雷守成，田金鳳，孫卓然，尚遠(yuǎn)宏

(1.呼和浩特市疾病預(yù)防與控制中心 呼和浩特010010；2.呼和浩特市地方病防治中心 呼和浩特010010；3.攀枝花學(xué)院醫(yī)學(xué)院 四川 攀枝花617000)

0 引言

母乳是嬰兒最佳的天然食品，其中的營養(yǎng)素比例適當(dāng)，既保證了嬰兒的能量供給，又為其提供了必要的物質(zhì)保障[1-3]。

母乳中脂肪平均含量為3%～5%，能夠為6個月內(nèi)的嬰兒提供45%～50%的能量。母乳脂肪中98%是三酰甘油，磷脂占0.2%～2.0%，其富含不飽和脂肪酸，是神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞膜的重要成分，在細(xì)胞信號傳導(dǎo)和嬰兒智力發(fā)育方面具有重要作用[4-6]。

目前關(guān)于母乳中磷脂含量的研究非常有限。受實驗設(shè)計、個體及地域差異的影響，已報道的法國[7]、美國[8]、西班牙[9]、日本[10]的母乳磷脂數(shù)據(jù)具有較大差距。國內(nèi)僅有夏袁[11]、何揚波[12]和高潤穎[13]分別對無錫、哈爾濱、齊齊哈爾、吉林及上海母乳中的磷脂進(jìn)行了研究，目前尚無中國乳都呼和浩特的相關(guān)報道。

本研究采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，對呼和浩特地區(qū)65個母乳樣本中的磷脂進(jìn)行了定性和相對定量分析，并對其影響因素進(jìn)行了相關(guān)性分析，為建立母乳合理喂養(yǎng)指南和母乳數(shù)據(jù)庫提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，也為我國生產(chǎn)更適合中國嬰兒的配方奶粉提供了可靠的科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對象

2018年8月至2019年8月，選取在呼和浩特地區(qū)居住2年以上，產(chǎn)后6個月內(nèi)健康產(chǎn)婦作為研究對象。

1.2 樣品采集

乳樣采集后放置于玻璃瓶中冰盒存放，立即帶回實驗室后于-80℃冰箱保存，1個月內(nèi)進(jìn)行各項磷脂的分析檢測。

1.3 方法

1.3.1 儀器和試劑

液相色譜儀（Waters Acquity UPLC）、液相色譜柱（ACQUITY UPCL?BEH C18 1.7μm,2.1×100 mm）、質(zhì)譜儀（Triple TOF TM 5600），以上儀器均來自北京京科瑞達(dá)科技有限公司。

磷脂酰膽堿標(biāo)準(zhǔn)品、磷脂酰乙醇胺標(biāo)準(zhǔn)品、鞘磷脂標(biāo)準(zhǔn)品、磷脂酰絲氨酸標(biāo)準(zhǔn)品和磷脂酰肌醇標(biāo)準(zhǔn)品，美國Sigma公司；異丙醇、乙腈、醋酸銨、甲醇、正己烷，均為色譜純，F(xiàn)isher公司；氯化鈉、二氯甲烷、甲醇，均為分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.3.2 膳食調(diào)查

采樣前調(diào)查乳母前一天飲食情況，包括正餐和加餐的食物攝入量。

1.3.3 磷脂的提取及測定

脂質(zhì)的提?。簠⒄誇olch[14]的方法。

磷脂的測定：參照何揚波[12]的方法。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同泌乳期母乳中磷脂相對含量變化的研究

根據(jù)產(chǎn)婦的泌乳期，將乳樣分成3組：初乳（3～7 d齡）、過渡乳（8～21 d齡）以及成熟乳（22～180 d齡），對磷脂相對含量的差異性進(jìn)行分析。

乳中的磷脂大部分位于乳脂肪球膜上，受乳腺中酶與基因表達(dá)的調(diào)控。不同泌乳期調(diào)控脂肪合成的酶與基因不同，造成乳腺對磷脂的合成作用發(fā)生改變，導(dǎo)致磷脂含量隨泌乳階段變化[15-16]。

本次研究對65份初乳、過渡乳和成熟乳進(jìn)行分析，共檢測出38種磷脂，其中磷脂酰膽堿（Phosphatidylcholine,PC）12種，磷脂酰乙醇胺（Phosphatidylethanolamine,PE）15種，鞘磷脂（Sphingomyelin,SM）5種，磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine,PS）3種，磷脂酰肌醇（Phosphatidylinositol,PI）3種。跟Liu[17]等從牛乳中檢測出來的58種磷脂相比，母乳中的PE種類更加豐富，共檢出15種，遠(yuǎn)大于牛乳中的7種；但是母乳中的PS和SM的種類分別是3種和5種，少于牛乳中的8種與17種。

PC的主要作用是促進(jìn)合成用于腦發(fā)育的乙酰膽堿[18]，而乙酰膽堿與運動功能和記憶力有關(guān)，可加快腦神經(jīng)細(xì)胞間信息傳遞速度，顯著提高大腦活力。CARCIA[19]研究表明，PC強(qiáng)化嬰兒奶粉可降低早產(chǎn)兒壞死性結(jié)腸炎的發(fā)生率，并具有較高的生物利用度。本次研究顯示，母乳中PC的相對含量最高，隨著泌乳期的延長而降低，從44.87%下降至33.09%，組間差異顯著（P＜0.05），這與前人研究[9,11]的結(jié)果一致，可能是由于母親乳腺中的生物合成物減少造成的，與嬰兒在哺乳期營養(yǎng)需求的變化相關(guān)[20]。本研究對不同泌乳期中的PC組分進(jìn)行了相對定量，結(jié)果顯示：12種PC中PC30∶0、PC32∶0、PC34∶0、PC34∶1、PC34∶2、PC34∶3、PC36∶2、PC O-34∶3這8種組分的相對含量在不同泌乳期中差異顯著（P＜0.05），這也側(cè)面說明PC作為大腦神經(jīng)質(zhì)的原料來源，對于嬰兒的智力發(fā)育起著重要的作用[21]。

表1 不同泌乳期母乳中磷脂相對含量（n=65，x±SD）

從表1分析可知，PE隨著泌乳期的延長而升高，組間差異顯著（P＜0.05），與日本母乳中PE的變化趨勢不一致[10]，這可能是由于不同人種調(diào)節(jié)PE合成的酶活性或者基因不同造成的，也可能是由于研究手段不同、標(biāo)準(zhǔn)品不同，造成研究結(jié)果的偏差。本次研究對不同泌乳期的PE組分進(jìn)行了相對定量，結(jié)果顯示：15種PE中，PE36∶2、PE36∶3、PE38∶4、PE38∶5和LPE18∶0的相對含量隨著泌乳期的變化呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢（P＜0.05），其余組分組間無顯著差異（P＞0.05）。

SM參與人體細(xì)胞的生長、分化、死亡等生理活動，此外，SM與其代謝產(chǎn)物也是中樞系統(tǒng)髓鞘的基本組分[22]，對早產(chǎn)兒喂養(yǎng)SM強(qiáng)化奶與其神經(jīng)發(fā)育呈正相關(guān)[23]。本次研究顯示：隨著泌乳期的延長，SM相對含量逐漸增加（P＜0.05），PS和PI的相對含量較為恒定（P＞0.05），這與高潤穎[13]等人的研究結(jié)果一致。

2.2 影響母乳中磷脂含量的多因素分析

將母乳中各種磷脂相對含量與乳母泌乳期、飲食、年齡等因素進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果見表2。

表2 母乳中磷脂相對含量與其他因素之間多元回歸系數(shù)檢驗表

從表2分析可知，PC相對含量與泌乳期呈顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），成熟乳中的PC相對含量為33.09%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于初乳和過渡乳，隨著泌乳期的延長，母乳中的PC相對含量呈下降趨勢。PC相對含量與肉類攝入量、蛋類攝入量呈顯著正相關(guān)（P＜0.05），可能是由于肉蛋類產(chǎn)品中磷脂較高的原因，這與高潤穎[13]等人的研究結(jié)果一致。

本次研究顯示，PE的相對含量、SM的相對含量均與泌乳期呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）。此外，泌乳期與肉類攝入量、水果蔬菜攝入量均呈顯著正相關(guān)（P＜0.05），這可能是由于初乳與過渡乳的采集時間正好是產(chǎn)婦“月子”期間，該階段呼和浩特地區(qū)產(chǎn)婦以面條、小米粥等為主要食物，較少攝入肉和水果蔬菜類食品造成的。

本次研究表明，5種磷脂的相對含量與乳母年齡、哺乳次數(shù)和分娩方式無明顯統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

3 結(jié)論

本次研究對65份初乳、過渡乳和成熟乳進(jìn)行分析，共檢測出38種磷脂，其中磷脂酰膽堿12種，磷脂酰乙醇胺15種，鞘磷脂5種，磷脂酰絲氨酸3種，磷脂酰肌醇3種。

母乳中PC的相對含量最高，隨著泌乳期的延長而降低，組間差異顯著（P＜0.05）；隨著泌乳期的延長，PE的相對含量逐漸升高（P＜0.05），SM的相對含量逐漸增加（P＜0.05），PS和PI的相對含量較為恒定（P＞0.05）。

PC相對含量與肉類攝入量、蛋類攝入量呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）；PE的相對含量、SM的相對含量均與泌乳期呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）；5種磷脂的相對含量與乳母年齡、哺乳次數(shù)和分娩方式無明顯統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。