途徑導(dǎo)致的ASF發(fā)病率高于口服途徑，這表明通過吸入比通過攝入的感染途徑更為寬松。口腔和鼻腔使用高毒力的ASFV株比毒力降低株的ID50高（約10倍）[19]。

3 野豬傳播途徑

研究表明，使用來自亞美尼亞（2008年）和車臣（2009年）的高致病性ASFV菌株，野豬和家豬一樣容易感染ASFV?？诜▌┝?106TCID50）、鼻腔（劑量3-25 HAD50/mL） 和肌肉 （劑量 103HAD50/mL） 感染ASFV導(dǎo)致100%的死亡率。不論年齡或性別的野豬均出現(xiàn)了與家豬相似的非特異性臨床癥狀，包括發(fā)燒、食欲不振、腹瀉和嗜睡，并在7～9 d內(nèi)死亡。

最近的2項(xiàng)試驗(yàn)研究表明，與感染野豬直接接觸是ASFV有效的傳播途徑。易感豬與來自亞美尼亞或車臣的ASFV株感染的野豬直接接觸，在暴露后6～12 d后變得有傳染性。當(dāng)將易感豬與感染野豬隔離在相鄰圍欄內(nèi)以防止直接接觸時(shí)，傳播發(fā)生在暴露后21 d。Pietschmann等研究發(fā)現(xiàn)，在直接和間接接觸情況下，使用亞美尼亞ASFV株系的野豬和家豬群體之間的R0分別為5.0（95%可信區(qū)間，1.4～10.7）和0.5（95%可信區(qū)間，0.1～1.3）。在俄羅斯的ASF暴發(fā)期間，Iglesias等人對(duì)野豬群間ASFV傳播的動(dòng)態(tài)進(jìn)行了量化，R0為1.58（95%可信區(qū)間，1.1～3.8） （見表2）。

幾次實(shí)地觀察證實(shí)了感染野豬向家豬傳染ASFV的可能性。在俄羅斯，一些ASF病例在家豬中被發(fā)現(xiàn)之前主要是在野豬中發(fā)現(xiàn)的，在ASF感染的農(nóng)場附近也觀察到了由ASF引起的野豬死亡。最近的一項(xiàng)研究表明，俄羅斯西北部地區(qū)家豬和野豬中的ASF病例在空間上是相關(guān)的。在俄羅斯周邊國家邊境發(fā)現(xiàn)大量受ASFV感染的野豬尸體[20]。因此，ASFV很可能通過接觸感染性野豬、感染性自由放養(yǎng)豬或感染豬的尸體或被農(nóng)民或獵人不當(dāng)處置的野豬這些方式在野豬之間傳播。然而，目前尚不清楚ASFV是否能在這些野豬種群中持續(xù)存在。最近的分析表明，俄羅斯西南部地區(qū)野豬ASF病例之間沒有時(shí)空交互作用，表明ASFV在野豬種群中的持續(xù)性有限[21]。

4 媒介物傳播

研究提供了ASFV向家豬傳播的可能環(huán)境范圍。ASFV可在感染豬的血液、糞便和尿液中持續(xù)數(shù)周保持感染力[22]。在被Georgia強(qiáng)毒株污染的糞便和尿液中ASFV存活期為：4℃下分別為8 d和15 d，在21℃下為5 d[23]。然而，家豬接觸受污染的媒介物感染的情況從未得到明確證明。在俄羅斯和立陶宛的大型商業(yè)農(nóng)場中發(fā)生的一些ASF暴發(fā)是由于沒有遵守生物安全規(guī)則造成的，例如，對(duì)衣物和靴子的消毒不當(dāng)，或?qū)⑹芪廴镜氖称穾У睫r(nóng)場內(nèi)。打獵的豬場主也可能增加ASFV進(jìn)入豬場的風(fēng)險(xiǎn)，特別是處理可能感染的野豬尸體。

5 昆蟲傳播

研究表明，Georgia株ASFV能夠在南歐常見的游走性鈍緣蜱中復(fù)制，并至少保存12 w[24]。然而，ASFV不能在硬蜱（蓖麻硬蜱和網(wǎng)紋革蜱）中復(fù)制，這些硬蜱在歐洲也很常見，表明這種蜱科的媒介能力有限[25]。螫蠅屬蠅在試驗(yàn)中被證明能夠在有限的時(shí)間內(nèi)機(jī)械地將ASFV傳播給家豬。然而，在立陶宛受ASF影響的農(nóng)場采集的蒼蠅ASFV檢測呈陰性。在豬血虱中也檢測到ASFV，這是溫帶地區(qū)流行的豬虱。從立陶宛和俄羅斯受ASF影響的農(nóng)場采集了其他活動(dòng)物（如嚙齒動(dòng)物和鳥類）的血液樣本，但ASFV檢測呈陰性[26]。

6 研究重點(diǎn)

過去幾年中，在了解全球各國ASFV傳播的重要來源方面取得了重要進(jìn)展。表3總結(jié)了未來需要研究的重點(diǎn)。ASFV在家豬中的傳播主要表現(xiàn)為感染豬通過感染性體液的接觸以及豬圈之間的短距離氣體傳播。目前的知識(shí)還表明，通過攝入受污染的飼料，ASFV是可能會(huì)傳播的。然而，在食用含有未經(jīng)處理的感染豬組織的飼料時(shí)，家豬的最低感染劑量還需要更多的研究來確定。此外，本綜述強(qiáng)調(diào)，在實(shí)驗(yàn)條件下，ASFV從野豬到家豬的感染和傳播可能與觀察到的豬到豬的傳播情況非常相似。在野外，暴露的時(shí)間和程度將在確定野豬向家豬的傳播方面起主要作用。關(guān)鍵在于家豬和野豬活動(dòng)的邊緣區(qū)域，并確定2個(gè)種群之間有效接觸的可能性。對(duì)于在歐洲一些國家流通的ASFV毒株減弱的可能性和家豬或野豬發(fā)展為慢性感染、恢復(fù)后成為病毒攜帶者的可能性仍然存在疑慮。這需要進(jìn)一步研究ASFV感染的進(jìn)化、分子流行病學(xué)、病理學(xué)和免疫學(xué)，最后進(jìn)行確認(rèn)。關(guān)于媒介物（車輛表面、設(shè)備和動(dòng)物工作服等）在ASFV傳播中作用的關(guān)鍵因素也缺乏數(shù)據(jù)支撐，需要進(jìn)一步的研究。最后，應(yīng)開展全社會(huì)研究，進(jìn)一步了解根除該疾病和遵守生物安全條例的驅(qū)動(dòng)因素，因?yàn)檫@對(duì)于有效控制ASF傳播至關(guān)重要。

7 有效防止ASF傳播的方法

非洲豬瘟是目前全球養(yǎng)豬業(yè)面臨的主要威脅之一，由于沒有針對(duì)ASF的疫苗，生物安全是防止ASF在國內(nèi)養(yǎng)豬場之間和內(nèi)部傳播的關(guān)鍵。根據(jù)目前已經(jīng)確定的傳播途徑和一些需要重點(diǎn)研究的可能性因素，通過查閱大量文獻(xiàn)確定了包括對(duì)大型豬場、家庭豬場和散養(yǎng)戶在內(nèi)的37項(xiàng)預(yù)防措施，旨在減少ASF在國內(nèi)的傳播。充分執(zhí)行這些措施可以在防止和控制ASF方面取得重大進(jìn)展，并有可能有助于ASF的根除。

表3 ASFV的研究類型及研究重點(diǎn)

預(yù)防ASF在豬場傳播的措施包括：1、在引進(jìn)新豬只以及獲取繁殖場的精液、卵子或胚胎之前，檢查ASF檢測證書和健康狀況；2、嚴(yán)格豬場探訪制度，有登記，并制定有關(guān)鞋類和服裝的生物安全措施；3、對(duì)工人和經(jīng)營者的培訓(xùn)；4、場內(nèi)人員不得接觸外部豬；5、豬場周邊設(shè)圍欄，防止與外部豬和野豬接觸；6、無害化處理屠體、屠宰殘余物和食物廢物；7、禁止在控股公司或單位之間共享設(shè)備；8、在飼養(yǎng)動(dòng)物的單位入口處使用消毒池；9、每日健康檢查豬群臨床癥狀和死亡率；10、設(shè)施、車輛和設(shè)備的清潔和消毒規(guī)程；11、豬場選址合適，遠(yuǎn)離野豬區(qū)，有地理屏障；12、蒼蠅防治措施；13、建立清潔/骯臟區(qū)域（包括更衣室和淋?。?4、動(dòng)物進(jìn)出口的安排，包括車輛進(jìn)入?yún)f(xié)議、裝載區(qū)域、豬運(yùn)輸工具；15、運(yùn)輸車輛清潔消毒規(guī)程；16、進(jìn)貨動(dòng)物檢疫期及檢疫室；17、動(dòng)物和農(nóng)場記錄包括動(dòng)物轉(zhuǎn)移的確定；18、執(zhí)行生物安全措施的內(nèi)部審計(jì)和評(píng)價(jià)；19、規(guī)定食品從業(yè)人員不得進(jìn)入農(nóng)場；20、正確處理糞便和死動(dòng)物；21、嚴(yán)格執(zhí)行泔水飼養(yǎng)禁令；22、限制生豬，不允許與其他農(nóng)場的生豬、野豬、野豬或其產(chǎn)品接觸；23、農(nóng)場工作人員在受感染的野豬區(qū)工作，他們不應(yīng)該捕獵，接觸家豬之間間隔48 h；24、豬場周邊包括入口有效的清洗及消毒；25、屠宰前和屠宰時(shí)的獸醫(yī)監(jiān)管；26、屠宰前后的清潔和消毒規(guī)程（屠宰工具、設(shè)施、衣物和鞋類等）；27、非商業(yè)農(nóng)場不得飼養(yǎng)用于交配目的的母豬或公豬；28、在非商業(yè)農(nóng)場之間/來自非商業(yè)農(nóng)場的人員不要流動(dòng)；29、避免在有可能接觸ASF的區(qū)域使用新鮮飼料；30、通過政府培訓(xùn)方案促進(jìn)對(duì)豬場人員的培訓(xùn)，改善獲得保健服務(wù)的機(jī)會(huì)；31、處理和儲(chǔ)存（野豬接觸不到的）草或谷物至少30 d或禁止其使用；32、避免使用稻草墊，除非經(jīng)過ASFV滅活處理并至少保存90 d；33、不得與其他農(nóng)場交換飼料或床上用品；34、禁止在沒有生物安全措施的公共區(qū)域或公共森林進(jìn)行自由放養(yǎng)；35、室外農(nóng)場之間的距離（至少1 km），以盡量減少通過直接和間接接觸引入ASF的風(fēng)險(xiǎn)；36、如果存在蜱，避免使用傳統(tǒng)的養(yǎng)豬設(shè)施（通常是用木頭和石頭做成的，蜱可以藏起來）；37、傳統(tǒng)養(yǎng)豬設(shè)施存在蜱蟲時(shí)，進(jìn)行化學(xué)防治。通過以上方法，可以有效防止ASF的傳播。