李宛珈 黃志鋒 廖陳喜 羅文婷 黃柳橋 孫寶清

(廣州呼吸健康研究院，呼吸疾病國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，國(guó)家呼吸臨床研究中心，廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，廣州 510120)

Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)性疾病是一類(lèi)IgE介導(dǎo)的涉及多器官和多系統(tǒng)的全身性疾病，在過(guò)去30年，過(guò)敏性疾病發(fā)病率不斷增長(zhǎng)，已達(dá)全世界總?cè)丝诘?0%～30%[1，2]。如果患者的過(guò)敏原不明確，疾病可能久治不愈，甚至不斷加重。因此，明確過(guò)敏原對(duì)采取積極的預(yù)防診治措施具有重要意義。通常認(rèn)為IgE是介導(dǎo)Ⅰ型過(guò)敏反應(yīng)的主要抗體，而通過(guò)體外檢測(cè)患者血清過(guò)敏原特異性IgE(specific IgE,sIgE)是明確過(guò)敏原的重要途徑之一[3]。

既往對(duì)過(guò)敏原譜的分析研究多圍繞兒童和青少年患者，對(duì)成年過(guò)敏性疾病患者的過(guò)敏原分析數(shù)據(jù)報(bào)道較少。呼吸疾病國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(The Allergy Information Repository of the State Key Laboratory of Respiratory Disease,AIR-SKLRD)生物資源庫(kù)是依托于廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院建立的大型生物血清資源庫(kù)，在過(guò)去十年中收集和儲(chǔ)存了大量過(guò)敏性疾病患者的血清樣本及其臨床信息[4]。本研究基于此，分析廣州地區(qū)過(guò)敏性疾病成年患者過(guò)敏原sIgE的致敏特點(diǎn)，為臨床提供的相關(guān)流行病學(xué)數(shù)據(jù)。

1 資料與方法

1.1資料

1.1.1基本資料 選取2016年1月～2018年12月收錄于AIR-SKLRD數(shù)據(jù)庫(kù)、并進(jìn)行本地區(qū)常見(jiàn)8種過(guò)敏原sIgE檢測(cè)的過(guò)敏性疾病成人患者(年齡≥18歲)2 005例進(jìn)行回顧性分析。其中男性1 104例，女性901例，年齡分布為50(35,63)歲(中值，四分位區(qū)間)，按照不同年齡段分為以下5個(gè)階段：18～29歲290例(14.46%)、30～39歲344例(17.16%)、40～49歲344例(17.16%)、50～59歲390例(19.45%)，≥60歲637例(31.77%)。根據(jù)ARIA (The Allergic Rhinitis and its Impact on Asthma)指南和全球哮喘倡議指南(GINA guideline,http://ginasthma.org)診斷標(biāo)準(zhǔn)將就診患者分為鼻炎組304例(15.16%)和哮喘組550例(27.43%)[5]；同時(shí)根據(jù)(The EAACI/GA2LEN/EDF/WAO Guideline)分為皮膚過(guò)敏組(含蕁麻疹、特應(yīng)性皮炎)290例(14.46%)[6]。其他可疑過(guò)敏性疾病組包括患者自述食物過(guò)敏、慢性咳嗽等924例(46.08%)。4組疾病患者的總IgE水平分別為136 (40,349)，80 (21,268)，111 (38,333)，61 (15,206) (kU/L)(見(jiàn)表1)。本研究及患者血清的使用經(jīng)廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)：GYYY-2016-73，所有患者均簽署知情同意書(shū)。

1.1.2過(guò)敏原來(lái)源 過(guò)敏原購(gòu)自Thermo Fisher Scientific,瑞典。

1.2方法 本研究采用Phadia 1000全自動(dòng)熒光酶免疫檢測(cè)系統(tǒng)(ImmunoCAP)對(duì)血清過(guò)敏原sIgE進(jìn)行檢測(cè)。所有患者均用含分離凝膠的真空采血管抽取靜脈血5 ml，3 000 r/min離心10 min，取上層血清進(jìn)行檢測(cè)，剩余標(biāo)本置于-80℃冰箱長(zhǎng)期保存，避免反復(fù)凍融。檢測(cè)項(xiàng)目為本院變態(tài)反應(yīng)科實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展的成人過(guò)敏原篩查8項(xiàng)套餐項(xiàng)目，包括屋塵螨(d1)、貓毛(e1)、艾蒿(w6)、煙曲霉菌(m3)、蟑螂(i6)、小麥(f4)、大豆(f14)、蝦(f24)。所有測(cè)試均按照過(guò)敏原試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 對(duì)于未稀釋的血清樣品，檢測(cè)范圍為0.01～100 kU/L。以0.35 kU/L作為閾值，sIgE結(jié)果≥ 0.35 kU/L則定義為血清致敏。按放射過(guò)敏原吸附試驗(yàn) (radioallegrosorbent test,RAST)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)將sIgE陽(yáng)性結(jié)果分為1～6級(jí)：級(jí)別1 (0.35～0.69 kU/L)，級(jí)別2 (0.70～3.49 kU/L)，級(jí)別3 (3.50～17.49 kU/L)，級(jí)別4 (17.50～49.99 kU/L)，級(jí)別5(50.00～99.99 kU/L)，級(jí)別6(≥100.00 kU/L)[7]。

使用Excel2016和SPSS23.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。采用柱狀圖表示成人患者8項(xiàng)過(guò)敏原的致敏陽(yáng)性率分布，組間陽(yáng)性率差異采用卡方檢驗(yàn)(理論頻數(shù)出現(xiàn)<5則用fish確切概率法校準(zhǔn))，兩兩比較采用Bonferroni法調(diào)整顯著性水平；以折線圖表示不同年齡階段各項(xiàng)過(guò)敏原的變化趨勢(shì)以及屋塵螨過(guò)敏原與其他7項(xiàng)過(guò)敏原合并致敏情況；使用Spearman檢驗(yàn)分析8項(xiàng)過(guò)敏原相關(guān)性。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1成人常見(jiàn)8項(xiàng)過(guò)敏原sIgE致敏陽(yáng)性率分布特征 本研究入選的2 005例成人過(guò)敏性疾病患者中，屋塵螨的陽(yáng)性率最高(34.41%)，其次為蟑螂(24.14%)，貓毛過(guò)敏原在所檢測(cè)的8種過(guò)敏原中陽(yáng)性率最低(3.14%)。成人患者中蝦過(guò)敏原也具有相對(duì)較高的致敏陽(yáng)性率(21.00%)。此外，8項(xiàng)過(guò)敏原的陽(yáng)性樣本中均以1～3級(jí)為主，并有16.47%的成人過(guò)敏患者的總IgE(tIgE)水平在100 kU/L以上(圖1)；tIgE水平為98 (34,301) kU/L(表1)。

2.2不同年齡階段中性別過(guò)敏原致敏差異 結(jié)果如圖2，對(duì)于屋塵螨、貓毛、艾蒿、蟑螂和蝦過(guò)敏原，不同性別的陽(yáng)性率隨年齡的增加均呈下降趨勢(shì)，在18～29歲階段為陽(yáng)性率峰值，并在≥60歲年齡段處于較低值。煙曲霉菌過(guò)敏原的女性致敏陽(yáng)性率在50～59歲時(shí)達(dá)到峰值(8.12%)；男性陽(yáng)性率隨年齡增長(zhǎng)呈上升趨勢(shì)，并在≥60歲時(shí)達(dá)到峰值(10%)。廣州地區(qū)成人患者對(duì)于煙曲霉菌、小麥和大豆過(guò)敏原致敏陽(yáng)性率與年齡增長(zhǎng)的線性關(guān)系較差，且不同性別的致敏情況在各年齡階段差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 。

圖1 成人過(guò)敏性疾病患者的8項(xiàng)常見(jiàn)過(guò)敏原陽(yáng)性率分布Fig.1 Positive rates of eight common allergens in adult allergic patients

圖2 不同年齡階段男女性別過(guò)敏原陽(yáng)性率分布情況Fig.2 Distribution of allergen positive rate between male and female at different ages

卡方檢驗(yàn)結(jié)果表明蟑螂過(guò)敏原在各年齡階段中男性的陽(yáng)性率均略高于女性，并在30～39歲和≥60歲年齡段中的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(39.77% vs 27.38%,19.49% vs 10.53%,P<0.05)；在≥60歲年齡階段煙曲霉菌過(guò)敏原男女致敏率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(10.00% vs 4.05%，P<0.05)。對(duì)于蝦過(guò)敏原，整體上在成人患者中男性陽(yáng)性率略高于女性，但僅在≥60歲時(shí)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(19.49% vs 8.50%,P<0.05)。

2.3不同疾病成人患者過(guò)敏原致敏差異分析 由表2可知，4類(lèi)疾病組的主要過(guò)敏原均為屋塵螨、蟑螂和蝦，貓毛陽(yáng)性率最低?？ǚ綑z驗(yàn)結(jié)果顯示，屋塵螨、貓毛、蟑螂和蝦過(guò)敏原在鼻炎組、哮喘組、皮膚過(guò)敏組和其他過(guò)敏性疾病組的陽(yáng)性率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=72.103,χ2=21.839,χ2=25.722,χ2=10.849,P<0.05);兩兩比較顯示皮膚過(guò)敏組的屋塵螨、貓毛和蟑螂過(guò)敏原陽(yáng)性率低于鼻炎組和其他過(guò)敏性疾病組(P<0.05)，對(duì)于上述8項(xiàng)常見(jiàn)過(guò)敏原，鼻炎組和哮喘組的陽(yáng)性率均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

圖3 屋塵螨陽(yáng)性患者合并其他過(guò)敏原致敏百分率Fig.3 Sensitization percentage of house dust mite positive patients complicated with other allergens

表1 入選患者基本信息和總IgE分布水平

表2 基于4種疾病組成人患者的各項(xiàng)過(guò)敏原陽(yáng)性率分布

表3 8項(xiàng)過(guò)敏原sIgE濃度 Spearman相關(guān)性分析

2.4屋塵螨陽(yáng)性患者合并其他過(guò)敏原致敏分析 本研究入選的成人患者中，屋塵螨陽(yáng)性樣本中有71.43%(275/385)合并了其他7項(xiàng)過(guò)敏原中至少1項(xiàng)過(guò)敏原共同致敏，主要合并蟑螂和蝦共同致敏，而對(duì)于貓毛、艾蒿、煙曲霉菌、小麥和大豆過(guò)敏原的合并致敏情況不明顯。當(dāng)屋塵螨sIgE濃度水平為2級(jí)時(shí)，合并蟑螂和蝦的百分率最高，分別為70.85%和68.84%；在4級(jí)時(shí)，合并蟑螂和蝦的百分率最低，分別為37.38%和39.25%(圖3)。

2.58項(xiàng)常見(jiàn)過(guò)敏原血清sIgE相關(guān)性分析 屋塵螨、蟑螂和蝦過(guò)敏原兩兩間呈顯著的正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.823 (i6 vs f24)、0.801 (d1 vs f24)和0.737 (d1 vs i6，P<0.01)。艾蒿和其他7項(xiàng)過(guò)敏原也有較好的相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)為0.538～0.785；此外，屋塵螨與貓毛相關(guān)系數(shù)為0.614 (P<0.01)，小麥和大豆相關(guān)系數(shù)為0.719 (P<0.01，見(jiàn)表3)。

3 討論

世界衛(wèi)生組織(WHO)數(shù)據(jù)表明目前全球有22%～25%的人患有過(guò)敏性疾病，在我國(guó)有超過(guò)兩億的過(guò)敏性疾病患者，并呈上升趨勢(shì)[8]。常見(jiàn)的過(guò)敏性疾病包括過(guò)敏性鼻炎、過(guò)敏性哮喘、過(guò)敏性皮炎等。目前對(duì)于過(guò)敏性疾病的診斷主要根據(jù)患者臨床癥狀、體內(nèi)激發(fā)試驗(yàn)和體外過(guò)敏原sIgE檢測(cè)，而體外過(guò)敏原sIgE檢測(cè)因其不受患者皮膚、服藥等因素干擾，可有效避免個(gè)體差異帶來(lái)的不準(zhǔn)確結(jié)果及患者不良反應(yīng)的發(fā)生，使其在過(guò)敏性疾病預(yù)防診治中占重要地位，現(xiàn)已在臨床上廣泛應(yīng)用[9]。

Lou等[10]研究指出選擇符合本地區(qū)特點(diǎn)的6～8種過(guò)敏原組可對(duì)96%以上的過(guò)敏性疾病患者做出正確的篩查診斷，并提倡各地區(qū)可以結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果選擇合適的過(guò)敏原組合進(jìn)行臨床篩查。本研究選擇成人過(guò)敏性疾病患者篩查組合，包括屋塵螨、貓毛、艾蒿、煙曲霉菌、蟑螂、小麥、大豆、蝦8項(xiàng)過(guò)敏原，結(jié)果表明本研究隊(duì)列中超過(guò)40%的樣本對(duì)上述8項(xiàng)過(guò)敏原的至少1項(xiàng)呈陽(yáng)性。

與兒童和青少年過(guò)敏原分布特征相似，屋塵螨作為成人過(guò)敏患者最主要的吸入性過(guò)敏原，陽(yáng)性率為34.41%[11]。在廣州地區(qū)蟑螂是僅次于塵螨的常見(jiàn)吸入性過(guò)敏原(24.14%)，與中國(guó)其他地區(qū)報(bào)道基本一致[12]。既往研究也證實(shí)蝦過(guò)敏原是廣州地區(qū)最主要的食物過(guò)敏原，其在本研究中陽(yáng)性率為21.00%[13,14]。衰老會(huì)顯著影響免疫系統(tǒng)的相關(guān)功能，多項(xiàng)研究表明過(guò)敏患病率和IgE水平受年齡的影響[15-17]。本研究將患者年齡進(jìn)一步劃分為5個(gè)年齡階段，結(jié)果顯示，對(duì)于屋塵螨、貓毛、艾蒿、蟑螂和蝦過(guò)敏原，不同性別的陽(yáng)性率均隨年齡的增加呈下降趨勢(shì)，對(duì)于小麥和大豆過(guò)敏原，致敏陽(yáng)性率與年齡增長(zhǎng)的線性關(guān)系較差，且其不同性別的致敏陽(yáng)性率在各年齡階段差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；屋塵螨、蟑螂和蝦過(guò)敏原在各年齡段男性的致敏陽(yáng)性率均高于女性，Boulet[18]等對(duì)3 371例呼吸道過(guò)敏疾病患者的研究中也發(fā)現(xiàn)男性比女性有更高的過(guò)敏指數(shù)，提示對(duì)于多數(shù)過(guò)敏原男性比女性更感敏。

對(duì)4組疾病的致敏陽(yáng)性率進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)4個(gè)疾病組具有相似的致敏分布特征，均以屋塵螨為最主要的過(guò)敏原，貓毛致敏陽(yáng)性率最低，與任華麗[19]報(bào)道的我國(guó)北京地區(qū)265例成人過(guò)敏性鼻炎患者sIgE檢測(cè)結(jié)果一致。而對(duì)于主要的致敏過(guò)敏原，不同疾病患者的過(guò)敏原陽(yáng)性率也不同，本研究結(jié)果顯示，入院診斷為鼻炎的患者組比其他3組患者具有較高的陽(yáng)性率，提示具有鼻炎相關(guān)臨床癥狀的患者更多是由于過(guò)敏引起。多項(xiàng)研究已經(jīng)報(bào)道原肌球蛋白作為屋塵螨、蟑螂和蝦蟹的主要交叉變應(yīng)原，可使屋塵螨陽(yáng)性患者與蟑螂、蝦蟹過(guò)敏原合并致敏，同時(shí)造成假陽(yáng)性[20，21]；本研究觀察到屋塵螨陽(yáng)性樣本中超過(guò)70%的患者合并了其他7項(xiàng)過(guò)敏原中至少1項(xiàng)過(guò)敏原共同致敏，其中以合并蟑螂和蝦過(guò)敏原為主；相關(guān)性分析結(jié)果也表明屋塵螨、蟑螂和蝦過(guò)敏原兩兩之間呈顯著正相關(guān)。在屋塵螨致敏水平為2級(jí)和6級(jí)時(shí)，其合并蟑螂和蝦共同致敏的概率最高，可能是由于由交叉反應(yīng)蛋白(如原肌球蛋白)引起的陽(yáng)性水平較低，而在致敏水平為6級(jí)時(shí)，則為真正的共同致敏，這需要采用組分診斷解決方案進(jìn)一步深入驗(yàn)證。

總之，過(guò)敏原在成人過(guò)敏性疾病中仍是主要因素，并以屋塵螨、蟑螂和蝦為最主要過(guò)敏原，且往往出現(xiàn)共同致敏現(xiàn)象；研究不同過(guò)敏性疾病患者過(guò)敏原致敏特征對(duì)過(guò)敏性疾病的預(yù)防診治具有重要意義，可為臨床診斷提供相關(guān)信息。