竇安華 李旺 周成林

【摘要】探討引起新型冠狀病毒（SARS?CoV?2）免疫球蛋白M（IgM）抗體檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性的干擾因素。本研究收集就診于泰州市人民醫(yī)院的86例不同組別疾病患者的血清和咽拭子樣本。此外，收集確診的19例COVID-19患者的實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)進(jìn)行回顧性分析。對(duì)86例不同組別疾病患者及19例COVID-19患者的血清和咽拭子樣本進(jìn)行SARS-CoV-2的病毒RNA和血清IgM抗體，并對(duì)結(jié)果為SARS?CoV?2 IgM陽(yáng)性的病例進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)造成檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性的可能因素，進(jìn)一步深化抗體檢測(cè)對(duì)于新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）的診斷價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）;免疫球蛋白M（IgM）抗體檢測(cè);假陽(yáng)性

基金項(xiàng)目： 江蘇省衛(wèi)生健康委課題項(xiàng)目（項(xiàng)目號(hào)：H2018072），題目：病毒組學(xué)（Virome）視角下臨床未知新型病毒感染快速確認(rèn)技術(shù)平臺(tái)的優(yōu)化及應(yīng)用;泰州市科技項(xiàng)目（項(xiàng)目號(hào)：TS201907），題目：艾滋病感染人群體內(nèi)病毒群落與艾滋病并發(fā)癥關(guān)系的動(dòng)態(tài)研究

2019年12月底，新型冠狀病毒席卷全球。2020年2月，世界衛(wèi)生組織將此病毒所導(dǎo)致的疾病命名為COVID-19（Corona Virus Disease 2019）。

膠體金免疫層析法（GICA）是以膠體金為示蹤標(biāo)志物，用于抗原抗體快速檢測(cè)的一種免疫標(biāo)記技術(shù)。它的檢測(cè)時(shí)間短、成本低且無(wú)需借助儀器。但是，GICA法檢測(cè)SARS-COV-2 IgM受到方法學(xué)及其他因素的影響，會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性的結(jié)果。本研究主要對(duì)應(yīng)用GICA法檢測(cè)SARS-CoV-2 IgM抗體的假陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行分析。

材料與方法

患者選擇及樣本采集

收集2020年2月22日-3月16日在江蘇省泰州市人民醫(yī)院入院的86例不同疾病患者的血清和咽拭子，包括9例類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）陽(yáng)性患者，8例抗核抗體（ANA）陽(yáng)性患者， 24例乙肝病毒（HBV）感染患者，14例EB病毒（EBV）感染患者以及31例腫瘤患者。本研究得到了泰州市人民醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。

結(jié)果

1 不同組別疾病患者血清SARS-CoV-2 IgM和核酸檢測(cè)結(jié)果

采用GICA法對(duì)不同組別疾病患者的血清進(jìn)行SARS-CoV-2 IgM抗體檢測(cè)。9例RF陽(yáng)性患者中有6例陽(yáng)性，8例ANA陽(yáng)性患者中有2例陽(yáng)性，31例腫瘤患者的血清中有2例陽(yáng)性，24例HBV感染患者中有3例陽(yáng)性，14例EBV感染患者中有3例陽(yáng)性。所有患者的咽拭子核酸檢測(cè)結(jié)果均為陰性。

2 SARS-CoV-2 IgM假陽(yáng)性患者與COVID-19確診患者的實(shí)驗(yàn)室結(jié)果對(duì)比

將40例SARS-CoV-2 IgM假陽(yáng)性患者的實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)與確診的19名COVID-19患者的指標(biāo)進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：SARS-CoV-2 IgM假陽(yáng)性組的白細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著升高（P=0.008），血紅蛋白顯著降低（P=0.001），SARS-CoV-2 IgM假陽(yáng)性組的中性粒細(xì)胞數(shù)和D二聚體也顯著升高（P值均<0.05），SARS-CoV-2 IgM假陽(yáng)性組的紅細(xì)胞沉降率顯著升高（P=0.001）。

討論

本實(shí)驗(yàn)中9例類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病人中有6例出現(xiàn)IgM 假陽(yáng)性的可能原因?yàn)椋篟F?IgM 與SARS?CoV?2 重組抗原發(fā)生交叉反應(yīng)，然后與膠體金標(biāo)記的抗人IgM 抗體結(jié)合，使檢測(cè)結(jié)果呈假陽(yáng)性。8例ANA 陽(yáng)性血清中有2例SARS?CoV?2 IgM 抗體檢測(cè)結(jié)果為假陽(yáng)性，可能也是由于較多的自身抗體IgM與金標(biāo)SARS?CoV?2 重組抗原結(jié)合所導(dǎo)致的。本研究中，SARS-CoV-2假陽(yáng)性組的白細(xì)胞數(shù)，中性粒細(xì)胞數(shù)，CRP，ESR和D二聚體顯著升高而Hb降低，分析可能與假陽(yáng)性組患者病例數(shù)較少有關(guān)。

本研究中，腫瘤患者和HBV陽(yáng)性患者中肝硬化患者相加占假陽(yáng)性組總數(shù)的60%以上，推測(cè)和SARS-CoV-2假陽(yáng)性組的血紅蛋白數(shù)偏低有關(guān)。本研究中SARS-COV-2 IgM假陽(yáng)性組和COVID-19確診組相比D二聚體明顯升高，分析其可能與假陽(yáng)性組患者體內(nèi)存在嗜異性抗體有關(guān)。

綜上所述，IgM抗體檢測(cè)提高了核酸檢測(cè)的靈敏度，在對(duì)疑似患者的確診中起到了補(bǔ)充的作用，但是因其具有不可避免的假陽(yáng)性結(jié)果，抗體檢測(cè)不能單獨(dú)用于COVID-19的確診。

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作者簡(jiǎn)介：竇安華（1990-），女，初級(jí)技師，從事臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)研究.

通訊作者：周成林（1973-），男，副主任技師，從事臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)研究.