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        常用免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)的基本原理

        2020-12-25 23:43:54周彰維
        關(guān)鍵詞:基本原理膠體金抗原

        檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)是一門臨床學(xué)科,其主要運(yùn)用不斷發(fā)展的自然科學(xué)及醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)對患者尿液、血液以及各種體液標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn),從而了解患者疾病類型、病情發(fā)展情況,為疾病的臨床診斷及后續(xù)治療方案提供了參考依據(jù),免疫檢驗(yàn)技術(shù)的用途十分廣泛,能夠用于不同種類疾病發(fā)病機(jī)制的研究和臨床療效的判定。本文主要針對臨床常用的幾種免疫檢驗(yàn)技術(shù)及其基本原理進(jìn)行分析與闡述。

        1 免疫熒光技術(shù)

        免疫熒光技術(shù)也稱作熒光抗體技術(shù),其為標(biāo)記免疫技術(shù)中最早開始發(fā)展的技術(shù)之一,該項(xiàng)技術(shù)建立在生物化學(xué)、免疫學(xué)以及顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)之上,此項(xiàng)技術(shù)最早在1941 年試驗(yàn)成功,歷經(jīng)幾十余載的發(fā)展,這項(xiàng)技術(shù)已經(jīng)非常成熟。此項(xiàng)技術(shù)的基本原理即為抗原-抗體反應(yīng)。抗原抗體反應(yīng)具備相當(dāng)高的特異性,如果抗原抗體發(fā)生反應(yīng),則只需知曉其中一個(gè)因素,便能檢查出另外一個(gè)因素,免疫熒光技術(shù)利用熒光技術(shù)對抗原或抗體進(jìn)行標(biāo)記,待其與相應(yīng)的抗體或抗原進(jìn)行結(jié)合以后,即可在熒光顯微鏡下觀察到一種特異性的熒光反應(yīng)。此種方法常被應(yīng)用于病毒、細(xì)菌等微生物的快速檢查中,此外,皮膚活檢、腎炎活檢的免疫病理檢查也通常采取該技術(shù)。該技術(shù)具有操作方法簡單、特異性高以及非特異性熒光染色少等優(yōu)勢,但也存在一定缺點(diǎn),主要體現(xiàn)在敏感性偏低上,每檢查一種抗原,都需重新制備一種熒光抗體。

        2 放射免疫檢測

        放射免疫檢測法是建立于放射性核素同免疫反應(yīng)相結(jié)合的原理之上的一種檢測方式,又稱作競爭性飽和分析法。其基本原理是利用放射性同位素標(biāo)記的抗原及沒有標(biāo)記的抗原(即待測標(biāo)本)同不足量的特異性抗體發(fā)生競爭性結(jié)合,待其反應(yīng)后將其分離并對放射性進(jìn)行測量,從而獲得沒有標(biāo)記的抗原的量。該項(xiàng)技術(shù)一般被應(yīng)用于分泌學(xué),可測定生長激素、胰島素、血管緊張素、催乳素、促卵泡成熟技術(shù)等,可用于研究、鑒別及診斷激素的藥理及生理作用。該項(xiàng)技術(shù)的主要優(yōu)點(diǎn)是操作簡單、靈敏性和特異性均高、樣本用量少等,缺點(diǎn)主要有假陽性反應(yīng)及較差反應(yīng)等。

        3 免疫膠體金技術(shù)

        膠體金技術(shù)于1971 年被正式引進(jìn)免疫化學(xué),經(jīng)過多年發(fā)展,免疫膠體金技術(shù)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。膠體金在弱堿環(huán)境下帶有負(fù)電荷,能夠同蛋白質(zhì)分子的正電荷進(jìn)行結(jié)合,且不影響蛋白質(zhì)的生物特性,這種方法主要原理是將抗原或抗體上標(biāo)記膠體金顆粒,再利用抗體和抗原之間的特異反應(yīng),使得被標(biāo)記的抗體或抗原吸附于滲濾膜之上。其利用了金顆粒的高電子密度特性,當(dāng)膠體金和蛋白質(zhì)分子結(jié)合時(shí),能夠在顯微鏡下呈現(xiàn)出黑褐色顆粒。該法具有操作簡單、快速、準(zhǔn)確率高、成本低、無污染的優(yōu)點(diǎn)。

        4 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

        酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是目前酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用最為廣泛的技術(shù),其基本原理是使已知的抗原或抗原被吸附在固相的載體表面,讓被酶標(biāo)記的抗原抗體在固相表面產(chǎn)生特異性結(jié)合,加入底物溶液,其在酶的生活活性作用下可發(fā)生顏色反應(yīng)。該方法對抗體免疫學(xué)特性不會(huì)產(chǎn)生任何改變,同樣也不對酶的生物學(xué)活性產(chǎn)生影響。該技術(shù)主要應(yīng)用于細(xì)菌及病毒等相關(guān)疾病的診斷中,具有快速、準(zhǔn)確性高的優(yōu)點(diǎn),大幅縮短了臨床診斷時(shí)間,提升工作效率。

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