爨淑楠 ，徐海軍 ，范瀟會(huì) ，張圣堯 ，蔣平 ，佘德勇 ，王書(shū)明

（1.皖西學(xué)院生物與制藥工程學(xué)院 安徽六安 237012；2.安徽金豐源畜牧科技有限公司 安徽六安 237010）

肉鴨脾壞死是我國(guó)近些年新發(fā)的一種鴨病，其病原是呼腸孤病毒，本病最初只發(fā)生在雛番鴨和半番鴨，但現(xiàn)在也發(fā)生于櫻桃谷鴨[1]。本病一年四季均可發(fā)生，夏季發(fā)生率最高。4 周齡以?xún)?nèi)的鴨子易發(fā)，2 周齡以?xún)?nèi)的雛鴨多發(fā)。發(fā)病率為20%～60%，高時(shí)可達(dá)80%，死亡率一般可達(dá)5%～60%。4 周齡以后的鴨子發(fā)病率明顯降低，多數(shù)發(fā)病后出現(xiàn)脾臟壞死，免疫功能受到較大影響，往往繼發(fā)大腸桿菌病或鴨疫里氏桿菌病[1]。本文報(bào)告了一例雛番鴨大腸桿菌和呼腸孤病毒混合感染。

1 發(fā)病情況

2019 年8 月6 日，六安市裕安區(qū)城南鎮(zhèn)某番鴨養(yǎng)殖戶(hù)送檢8只7 日齡番鴨（2 只存活，6 只死亡）。經(jīng)了解，該養(yǎng)殖戶(hù)飼養(yǎng)了1,500 只番鴨，在網(wǎng)床上分隔飼養(yǎng)。鴨群在5 日齡時(shí)出現(xiàn)發(fā)病。在2日齡時(shí)曾給鴨子洗澡。臨床癥狀表現(xiàn)為食欲減退或廢絕，精神萎靡，雙翅下垂，拉稀，甩頭、啰音、張口呼吸。發(fā)病當(dāng)天（8 月4 日）死亡5 只，8 月5 日死亡增加至40 只，8 月6 日早上死亡20 只，死亡速度較快。遂于8 月6 日上午來(lái)就診。

2 剖檢病變

圖1 脾臟呈不同程度壞死，嚴(yán)重時(shí)整個(gè)壞死、變黑

剖檢病變主要包括脾不同程度壞死，壞死灶呈黃白色，形狀不規(guī)則，嚴(yán)重時(shí)整個(gè)脾壞死發(fā)黑、變硬、質(zhì)脆（圖1）；肝有數(shù)量不等、芝麻大黃色壞死灶，嚴(yán)重者壞死灶呈暗綠色，肝臟內(nèi)部也有壞死灶存在（圖2、3）；鼻腔有較多混濁黏液，含黃白色干酪物，干涸時(shí)呈黃白色塊狀物；2 只鴨子有明顯纖維素性心包炎；肺淤血水腫。

圖2 肝臟內(nèi)部也有壞死灶

圖3 肝臟有散在壞死灶，輕度時(shí)呈灰黃色，嚴(yán)重時(shí)呈暗綠色

3 病原分離鑒定

無(wú)菌采集2 只活鴨的病變肝臟涂布接種于胰大豆蛋白胨瓊脂平板，37℃培養(yǎng)18h，其中1 只鴨子肝臟接種區(qū)長(zhǎng)出10 多個(gè)灰白色、隆起、邊緣整齊、表面濕潤(rùn)的菌落，直徑在0.1～2mm；另1 只鴨子肝臟接種區(qū)長(zhǎng)出片狀灰白色菌苔，邊緣長(zhǎng)有9 個(gè)灰白色菌落（圖4）。挑取灰白色菌落或菌苔，分別轉(zhuǎn)接于麥康凱平板和SS 平板，37℃培養(yǎng)18h，結(jié)果長(zhǎng)出紅色、隆起、邊緣整齊、表面濕潤(rùn)的菌落，說(shuō)明分離到的細(xì)菌為大腸桿菌。對(duì)分離菌涂片、革蘭氏染色、鏡檢，結(jié)果為革蘭氏陰性桿菌。

圖4 肝臟涂布接種培養(yǎng)后長(zhǎng)出的菌落、菌苔

4 呼腸孤病毒基因片段檢測(cè)

取病鴨壞死脾臟送到華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院用RT-PCR 法檢測(cè)呼腸孤病毒基因片段（引物序列為F15'-TGAGACGCCTGACTACGATT-3' 和R15'-ATGCTTGGAGTGAGACGACT-3'[2]，理論擴(kuò)增片段大小為380bp），檢測(cè)結(jié)果為鴨呼腸孤病毒基因片段陽(yáng)性。

5 藥敏試驗(yàn)

挑取分離自?xún)芍徊▲喌幕野咨浜途Γ謩e進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。結(jié)果兩者的藥敏試驗(yàn)結(jié)果基本相同（表1），這也證實(shí)兩者為同一細(xì)菌。從表1 可見(jiàn)，該大腸桿菌對(duì)氟苯尼考、恩諾沙星、阿莫西林均高敏。

表1 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

6 治療措施及效果

由于病情較急，就診當(dāng)天就開(kāi)了處方：恩諾沙星注射液、頭孢噻呋鈉、黃芪多糖注射液、干擾素混合頸部皮下注射，劑量按使用說(shuō)明，1 次/d，連用2d；扶正解毒散水煮10min，冷卻后和阿莫西林混合上午飲水，牧樂(lè)維1 號(hào)（主要成分為多種維生素、氨基酸、微量元素）下午飲水，劑量按使用說(shuō)明，連用4d。8 月11 日回訪得知，除了個(gè)別病重鴨外，其余鴨已恢復(fù)正常。

7 討論

鴨呼腸孤病毒病是由鴨呼腸孤病毒引起的雛鴨以脾、肝表面出現(xiàn)黃白色壞死灶，法氏囊萎縮為主要特征的一種急性傳染病[3,4]，其臨床癥狀因地域而異，主要表現(xiàn)為三種：多臟器出血癥、肝壞死癥和脾壞死癥[5]。脾壞死癥主要發(fā)生在湖北、北京、福建等地，其特征性病變主要表現(xiàn)為脾臟表面出現(xiàn)出血斑或黃白色壞死病灶，感染后期脾臟肉芽腫結(jié)構(gòu)，且變硬[6]。筆者以往在門(mén)診中經(jīng)常遇到鴨脾壞死的病例，但肝臟很少發(fā)生壞死。雛鴨的大腸桿菌感染常表現(xiàn)為纖維素性心包炎和肝周炎，俗稱(chēng)"包心包肝"。但大腸桿菌也會(huì)引起肉芽腫病變。本病例中肝臟壞死呈肉芽腫樣壞死，是否由大腸桿菌引起，還是由呼腸孤病毒引起，還是兩者協(xié)同引起，還有待進(jìn)一步探討。

鴨呼腸孤病毒感染目前還沒(méi)有特效藥。由于該病損傷脾臟，導(dǎo)致免疫功能降低。所以本病例在治療時(shí)采用黃芪多糖和干擾素進(jìn)行抗病毒，用恩諾沙星、頭孢噻呋鈉和阿莫西林抗菌，同時(shí)用扶正解毒散提高機(jī)體免疫力，用牧樂(lè)維1 號(hào)提高機(jī)體抵抗力，使用后快速控制了病情。巧合的是，所用抗菌藥正好是藥敏試驗(yàn)的高敏藥物，從而快速控制了大腸桿菌的混合感染。