張靜文

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）是一種慢性炎癥性腸病，臨床表現(xiàn)為腹痛腹瀉等，其治療效果與結(jié)腸黏膜愈合情況有關(guān)， 通常采用內(nèi)鏡進行評估［1］。 UC 內(nèi)鏡下嚴重性評分（ulcerative colitis endoscopic index of severity，UCEIS）是一種有效的內(nèi)鏡評分方法，能夠更為細致地對內(nèi)鏡下黏膜病變的嚴重程度進行分級［2］。缺點是內(nèi)鏡有創(chuàng)且耗時長，并有可能加重UC 病情，因此，需要采用簡單、敏感、非侵入性的指標代替內(nèi)鏡， 實時反映UC 患者腸道情況［3］。 目前 UC 的發(fā)病機制未完全明確，有研究顯示UC 與機體的細胞免疫相關(guān)。 T 淋巴細胞群及自然殺傷（natural killer，NK）細胞是外周免疫系統(tǒng)的重要組成部分，T 細胞的反應(yīng)增強及NK 細胞水平下降，會引起黏膜菌群的反應(yīng)，導(dǎo)致免疫異常，引發(fā)結(jié)腸性炎性變化［4］。 該文通過研究 UCEIS 與細胞免疫指標的相關(guān)性，探討其對UC 的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取 2018年1月—2019年12月筆者醫(yī)院就診的潰瘍性結(jié)腸炎患者60 例作為研究組，納入標準：（1）符合潰瘍性結(jié)腸炎［5］診斷標準，并進行內(nèi)鏡檢查；（2）年齡為 18～70 歲。 排除標準：（1）存在嚴重心、肺、腎或者其他惡性腫瘤者；（2）存在自身免疫疾病者；（3）伴有感染性腸炎或其他慢性疾病者；（4）存在結(jié)腸息肉或有結(jié)腸切除史者；（5）近期有非甾體消炎藥服用史者。 研究組男32 例，女28 例，年齡 20～69 歲，平均（42.13±5.28）歲。 同時選取來醫(yī)院檢測的健康者50 名作為對照組， 男26名，女 24 名，年齡 19～70 歲，平均（42.34±5.17）歲。兩組患者的一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。 所有受試者均知情并同意參與該研究；該研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會同意。

1.2 方法 （1）采用 UCEIS［6］評價 UC 患者的嚴重程度：UCEIS 總分為0～8 分，具體為血管紋理（正常0 分，模糊 1 分，消失 2 分）、出血（無出血 0 分，血性黏液1 分，腸腔輕度出血2 分，腸腔中度重度出血3分）、糜爛和潰瘍（黏膜正常0 分，黏膜粗糙、糜爛1分，淺表潰瘍2 分，深凹潰瘍3 分），最后得分為三項相加，其中 2～6 分為輕、中度，7～8 分為重度。 （2）兩組細胞免疫指標比較：所有受試者在清晨取肘靜脈血5 ml，離心后取上層清液，用EDTA 抗凝，采用流式抗體標記， 用美國BD 公司流式細胞儀檢測血清中 CD3+、CD4+、CD8+、NK 細胞水平，并計算 CD4+/CD8+。

圖1 各指標預(yù)測UC 時的ROC 曲線

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 20.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)處理，計量資料以（±s）表示，組間比較采用t 檢驗； 計數(shù)資料以率 （%） 表示， 采用 χ2檢驗，UCEIS 與細胞免疫指標的相關(guān)性采用Pearson 相關(guān)性分析，細胞免疫指標對UC 的預(yù)測價值采用ROC曲線，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 UC 患者的 UCEIS 情況 根據(jù) UCEIS， 研究組輕、中度 48 例，UCEIS 為（4.29±1.27）分，重度 12例，UCEIS 為（7.42±0.49）分。

2.2 2 組細胞免疫指標比較 研究組的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及 NK 細胞水平均低于對照組，CD8+水平高于對照組（P＜0.05），結(jié)果見表 1。

2.3 UCEIS 與細胞免疫指標的相關(guān)性分析 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及 NK 細胞與 UCEIS 呈負相關(guān)，CD8+與 UCEIS 呈正相關(guān)（P＜0.05），結(jié)果見表 2。

表1 2 組細胞免疫指標比較（±s）

表1 2 組細胞免疫指標比較（±s）

組別 n CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+ NK 細胞（%）觀察組 60 67.12±4.38 33.16±4.29 26.42±3.25 1.25±0.39 13.27±2.13對照組 50 69.35±5.24 39.28±5.11 23.48±2.53 1.67±0.52 17.42±3.25 t 值 - 2.432 6.829 5.213 4.835 8.038 P 值 - 0.017 0.000 0.000 0.000 0.000

表2 UCEIS 與細胞免疫指標的相關(guān)性分析

2.4 細胞免疫指標預(yù)測UC 時的ROC 曲線分析預(yù)測 UC 時，聯(lián)合檢測的 AUC 為 0.931，高于 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及 NK 細胞（P＜0.05），結(jié)果見表 3、圖 1。

表3 細胞免疫指標預(yù)測UC 時ROC 下曲線面積比較

圖1 見封三。

3 討 論

UC 是一種非特異性腸道慢性炎癥疾病， 病變從直腸向結(jié)腸近端發(fā)展，該病難治愈，且易反復(fù)發(fā)作，通常以黏膜愈合情況作為評判標準，一般采用內(nèi)鏡檢查黏膜，進行客觀評估［7］。UCEIS 是近年發(fā)展起來的一種內(nèi)鏡評分方法，能從血管紋理、出血情況、糜爛和潰瘍這三個方面評價UC 的嚴重程度，且對于UC 患者的轉(zhuǎn)歸及預(yù)后有較高的準確度［8］。 袁柏新等［9］研究表明UCEIS 與患者的外周血炎癥水平相關(guān)，可通過檢測外周血炎癥相關(guān)指標（白細胞計數(shù)、血沉、C 反應(yīng)蛋白、清蛋白）來評估患者病情的轉(zhuǎn)歸。 但是內(nèi)鏡具有侵入性，且不能實時反映患者黏膜情況，使患者感覺痛苦，因而需要選擇一些簡便易得的指標，替代內(nèi)鏡，實時反映患者情況，從而方便治療及觀察，而細胞免疫指標簡單易得，能夠較好地反映患者的免疫功能［10］。

T 淋巴細胞亞群失調(diào)是導(dǎo)致UC 發(fā)展的重要原因， 腸黏膜屏障功能異常是其發(fā)病的分子基礎(chǔ)［11］。CD3+是外周血成熟T 淋巴細胞的標志，是全身機體免疫的基礎(chǔ)［12］。 CD4+細胞又稱輔助性 T 細胞（Th）在抗原遞呈、 淋巴細胞的活化過程中起重要作用［13］。Th 可分為 Th1 和 Th2，Th1 主要介導(dǎo)細胞免疫，能幫助CD8+淋巴細胞增殖及分化； 而Th2 則參與B細胞增殖，介導(dǎo)體液免疫反應(yīng)，能提高機體免疫，兩者又互為抑制細胞［14］。CD8+細胞也稱細胞毒 T 淋巴細胞（CTL），通過釋放穿孔素細胞毒性分子破壞靶細胞， 作用于局部腸黏膜造成黏膜上皮細胞壞死，導(dǎo)致潰瘍、水腫，并抑制正常的免疫應(yīng)答，使UC 患者炎癥加劇、組織損傷更嚴重［15］。 通常情況下，CD4+/CD8+是衡量機體免疫系統(tǒng)的主要因素，而當(dāng)不同淋巴細胞亞群的數(shù)量和功能發(fā)生異常時，就可導(dǎo)致機體免疫紊亂，并發(fā)生一系列的病理變化［16］。 該研究中，研究組的 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均低于對照組，CD8+水平高于對照組， 說明UC 患者的免疫功能出現(xiàn)異常，可通過這幾項細胞免疫指標來監(jiān)測病情的變化。 沈浩等［17］研究表明 UC 患者存在 T 細胞亞群紊亂的現(xiàn)象，各亞群間功能無法協(xié)調(diào)，免疫反應(yīng)異常增強，導(dǎo)致細胞損傷。

NK 細胞是不需要抗體參與就能殺死靶細胞的廣譜殺傷細胞， 具有免疫監(jiān)視及免疫調(diào)節(jié)的作用，占外周血淋巴細胞的 5%～15%［18］。 而研究［19］表明NK 細胞缺陷型小鼠易患自發(fā)性結(jié)腸炎， 說明NK細胞水平與腸炎相關(guān)。 NK 細胞活化后可通過分泌INF-7、IL-2 等細胞因子發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，使機體產(chǎn)生 Th1 型免疫［20］。 該研究中 NK 細胞水平均低于對照組，說明UC 患者的NK 細胞減少，導(dǎo)致機體固有的免疫功能下降，使得黏膜發(fā)生免疫異常［21］。 武鐵龍等［22］研究表明活動期UC 患者外周血的NK 比例下降，且隨炎癥加重而降低，主要是由于NK 細胞由外周血循環(huán)至腸黏膜中，從而發(fā)揮抗炎作用。

而 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及 NK 細胞水平與UCEIS 呈負相關(guān)，CD8+與 UCEIS 呈正相關(guān)， 說明隨著UC 患者免疫功能與其腸道損傷程度存在密切關(guān)系，這幾項指標均易檢測，因而 CD3+、CD4+、CD8+及NK 細胞水平可作為評估UC 患者嚴重程度的非入侵性指標。 預(yù)測UC 時，聯(lián)合檢測的AUC 為0.931，高于 CD3+、CD4+、CD8+及 NK 細胞，說明可考慮聯(lián)合檢測 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及 NK 細胞來進行UC 病情的預(yù)測。 雖然理論認為病理組織學(xué)變化更能反映出UC 的本質(zhì)， 而該研究沒有進行常規(guī)活檢，無法研究細胞免疫指標與內(nèi)鏡組織學(xué)病變嚴重程度的相關(guān)性，因而還需結(jié)合組織學(xué)檢查，以便更準確評估病情。