馬薇薇

（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150000）

0 引言

外泌體(exosomes) 是來自于細(xì)胞外囊泡中的分子，它可以攜帶并轉(zhuǎn)移多種生物學(xué)信號(hào)，并且通過多種方式作用于相應(yīng)的靶細(xì)胞，以在細(xì)胞之間傳遞信息。作為細(xì)胞間通訊新機(jī)制，外泌體在機(jī)體各項(xiàng)生理及病理過程均發(fā)揮重要作用。本文綜述外泌體在維持妊娠穩(wěn)定狀態(tài)過程中所起的重要作用

1 外泌體的生物學(xué)特點(diǎn)

外泌體直徑為30～100 nm 的磷脂雙分子層膜性納米微型囊泡，由細(xì)胞產(chǎn)生，密度為 1.10～1.19 g/mL[1-2]，可以在組織微環(huán)境間傳遞信息，是細(xì)胞與細(xì)胞之間溝通的橋梁。事實(shí)上，自上個(gè)世紀(jì)40 年代起就已經(jīng)有對(duì)細(xì)胞外囊泡的研究，外泌體的首次提出是由Johnstone 等第一個(gè)分離出內(nèi)源性囊泡[3]。

目前有研究證實(shí)當(dāng)細(xì)胞受到外刺激時(shí)，外泌體以質(zhì)膜融合的方式釋放到細(xì)胞外空間。分子有效荷載通過轉(zhuǎn)運(yùn)必需內(nèi)體分選復(fù)合物（endosomal sorting complex required for transport，ESCRT）[4]填充至富含腔內(nèi)囊泡的多囊泡體，并且以膜融合的方式將其釋放至胞外，此多囊泡體即為外泌體。

外泌體在電鏡下特征性的杯托狀外形[5]。外泌體可在體液中廣泛存在如外周血、乳汁、尿液、唾液、腹水和羊水等。其表面的蛋白為四跨膜蛋白(CD9、CD63、CD81、CD82)和熱休克蛋白 (HSP70)[6]。它攜帶的多種生物活性因子參與細(xì)胞間的信息交流與物質(zhì)交換，在細(xì)胞間通訊、免疫調(diào)節(jié)、抗原提呈、腫瘤侵襲等多種生理、病理過程中都起到重要作用[7]。相關(guān)的研究表明在妊娠期間母體血漿中外泌體的濃度逐漸增加，在維持妊娠期間胎兒正常發(fā)育中發(fā)揮作用[8]。

2 外泌體參與維持妊娠穩(wěn)定狀態(tài)的研究進(jìn)展

2.1 胎盤外泌體

外泌體的發(fā)現(xiàn)更新了細(xì)胞間信息的傳遞途徑。妊娠期間，人的胎盤承擔(dān)胎兒和母體的主要聯(lián)系物的角色，通過臍帶和胎兒相連。胎盤細(xì)胞可以通過細(xì)胞外囊泡與母體組織溝通以調(diào)節(jié)其生物學(xué)特性[9]。有研究表明，在妊娠早期（6 周），就可在母體血循環(huán)中檢測(cè)到胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞來源的外泌體，且其濃度隨孕周增加而增加。胎盤外泌體途徑代表了妊娠期間母體與胎兒之間溝通的另一方式，以促進(jìn)母體對(duì)妊娠的適應(yīng)性改變。

Ann-Christin Stenqvist 等人證實(shí)胎盤外泌體攜帶功能性Fas 配體和TRAIL 分子并在活化的免疫細(xì)胞中傳遞細(xì)胞凋亡，這一機(jī)制提示胎盤外泌體介導(dǎo)的胎兒免疫特權(quán)。細(xì)胞凋亡對(duì)于調(diào)節(jié)懷孕期間胎兒的免疫特權(quán)中起著至關(guān)重要的作用[10-11]。它可以使得妊娠期間人類胎盤和胎兒同種異體移植避開了有害的母體免疫攻擊，在子宮腔中享有免疫特權(quán)，從而得以維持妊娠的穩(wěn)定狀態(tài)[12-13]。

他們研究了人類早期和足月胎盤中兩種生理相關(guān)的死亡信號(hào)，TNF 家族成員Fas 配體（FasL）和TRAIL 的表達(dá)及其體外凋亡活性。兩種分子均在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，局限于合胞體滋養(yǎng)層（STB）的晚期內(nèi)質(zhì)室，在人胎盤STB 中，凋亡誘導(dǎo)分子fasl 和trail 被組成型轉(zhuǎn)錄，并在多泡體（MVB）膜和管腔內(nèi)囊泡膜上表達(dá)為蛋白質(zhì)，這些囊泡膜作為外泌體在細(xì)胞外空間釋放。FasL 和Trail 的蛋白表達(dá)嚴(yán)格局限于STB 的內(nèi)質(zhì)室，而頂端和基底部的合胞體營養(yǎng)母細(xì)胞膜完全沒有FasL 和Trail 表達(dá)。胎盤外泌體膜上富集FasL 和TRAIL，可以形成生物活性寡聚化分子，誘導(dǎo)死亡的信號(hào)傳導(dǎo)，以劑量依賴性方式觸發(fā)Jurkat T 細(xì)胞以及來自健康供體的活化外周血單核細(xì)胞（PBMC）的細(xì)胞凋亡[14]。

此研究結(jié)果表明人類早期和足月胎盤能夠分泌功能性FasL 和TRAIL，傳遞細(xì)胞凋亡，因此可能有助于保護(hù)胎兒胎盤免受活化的母體免疫細(xì)胞的影響。

2.2 胚胎外泌體

早期胚胎發(fā)生的一個(gè)主要方面一直受到廣泛關(guān)注，即胚泡內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（inner cell mass,ICM）中的細(xì)胞在多大程度上與其周圍環(huán)境相互作用，從而形成正常發(fā)育的基本生理過程。已有研究發(fā)現(xiàn)，在胚胎早期發(fā)育過程中，胚胎的狀態(tài)會(huì)影響胚胎釋放外泌體。

Desrochers 等人證實(shí)，來源于ICM 的胚胎干細(xì)胞(embryonic stem, ES)釋放微囊泡(microvesicles, MVs)，激活滋養(yǎng)細(xì)胞信號(hào)通路，導(dǎo)致遷移增強(qiáng)。這是通過纖連蛋白和層粘連蛋白的相互作用完成的，纖連蛋白和層粘連蛋白是存在于胚胎干細(xì)胞細(xì)胞來源的微囊泡上的兩種細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，沿滋養(yǎng)細(xì)胞表面與整合蛋白相互作用。他們還證明在胚胎被移植到雌性小鼠的子宮后，將胚胎干細(xì)胞MVs 注射到囊胚中可以提高胚胎的植入率[15]。

胚胎可以通過分泌外泌體來調(diào)節(jié)自身的發(fā)育，從而我們可以推測(cè)外泌體在治療妊娠相關(guān)疾病應(yīng)用方面的有潛在用途，可以促進(jìn)胚胎的自然適應(yīng)能力，以成功植入和建立妊娠。

2.3 蛻膜巨噬細(xì)胞外泌體

母胎界面的細(xì)胞大多由蛻膜免疫活性細(xì)胞、蛻膜基質(zhì)細(xì)胞、腺上皮細(xì)胞以及胎兒來源的滋養(yǎng)細(xì)胞構(gòu)成。滋養(yǎng)細(xì)胞正常發(fā)揮生物學(xué)功能是維持妊娠的關(guān)鍵, 外泌體影響滋養(yǎng)細(xì)胞的功能，滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲能力不足會(huì)導(dǎo)致子癇前期等病理性妊娠。

應(yīng)翔等人[16]的研究結(jié)果證實(shí)，蛻膜巨噬細(xì)胞的外泌體可被滋養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)吞，并發(fā)揮其相應(yīng)的生物學(xué)活性。分離復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者（URSA）和正常早孕人工流產(chǎn)和的蛻膜巨噬細(xì)胞的外泌體，分別同滋養(yǎng)細(xì)胞HTR8/ Snveo 細(xì)胞共培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)同正常早孕人工流產(chǎn)蛻膜巨噬細(xì)胞外泌體組相比，URSA 患者細(xì)胞遷移數(shù)明顯下降，且其細(xì)胞的活力也有明顯下降。由此提示蛻膜巨噬細(xì)胞可通過外泌體調(diào)控滋養(yǎng)細(xì)胞 生物學(xué)行為，造成胚胎停止發(fā)育，參與URSA 的發(fā)生。

這為針對(duì)URSA 的巨噬細(xì)胞靶向治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)， 然而，為了為URSA 早期診治提供更加有效的方法，我們對(duì)于外泌體調(diào)節(jié)滋養(yǎng)細(xì)胞的分子機(jī)制，我們期待會(huì)有更好的研究。

3 討論

近年來很多研究表明，與健康正常孕婦相比，非妊娠婦女的外周血循環(huán)中外泌體的釋放量可忽略不計(jì)。母胎免疫耐受失衡可引起母體對(duì)胎兒的免疫排斥，可能導(dǎo)致復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、胎兒發(fā)育受限等病理性妊娠。外泌體可以攜帶多種生物活性分子，參與細(xì)胞間信息傳遞，并且其性質(zhì)較為穩(wěn)定，因此可以為大量敏感指標(biāo)提供參考，從而協(xié)助病理妊娠的診斷。外泌體是近年來研究的前沿領(lǐng)域，我們期待對(duì)其在維持妊娠穩(wěn)定中的作用會(huì)有更深層次的研究，為其在妊娠并發(fā)癥的診療中提供更好的依據(jù)。