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        高能量飲食對(duì)小鼠應(yīng)激性潰瘍的預(yù)防作用

        2020-12-23 08:30:18李周霏
        黑龍江科學(xué) 2020年24期
        關(guān)鍵詞:高能量性潰瘍高糖

        李周霏

        (中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院,廣州 510080)

        應(yīng)激性潰瘍(SU)是指在各種應(yīng)激狀態(tài)下胃和十二指腸發(fā)生的急性多發(fā)性黏膜糜爛和潰瘍,嚴(yán)重時(shí)可伴消化道穿孔、大出血等病變。SU是臨床危重疾病的常見并發(fā)癥,伴有大出血的發(fā)生率為0.1%~39.0%(平均6.0%),大出血一旦發(fā)生,病死率高達(dá)50%~77%,為ICU患者常見死亡原因之一。

        SU的發(fā)生是多種因素綜合作用的結(jié)果,涉及胃酸分泌、胃黏膜血液供應(yīng)、胃腸運(yùn)動(dòng)功能、胃腸激素分泌、氧自由基等多方面。已有實(shí)驗(yàn)證實(shí)制動(dòng)大鼠模型中胃內(nèi)高滲葡萄糖完全保護(hù)了胃黏膜免于因應(yīng)激而發(fā)生胃潰瘍,并提出猜想,其機(jī)制可能為葡萄糖直接向胃黏膜提供能量底物而起到增強(qiáng)自由基清除、保護(hù)胃黏膜屏障的作用。因此,通過給予高能量飲食設(shè)計(jì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)來考察能量物質(zhì)對(duì)應(yīng)激性潰瘍的預(yù)防作用,為應(yīng)激性胃潰瘍的預(yù)防提供一種簡(jiǎn)便易行的方法,并為消化道潰瘍的新藥研究提供了一種新思路,具有臨床實(shí)用價(jià)值。

        1 材料與儀器

        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

        健康清潔級(jí)昆明雄性小鼠60只,體重24~36 g,由中山大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。小鼠每15只飼養(yǎng)于籠中(30×15×20 cm)。

        1.2 主要試劑

        標(biāo)準(zhǔn)飼料購(gòu)自蘇州格勒實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司,三種高能量飼料均為自制,具體配方:高脂飼料由標(biāo)準(zhǔn)飼料+10%脂肪(購(gòu)自上海藝焙商貿(mào)有限公司);高糖飼料由標(biāo)準(zhǔn)飼料+21.8%糖(上海藝焙商貿(mào)有限公司生產(chǎn));高蛋白飼料由標(biāo)準(zhǔn)飼料+14.2%蛋白質(zhì)(廣州晶東貿(mào)易有限公司生產(chǎn))。每種飼料所添加的能量均控制在372.185 KJ/100 g。

        1.3 儀器

        實(shí)驗(yàn)室小型粉碎機(jī);電子天平;實(shí)驗(yàn)室恒溫鼓風(fēng)干燥箱,均由中山大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

        2 方法

        2.1 動(dòng)物分組及模型制作

        將60只雄鼠分4組:高糖飼料組(n=15)、高脂飼料組(n=15)、高蛋白飼料組(n=15)、正常對(duì)照組(n=15,簡(jiǎn)稱對(duì)照組),并予以相應(yīng)飼料。其中對(duì)照組予以標(biāo)準(zhǔn)飼料。每日檢測(cè)體重,記錄數(shù)據(jù)。

        水束應(yīng)激 (WIRS) 方法復(fù)制應(yīng)激性潰瘍模型。造模前禁食不禁水,24 h后將鼠束縛于鼠板上,頭部向上垂直浸入于水槽中,液面維持在劍突水平。8 h后將各組小鼠同時(shí)取出并取材。適應(yīng)性喂養(yǎng)1 d后開始計(jì)時(shí),分別于實(shí)驗(yàn)開始的第1 d、第6 d、第12d每組隨機(jī)抽樣5只小鼠進(jìn)行造模。

        2.2 取材

        頸椎脫臼法處死小鼠,剪開小鼠腹腔,分離胃與其他腹腔臟器,結(jié)扎幽門與賁門,取出胃體置于甲醛溶液中固定15 min。沿胃大彎剪開,生理鹽水沖洗后展開,觀察胃黏膜損傷。

        2.3 觀測(cè)指標(biāo)與方法

        按Guth標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算潰瘍指數(shù):直尺測(cè)量出胃出血點(diǎn)的直徑或出血條帶的長(zhǎng)、寬度并記分,病灶寬度<1 mm按1 mm計(jì),從而得出胃潰瘍指數(shù)(潰瘍指數(shù)(mm2)=∑潰瘍長(zhǎng)徑×潰瘍寬徑)以及潰瘍抑制率(%)=(對(duì)照組潰瘍指數(shù)-實(shí)驗(yàn)組潰瘍指數(shù))/模型組潰瘍指數(shù)×100%[2]。

        2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        利用SPSS 2.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,各組數(shù)據(jù)用(平均值)±s(標(biāo)準(zhǔn)差)表示,對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組采用單因素方差分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05,即P<0.05為有顯著性差異。

        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

        3.1 高能量飲食對(duì)小鼠應(yīng)激性潰瘍胃黏膜形態(tài)的影響

        高糖組生理鹽水沖洗后,糜爛、出血點(diǎn)較對(duì)照組(右側(cè))(P<0.05)減少;高脂飲食組小鼠胃黏膜表面光滑,未見損傷性改變;高蛋白組小鼠胃黏膜部分可見點(diǎn)狀或線狀出血灶。圖1箭頭所指方向?yàn)闈兂鲅c(diǎn)。

        對(duì)照組小鼠胃腔內(nèi)可見大量血性積液,黏膜面附有較多出血點(diǎn),生理鹽水沖洗后,見黏膜上有大量點(diǎn)線狀出血灶。由于對(duì)小鼠胃構(gòu)造認(rèn)識(shí)不足,導(dǎo)致第一、第二次取材時(shí)未取得有效實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),故不作討論。

        3.2 第三批水浸小鼠胃潰瘍模型的潰瘍抑制率及組間比較

        胃潰瘍指數(shù)及抑制率測(cè)定結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,高糖飲食組和高脂飲食組動(dòng)物潰瘍指數(shù)明顯降低,潰瘍抑制率明顯升高(P<0.05);高蛋白飲食組有降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物潰瘍指數(shù)趨勢(shì),但趨勢(shì)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),結(jié)果見表 1、2。

        圖1 高糖、高脂、高蛋白組胃大體形態(tài)改變Fig.1 Morphological change of stomach of high glucose, high fat and high protein group

        表1 第三次造模各組小鼠潰瘍指數(shù)Tab.1 Mice ulcer index after three times of modelling

        表2 第三次造模各組小鼠平均體重、潰瘍點(diǎn)數(shù)和潰瘍抑制率Tab.2 Middleweight, ulcer points and ulcer inhibition rate of the third time modelling

        4 討論

        應(yīng)激性潰瘍(SU)如能在臨床早期發(fā)現(xiàn),給予積極合理的治療,預(yù)后良好。現(xiàn)已有研究證實(shí)進(jìn)食可以預(yù)防SU,因?yàn)槭澄锊粌H能夠提供能量底物,還可以中和胃酸,促進(jìn)黏液分泌及黏膜上皮更新,同時(shí)能促進(jìn)內(nèi)臟血液循環(huán)和分泌,有助于防止胃腸黏膜萎縮,促進(jìn)胃腸蠕動(dòng),減少繼發(fā)感染的機(jī)會(huì)。

        本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),應(yīng)激前給予一段時(shí)間高糖、高脂飲食也可以有效預(yù)防SU的發(fā)生,其機(jī)制可能是由于高能量飲食小鼠體內(nèi)存儲(chǔ)的能量較多,提高胃黏膜易損傷區(qū)的能量代謝,一定程度恢復(fù)其解毒能力。同時(shí),高能飲食可以使胃黏膜細(xì)胞的增殖細(xì)胞帶(generative cell zone)活化,使鱗狀上皮細(xì)胞分泌的黏液內(nèi)膠性PAS陽(yáng)性物質(zhì)、AB陽(yáng)性物質(zhì)、氨基己糖等有所增加,這類物質(zhì)對(duì)胃黏膜可以起到一定程度的保護(hù)作用,防御炎癥因子以及氧自由基,抑制應(yīng)激性潰瘍的發(fā)生。

        而高蛋白飼料組未達(dá)到預(yù)期效果,其機(jī)制可能是由于小鼠攝取過量蛋白質(zhì)時(shí),一方面通過有氧代謝產(chǎn)生了NADH、NADPH和FADH2,它們通過線粒體電子傳遞系統(tǒng)被氧化,產(chǎn)生超氧化物,成為氧自由基的來源。另一方面,氨基酸氧化的增加與線粒體呼吸鏈電子流的增加有關(guān),結(jié)果使線粒體自由基的產(chǎn)生增加進(jìn)而導(dǎo)致氧化應(yīng)激。在實(shí)驗(yàn)過程中,高蛋白飲食組小鼠體重較實(shí)驗(yàn)開始時(shí)有大幅增加,其增加程度顯著大于對(duì)照組及其他實(shí)驗(yàn)組而導(dǎo)致過多能量攝入,超過預(yù)防作用的最大限度,使得預(yù)防作用消失。

        小鼠的體重可能與應(yīng)激性潰瘍的發(fā)生程度存在相關(guān)性。在實(shí)驗(yàn)初期,小鼠體重的穩(wěn)步增長(zhǎng)屬于正常生理現(xiàn)象,其在食物充足的情況下可長(zhǎng)至40 g,與攝入營(yíng)養(yǎng)正相關(guān)。而在后期由于高能量飼料中添加了豬油、蛋白粉等符合小鼠偏好的物質(zhì),導(dǎo)致小鼠進(jìn)食量增加,而高能量飼料提供的能量大于小鼠維持正常生命活動(dòng)所需的能量,因此除對(duì)照組,各組小鼠平均體重均呈增長(zhǎng)趨勢(shì),但具體數(shù)據(jù)并未表明其內(nèi)在聯(lián)系,故不作討論。

        本實(shí)驗(yàn)條件下,高糖、高脂飲食對(duì)應(yīng)激性潰瘍有預(yù)防作用,而高蛋白飲食對(duì)其有一定預(yù)防趨勢(shì)(但結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)。該結(jié)論具有一定臨床價(jià)值,但其具體機(jī)制尚不明確,且實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)缺失造成結(jié)論有不確定性,所以仍需進(jìn)一步討論與研究。

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