王聰，賈喜花，李敏

（1.承德醫(yī)學(xué)院，河北 承德 067000；2.保定市第一中心醫(yī)院，河北 保定 071000）

0 引言

子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌及卵巢癌是女性生殖器系統(tǒng)常見的三大惡性腫瘤，嚴(yán)重困擾了女性身體健康和生命安全。目前，隨著免疫治療的興起，機(jī)體的免疫狀態(tài)與腫瘤的關(guān)系也越來(lái)越受到關(guān)注。其中，T 淋巴細(xì)胞亞群主要以細(xì)胞免疫功能來(lái)作為機(jī)體免疫功能的一大組成部分，不僅參與腫瘤免疫激活，在免疫逃逸中也發(fā)揮著重要作用。隨著腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，機(jī)體的免疫狀態(tài)也會(huì)隨之發(fā)生動(dòng)態(tài)的波動(dòng)。因此，通過檢測(cè)腫瘤患者外周T 血淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量及比例，來(lái)對(duì)腫瘤患者的免疫狀態(tài)進(jìn)行評(píng)估和監(jiān)測(cè)，從而為臨床醫(yī)生早期診斷以及設(shè)計(jì)切實(shí)可行的免疫治療方案提供依據(jù)。

1 T 淋巴細(xì)胞亞群相關(guān)概述

淋巴細(xì)胞主要是由骨髓中的造血干細(xì)胞分化、發(fā)育而來(lái)，其中的一部分造血干細(xì)胞隨血流進(jìn)入胸腺，并在胸腺中發(fā)育成熟，成為T 淋巴細(xì)胞，另一部分在骨髓中發(fā)育成熟，稱為B淋巴細(xì)胞[1]。根據(jù)T 細(xì)胞表面標(biāo)志及功能主要分為：CD4+ T 細(xì)胞、CD8+ T 細(xì)胞、CD4+CD25+T 細(xì)胞等。其中CD4+ T細(xì)胞又稱為輔助T 細(xì)胞(helper T cell，Th)，具有協(xié)助體液免疫和細(xì)胞免疫的功能。CD8+ T 細(xì)胞又稱為細(xì)胞毒性T 細(xì)胞(cytotoxic T lymphocyte，CTL)，具有直接殺傷靶細(xì)胞的功能。CD4+CD25+T 細(xì)胞又稱為調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞(regulatory T cell，Treg)，是一類發(fā)揮免疫抑制作用的T 細(xì)胞亞群。

1.1 CD4+T 細(xì)胞在腫瘤免疫中的作用

CD4+T 細(xì)胞又稱為輔助性T 細(xì)胞，在細(xì)胞免疫以及體液免疫中均參與發(fā)揮免疫反應(yīng)，主要組織相容性復(fù)合體- Ⅱ(major histocompatibility complex- Ⅱ，MHC- Ⅱ) 遞呈的多肽抗原反應(yīng)可以將其激活，Th 細(xì)胞被激活后能夠通過分泌多種細(xì)胞因子來(lái)輔助調(diào)節(jié)或者增強(qiáng)免疫反應(yīng)[2-3]。根據(jù)其分泌的細(xì)胞因子和功能的不同，將其主要分為Th1 亞群和Th2 亞群，其中Th1 細(xì)胞被認(rèn)為是參與腫瘤免疫激活的主要亞群，其主要分泌IL-2、 IFN-γ、腫瘤壞死因子 (tumor necrosis factor，TNF)等介導(dǎo)細(xì)胞免疫，協(xié)助CTL 激活，使其擴(kuò)增來(lái)發(fā)揮特異性免疫反應(yīng)，另外也可以增加NK 細(xì)胞的細(xì)胞毒性，發(fā)揮抗腫瘤作用；Th2 細(xì)胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-10 等細(xì)胞因子，產(chǎn)生刺激信號(hào)，介導(dǎo)機(jī)體體液免疫應(yīng)答，作用于B 細(xì)胞的增殖分化，來(lái)增強(qiáng)腫瘤非特異性免疫反應(yīng)。同時(shí)Th2 還有抑制Th1 增殖的功能[4]。

1.2 CD8+T 細(xì)胞在腫瘤免疫中的作用

CD8+T 細(xì)胞又稱為細(xì)胞毒性T 細(xì)胞，能直接攻擊帶有變異抗原的腫瘤細(xì)胞，在腫瘤細(xì)胞免疫中起主要作用。抗原提呈細(xì)胞（APC）將腫瘤抗原加工后與主要組織相容性復(fù)合體-Ⅰ（MHC-Ⅰ）類抗原結(jié)合形成MHC-Ⅰ復(fù)合物，提呈于細(xì)胞表面，T 細(xì)胞通過其特異性受體(TCR)識(shí)別，與該復(fù)合物結(jié)合特異性殺傷腫瘤細(xì)胞[5]。CTL 的特異性殺傷作用主要有兩條途徑來(lái)進(jìn)行，一是穿孔素-顆粒酶途徑，CTL 細(xì)胞被激活后通過釋放細(xì)胞毒素來(lái)殺傷靶細(xì)胞，其中穿孔素的作用是使靶細(xì)胞膜穿孔形成孔道，顆粒酶含有顆粒溶解素，其通過孔道進(jìn)入靶細(xì)胞，使細(xì)胞溶解凋亡；二是死亡受體途徑，即CTL 表面的Fas 配體通過與靶細(xì)胞表面的Fas 分子相結(jié)合，使靶細(xì)胞內(nèi)Caspase 酶活化，從而誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡[6-7]。

1.3 CD4+CD25+Treg 細(xì)胞在腫瘤免疫中的作用

CD4+CD25+Treg 屬于調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞，主要通過各種細(xì)胞和體液機(jī)制發(fā)揮其免疫抑制功能。多項(xiàng)研究表明，在多種癌癥患者的外周血以及腫瘤組織微環(huán)境中CD4+CD25+Treg細(xì)胞數(shù)量增加[8]。Treg 細(xì)胞可以抑制多種效應(yīng)淋巴細(xì)胞，其主要機(jī)制有：通過細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞抗原-4(CTLA-4)與APC 介導(dǎo)抑制效應(yīng)T 細(xì)胞的激活；分泌具有免疫抑制功能的細(xì)胞因子(如IL-10、IL-35 和TGF-β)；將ATP 轉(zhuǎn)化為腺苷，防止T 細(xì)胞活化；分泌顆粒酶、穿孔素破壞效應(yīng)細(xì)胞[9-11]。另外，有證據(jù)表明程序性細(xì)胞死亡-1(PD-1)是Treg 細(xì)胞和效應(yīng)T 細(xì)胞的負(fù)調(diào)節(jié)因子，提示PD-1 阻斷增強(qiáng)了Treg 細(xì)胞的抑制功能[12]。Treg 細(xì)胞通過抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)，增強(qiáng)腫瘤逃避免疫清除的能力，使其成為腫瘤免疫治療的重要方式之一。通過減少Treg 細(xì)胞的數(shù)量和抑制其活性可能是一種潛在且有效的對(duì)抗腫瘤進(jìn)展的策略。

2 常見婦科腫瘤與T 淋巴細(xì)胞亞群研究進(jìn)展

2.1 子宮頸癌與T 淋巴細(xì)胞亞群研究進(jìn)展

已有研究表明，宮頸癌是一種免疫原性惡性腫瘤，提示高危型人乳頭狀瘤病毒（HPV）持續(xù)性感染與宮頸癌的發(fā)生有密切關(guān)系[13]。當(dāng)女性感染HPV 病毒后，大多數(shù)能依靠機(jī)體自身免疫系統(tǒng)將其清除。但是當(dāng)機(jī)體免疫功能降低，高危型HPV 持續(xù)性感染，就可能產(chǎn)生宮頸病變，直至發(fā)展成為宮頸癌。宋利[14]、劉春玲[15]、于鴻等[16]通過檢測(cè)宮頸癌患者與健康女性外周血T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量及比例對(duì)比分析，研究結(jié)果提示：宮頸癌患者外周血CD3+、CD4+T 細(xì)胞以及CD4+/CD8+比值相比正常健康女性顯著降低，而CD8+T 淋巴細(xì)胞增高，并且CD3+、CD4+T 淋巴細(xì)胞比值隨患者臨床分期的增加而逐漸降低，反之，CD8+T 細(xì)胞隨患者臨床分期增加而逐漸增高。從而提示機(jī)體的免疫功能隨著臨床分期的增加而降低，兩者呈負(fù)相關(guān)。Hogan 等[17]研究提示手術(shù)創(chuàng)傷會(huì)抑制機(jī)體的免疫反應(yīng)，主要是由于創(chuàng)傷導(dǎo)致的神經(jīng)內(nèi)分泌反應(yīng)釋放激素抑制。王新會(huì)等[18]、童武松[19]、肖秀蘭[20]探究了放化療或單純放療對(duì)機(jī)體細(xì)胞免疫功能的影響，在治療前后檢測(cè)患者淋巴細(xì)胞亞群水平，結(jié)果提示：宮頸癌患者在放療或放化療治療后外周血CD3+、CD4+T 以及CD4+/CD8+T 比值相比治療前均明顯偏高，CD8+T 細(xì)胞、treg 細(xì)胞所占比值比治療前下降，并且這一現(xiàn)象在放化療組更為顯著。綜上所述，宮頸癌患者的免疫功能的變化貫穿了整個(gè)疾病的發(fā)生發(fā)展及治療的過程，檢測(cè)機(jī)體免疫功能變化，為宮頸癌患者的診斷、治療及預(yù)后都有著重要意義，手術(shù)、放化療在治療腫瘤的過程中也對(duì)機(jī)體的免疫功能造成損傷，因此免疫治療也更成為宮頸癌治療的新探索。

2.2 子宮內(nèi)膜癌與T 淋巴細(xì)胞亞群研究進(jìn)展

國(guó)內(nèi)外一些研究通過檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌患者與正常健康對(duì)照人群外周血T 細(xì)胞亞群的差異，探索T 細(xì)胞亞群檢測(cè)是否可以為子宮內(nèi)膜癌的提供診斷依據(jù)。Pascual-García 等[21]的研究納入了35 例子宮內(nèi)膜癌、22 例健康對(duì)照，通過檢測(cè)外周血中T 淋巴細(xì)胞亞群比例，研究表明：子宮內(nèi)膜癌患者外周血中CD3+、CD4+T 細(xì)胞數(shù)目相對(duì)于健康獻(xiàn)血者明顯降低，CD8+T 細(xì)胞數(shù)目所占比例無(wú)明顯變化。Zhang 等[22]研究提示了相比于健康人群，子宮內(nèi)膜癌患者外周血中Treg 細(xì)胞水平顯著增加。此外，有多項(xiàng)研究表明，CD8 高表達(dá)的子宮內(nèi)膜癌患者的無(wú)進(jìn)展生存期顯著延長(zhǎng)，可作為患者總生存率的獨(dú)立預(yù)測(cè)指標(biāo)[23-24]。上述研究均表明了T 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)在子宮內(nèi)膜癌檢測(cè)的應(yīng)用價(jià)值，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)子宮內(nèi)膜癌患者T 淋巴細(xì)胞亞群的變化，對(duì)判斷早期診斷、判斷患者預(yù)后、指導(dǎo)個(gè)體化治療均有重要意義。

2.3 卵巢癌與T 淋巴細(xì)胞亞群研究進(jìn)展

多項(xiàng)國(guó)內(nèi)外研究顯示，相比于健康對(duì)照組，卵巢腫瘤患者外周血和腫瘤組織中CD4+CD25+Treg 細(xì)胞的比例明顯升高，而Treg 細(xì)胞的增多將抑制機(jī)體其他免疫細(xì)胞的激活和活化，增加腫瘤細(xì)胞免疫逃逸，利于腫瘤生長(zhǎng)[25-26]。隋雪梅等[27]納入114 例卵巢癌患者，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)其外周血T 淋巴細(xì)胞亞群水平，研究結(jié)果提示：隨著腫瘤臨床分期的增加，患者CD3+、CD4+T 細(xì)胞、CD4+/CD8+T 比值逐漸減少而CD8+T細(xì)胞逐漸升高，這也證實(shí)了患者免疫狀態(tài)與臨床分期有直接關(guān)系。隨著腫瘤患者的臨床分期的增加，其外周血T 淋巴細(xì)胞亞群受到抑制的程度也隨之逐漸增強(qiáng)，從而導(dǎo)致機(jī)體抗腫瘤免疫功能逐漸降低，進(jìn)一步促進(jìn)了腫瘤進(jìn)展。因此，外周血T 淋巴細(xì)胞檢測(cè)對(duì)于檢測(cè)卵巢癌患者的免疫功能狀態(tài)的變化，以此判斷治療療效、判斷預(yù)后以及對(duì)于免疫治療的探索均有積極作用。

3 小結(jié)

在抗腫瘤免疫中，T 淋巴細(xì)胞亞群所代表的細(xì)胞免疫起著主要作用。其數(shù)量和比例在一定條件下可以體現(xiàn)機(jī)體的免疫狀態(tài)。在預(yù)測(cè)療效、預(yù)后等方面均有一定潛力，這還需要大樣本的臨床試驗(yàn)驗(yàn)證?？鼓[瘤免疫的免疫治療是繼傳統(tǒng)手術(shù)、化學(xué)藥物、放射治療之后的具有突破性且療效佳的抗腫瘤療法，成為腫瘤生物治療的又一法寶。T 淋巴細(xì)胞亞群可以作為反映腫瘤患者免疫狀態(tài)的指標(biāo)，具有方便、可重復(fù)的優(yōu)勢(shì)。如何更加標(biāo)準(zhǔn)化的進(jìn)行隨訪、檢測(cè)，通過檢測(cè)患者免疫狀態(tài)尋找免疫治療的最佳時(shí)機(jī)，為免疫治療與化療、放療聯(lián)合提供依據(jù)，這可能將成為接下來(lái)值得關(guān)注的重點(diǎn)。