李華岑，劉素梅，邱天寶，韓 江

（1.河南省獸藥飼料監(jiān)察所，河南 鄭州 450008；2.河南牧業(yè)經濟學院）

健胃散是《中國獸藥典》（2015年版）中的經典方劑，其功效為消食下氣，開胃寬腸。大量的臨床實驗證明健胃散能預防和治療胃腸道疾病，能提高動物的生長性能。為提高健胃散質量標準，建立了一種高效液相色譜法測定健胃散中熊果酸的含量的新方法，該法簡單、準確，可以較好地控制健胃散中熊果酸的含量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器與設備

Waterse2695高效液相色譜儀，配紫外檢測器；XBridge?C18色譜柱；METILERXP205電子天平。

1.2 試藥及試劑

山楂、檳榔、六神曲、麥芽、熊果酸對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：111742-201823)，甲醇、乙腈為色譜純試劑，水為超純水，其他試劑為分析純。

2 實驗方法

2.1 色譜條件

XBridge?C18色譜柱（5μm，4.6NN 150mm），流動相為乙腈-0.1%磷酸溶液（80∶20），柱溫為25℃，檢測波長為210nm，進樣量為10μl。

2.2 標準工作液的制備

精密稱取熊果酸對照品10mg，置100ml容量瓶中，加甲醇適量，超聲溶解，加甲醇稀釋至刻度線，搖勻；使用時用0.45μm的微孔濾膜過濾，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取健胃散陽性樣品1g，精密稱定，置50ml容量瓶中，加甲醇至近刻度，超聲30min，加甲醇至刻度線，搖勻，即得；取健胃散陰性樣品0.68g，精密稱定，置50ml容量瓶中，加甲醇至近刻度，超聲30min，加甲醇至刻度線，搖勻，即得。

3 結果與討論

3.1 線性與范圍

精密稱取熊果酸對照品10mg，置100ml容量瓶中，加甲醇適量，超聲溶解，加甲醇稀釋至刻度線，搖勻；使用前用甲醇稀釋成濃度為5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的標準工作液，備用，使用時用0.45μm的微孔濾膜過濾，注入液相色譜儀，保存色譜圖，用對照品溶液濃度與相應組分峰面積計算回歸方程和相關系數。得到回歸方程為A=4518.8C+684.81，相關系數r=1.0000，即在5～100μg/ml的濃度范圍內和峰面積呈現良好的線性關系。

3.2 專屬性

分別稱取健胃散陽性樣品、健胃散陰性樣品、熊果酸對照品按照樣品制備方法，在2.1的色譜條件下，記錄色譜圖。根據所得到的色譜圖可知，熊果酸陰性樣品色譜圖中在熊果酸對照品色譜峰位置無相應的色譜峰，說明專屬性良好。

3.3 精密度

取100μg/ml的標準工作液，在2.1色譜條件下重復進樣6次，記錄色譜圖，計算得到100μg/ml對照品溶液中熊果酸峰面積的RSD為0.06%，結果表明方法精密度良好。

3.4 準確度

精密稱取健胃散陰性藥材6份，每份為0.68g，按照2.3項下制備樣品溶液，分別精密加入100μg/ml的熊果酸對照溶液18μl，在2.1色譜條件下進行測定，記錄相關數據。健胃散陰性樣品中熊果酸平均回收率為99.7%，RSD值為0.2%。

3.5 穩(wěn)定性

按照.2.3項下操作制備1份健胃散陽性樣品溶液，分別在0、2、4、6、8、12h以2.1為色譜條件進樣測定，記錄色譜圖。健胃散陽性溶液中熊果酸色譜峰面積的RSD值為1.38%，結果表明樣品在12h內穩(wěn)定性良好。

3.6 重復性

精密稱取同一批健胃散陽性樣品6份，每份1g，精密稱定，照2.3項下方法制備供試品溶液，在2.1為色譜條件下測定，記錄相關數據。健胃散陽性樣品中熊果酸的平均含量為1.82mg/g，RSD值為1.73%，結果表明方法重復性良好。