后夢玥 黃照權(quán)

桂林醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，廣西桂林 541000

雌激素的多種生理功能與雌激素受體（ER）密切相關(guān)，ER 作為配體激活型轉(zhuǎn)錄因子，能夠介導(dǎo)細(xì)胞核中雌激素相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯[1]，在惡性腫瘤增殖、遷移和凋亡等生物學(xué)行為的調(diào)控中起到極大的作用[2-5]。乳腺癌作為經(jīng)典的雌激素依賴性腫瘤，內(nèi)分泌治療和化學(xué)治療是除外科手術(shù)外最常用的治療方法[6]。ER 陽性乳腺癌通常預(yù)后較好，且對于藥物治療較敏感，但易產(chǎn)生耐藥性和復(fù)發(fā)[7-8]。ER-α36 是膜型ER 的新亞型，在ER 陰性和陽性乳腺癌細(xì)胞中均能被檢測到，可以激活非基因組雌激素信號通路調(diào)節(jié)乳腺癌細(xì)胞的發(fā)生和發(fā)展[9]，在機(jī)體對內(nèi)分泌治療耐藥性的產(chǎn)生當(dāng)中也發(fā)揮了重要作用[10]。ER-α36 已經(jīng)成為可以判斷乳腺癌發(fā)生發(fā)展、治療效果及預(yù)后的靶標(biāo)。本文將重點(diǎn)介紹近年來ER-α36 在乳腺癌方面的研究進(jìn)展，并對其進(jìn)行綜述。

1 ER-α36 的發(fā)現(xiàn)

Wang 及其團(tuán)隊[11]于2005 年在正常的人子宮內(nèi)膜cDNA 文庫中發(fā)現(xiàn)了一條全長大約為5.4 kb 的cDNA 基因，該基因能夠編碼310 個氨基酸開放閱讀框架和一個分子量約為35.7 kD 的蛋白質(zhì)，其cDNA 序列的開放閱讀框能夠完全匹配ER-α66 基因序列中外顯子2 到外顯子6 的區(qū)域，該因子即ER-α36。在此基礎(chǔ)上，為了檢測該段克隆的cDNA 是否在蛋白水平有表達(dá)，Wang等[11]構(gòu)造了ER-α36、ER-α46 和ER-α66 高表達(dá)的細(xì)胞株，通過Western blot 實(shí)驗證明分子量為36 kD 的蛋白可以被ER-α66 的單克隆抗體識別，證明ER-α36 與ER-α66 有同源性，由此ER-α66的剪切變異體ER-α36 被發(fā)現(xiàn)并鑒定出來。

2 ER-α36 在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)

乳腺癌是女性中發(fā)病率最高的癌癥[12]，其死亡率和發(fā)生率一直居高不下[13-14]。與乳腺癌相關(guān)的主要激素受體有ER、孕激素受體（PR）及人表皮生長因子受體2（HER2）[6]。為明確ER-α36 在乳腺癌細(xì)胞當(dāng)中的定位，Li 等[15]使用免疫組織化學(xué)法檢測ER-α36 在乳腺癌組織中的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)ER-α36 主要定位在細(xì)胞膜。晉佳路等[16]探究ER-α36 與乳腺癌主要激素受體在mRNA 水平表達(dá)的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)ER-α36 與HER2的表達(dá)呈正相關(guān)，除此之外，ER-α36 的表達(dá)率在三陰性乳腺癌細(xì)胞中明顯高于其他分子分型的乳腺癌，提示ER-α36 在三陰性乳腺癌發(fā)生發(fā)展中可能存在著獨(dú)立且重要的作用。當(dāng)前，三陰性乳腺癌較高的復(fù)發(fā)率和較差的預(yù)后給臨床治療帶來了不少的難題[17]。進(jìn)一步的研究又證實(shí)了ER-α36 在三陰性乳腺癌組織轉(zhuǎn)移灶中的表達(dá)明顯高于原發(fā)灶[18]，且與患者的不良預(yù)后相關(guān)[19]。不僅如此，在最近的一項對PR 陽性乳腺癌患者的研究中發(fā)現(xiàn)，ER-α36 高表達(dá)的患者無病生存期明顯縮短，提示ER-α36 可能成為診斷PR 陽性乳腺癌的新靶標(biāo)[20]，但ER-α36 與PR 的關(guān)聯(lián)性仍缺乏后續(xù)研究。

3 ER-α36 介導(dǎo)的信號通路與耐藥性

越來越多的證據(jù)顯示乳腺癌患者耐藥性的產(chǎn)生與ER-α36 有關(guān)[21]。與ER-α36 相關(guān)的主要信號途徑包含磷脂酰肌醇3 激酶/蛋白激酶B、絲裂原激活蛋白酶/細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）等[22]。本文主要總結(jié)對應(yīng)用較為廣泛的兩種藥物的耐藥性。

3.1 他莫昔芬的耐藥性

他莫昔芬（TAM）是選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑，在臨床上常用于ER 陽性乳腺癌的內(nèi)分泌治療，但長期治療的患者都會產(chǎn)生不同程度的耐藥性[23]。Li 等[24]通過研究發(fā)現(xiàn)，ER-α36 在TAM 耐藥的乳腺癌細(xì)胞中表達(dá)升高，敲除ER-α36 的片段后發(fā)現(xiàn)表皮生長因子受體（EGFR）信號通路下游因子ERK1/2 磷酸化水平降低，說明ER-α36可能通過EGFR/ERK 信號通路增強(qiáng)乳腺癌細(xì)胞的TAM 耐藥性。此外，ER-α 的共激活因子人蛋白質(zhì)精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2（PRMT2）在以往研究中被證明具有影響乳腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的作用[25]。最近的實(shí)驗發(fā)現(xiàn)在TAM 耐藥的乳腺癌細(xì)胞中，PRMT2 降低、ER-α36 升高、Akt1/2 和ERK1/2 磷酸化水平均升高，證實(shí)PRMT2 可能通過抑制ER-α36 及其介導(dǎo)的非基因組雌激素信號通路來逆轉(zhuǎn)乳腺癌細(xì)胞中的TAM 耐藥性[26]。

3.2 順鉑的耐藥性

順鉑是目前惡性腫瘤治療中最常見的化療藥物，其耐藥性的產(chǎn)生及細(xì)胞毒性是當(dāng)前影響乳腺癌治療效果的一大阻礙[27-28]。最近有研究表明[29]，ER-α36 可能與乳腺癌順鉑耐藥性相關(guān)并驗證了其潛在機(jī)制，通過體內(nèi)和體外實(shí)驗結(jié)合的方式證明了乳腺癌順鉑耐藥株中ER-α36 的表達(dá)明顯升高，而降低ER-α36 基因的表達(dá)可以一定程度上恢復(fù)順鉑化療的敏感度，該研究也進(jìn)一步表明，順鉑的耐藥性可能與EGFR/HER2/ERK 信號通路的激活有關(guān)。

4 ER-α36 與乳腺癌的中醫(yī)藥治療

一直以來，乳腺癌的非手術(shù)治療都是以藥物和放射治療為主[6]，隨著中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，中醫(yī)藥治療癌癥逐漸引起臨床研究者的重視[30]。鹿角帽是民間多用來治療乳腺增生和乳房腫塊的一味中藥。最近的一項研究發(fā)現(xiàn)，鹿角帽逐步提取物（SAB）可以將細(xì)胞周期阻滯在S 期，并通過降低細(xì)胞周期蛋白Cyclin D1 和Cyclin A2 的表達(dá)抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖，不僅如此，ER-α36 的表達(dá)在SAB 的作用下也有所降低[31]，初步說明中醫(yī)藥治療乳腺癌的可能性。

5 ER-α36 對正常乳腺細(xì)胞的影響

盡管先前已經(jīng)有大量文獻(xiàn)記載ER-α36 與乳腺癌的密切關(guān)聯(lián)，但正常乳腺細(xì)胞中ER-α36 的定位、表達(dá)和影響卻少有研究。Thiebaut 及其團(tuán)隊[32]探討了ER-α36 過表達(dá)對于正常乳腺上皮細(xì)胞的影響，使用KEGG 數(shù)據(jù)庫進(jìn)行基因富集分析，發(fā)現(xiàn)在正常乳腺上皮細(xì)胞中與ER-α36 相關(guān)的信號通路與乳腺癌細(xì)胞中的主要信號通路一致。再進(jìn)一步研究乳腺上皮細(xì)胞的生物學(xué)行為發(fā)現(xiàn)：ER-α36 的高表達(dá)可能通過減緩細(xì)胞分裂來影響細(xì)胞增殖，且能顯著增加乳腺上皮細(xì)胞抗凋亡能力，但卻會促進(jìn)細(xì)胞遷移，體內(nèi)實(shí)驗發(fā)現(xiàn)ER-α36 過表達(dá)的成年小鼠乳腺上皮厚度減小、基質(zhì)厚度和管腔直徑增加[33]。Chamard-Jovenin 等[34]還將ER-α36 高表達(dá)的正常乳腺上皮細(xì)胞移植到裸鼠體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)并沒有腫瘤組織的生長，即ER-α36 可能影響正常乳腺的生長，但其單一過表達(dá)不足以誘導(dǎo)腫瘤的形成。

6 總結(jié)與展望

目前，盡管許多文獻(xiàn)已經(jīng)記載了ER-α36 在乳腺癌及其他腫瘤發(fā)生發(fā)展中起到的關(guān)鍵作用，但這些實(shí)驗數(shù)據(jù)尚未為臨床所應(yīng)用，基于現(xiàn)有的研究，專家學(xué)者們或許可以根據(jù)ER-α36 的表達(dá)來改進(jìn)現(xiàn)有乳腺癌的分類方法。不僅如此，考慮到ER-α36 與腫瘤及其預(yù)后的關(guān)聯(lián)性，或許可以將其列為腫瘤標(biāo)志物的篩查項目之一來協(xié)助乳腺癌的診斷及生存率的評估，藥物干預(yù)調(diào)節(jié)ER-α36 的表達(dá)可能成為逆轉(zhuǎn)藥物耐藥性、延緩癌癥進(jìn)展的新方法。深入了解和探索ER-α36在癌癥發(fā)展和治療中的作用機(jī)制，有利于拓展更多腫瘤預(yù)防和治療策略。