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        育齡婦女不同同型半胱氨酸水平與葉酸代謝關鍵酶基因多態(tài)性分布研究

        2020-12-22 13:23:46廣東省惠州市第二婦幼保健院516000梁罕超胡碧英許冠杰
        首都食品與醫(yī)藥 2020年24期
        關鍵詞:關鍵水平檢測

        廣東省惠州市第二婦幼保健院(516000)梁罕超 胡碧英 許冠杰

        出生缺陷一直以來都是影響出生人口質量的主要因素之一,其出現(xiàn)會給家庭和社會帶來沉重的負擔。流行病學調查顯示,我國是出生缺陷高發(fā)國家,每年約80萬~120萬的新生兒存在不同程度的缺陷,嚴重降低了出生人口質量[1]。因此,必須重視對出生缺陷的研究和分析。至今,出生缺陷的發(fā)病原因和機制尚未明確,多數研究認為與生殖道感染、內分泌異常以及外部環(huán)境等因素有關[2]。同型半胱氨酸(Hcy)升高和葉酸代謝異常是兩個導致出生缺陷的重要因素,已得到醫(yī)學界的高度重視[3]。但是從現(xiàn)階段臨床關于出生缺陷的因素來看,針對不同Hcy水平與葉酸代謝關鍵酶基因多態(tài)性的分布報道并不多見,而二者的相關性研究可能給出生缺陷的防治和處理提供重大的價值,因此有必要進行深入探究。為此,本研究納入我院2018年11月~2020年2月收治的200例前來進行體檢的育齡婦女視展開分析?,F(xiàn)報道如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選取2018年11月~2020年2月在我院體檢的200例育齡婦女進行研究。對全部受試者進行Hcy水平檢測,根據Hcy的監(jiān)測水平分為高Hcy組(≥15μmol/L)和低Hcy組(<15μmol/L),其中高Hcy組102例,低Hcy組98例。高Hcy組:年齡23~38歲,平均年齡(27.41±1.25)歲;已婚32例,未婚70例。低Hcy組:年齡22~35歲,平均年齡(26.97±1.20)歲;已婚13例,未婚85例。兩組各資料經比較,具有均衡性(P>0.05),可比。

        納入標準:①接受并完成遺傳檢測、Hcy檢測;②精神和認知正常,可配合完成基本調查研究;③熟悉和了解本次研究情況,自愿參與并簽署知情同意書。排除標準:①合并嚴重心肝腎等器質性病變;②伴有心腦血管疾病、血液系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤;③存在全身性感染;④糖尿病、消化系統(tǒng)疾病;⑤臨床資料不完善。

        附表1 兩組MTHFR基因組C677T位點基因型比較

        附表2 兩組MTRR基因組A66G位點基因型比較

        1.2 方法

        1.2.1 Hcy水平檢測 ①標本采集:于清晨空腹狀態(tài)下,采集受試者肘靜脈血5ml,保存于黃色凝膠管中。采用德國HERMLE公司A206A臺式醫(yī)用離心機進行離心處理,3000r/min,持續(xù)10min,處理后靜置15min,分離上層血清,-30℃保存。②檢測操作:采用全自動生化儀(雅培C1600型)檢測,試劑盒購自上??迫A生物試劑廠,檢測方法為雙試劑循環(huán)酶法。檢測時嚴格按照試劑盒說明操作,確保檢測的質量。③參考范圍:≤5μmol/L過低,5~15μmol/L正常,≥15μmol/L偏高。

        1.2.2 基因型的檢測 對所有受檢者空腹抽取外周靜脈血5ml,使用深圳泰樂德醫(yī)療有限公司的亞甲基四氫葉酸還原酶基因677C/T檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)提取核酸。檢測時根據試劑盒說明操作,使用SLAN-96S熒光定量PCR儀進行檢測。對于基因分型,采用連接酶檢測反應(LDR)進行;針對所獲取到的數據信息,采用Genemapper軟件分析。

        1.3 觀察指標 比較H-W遺傳平衡情況,觀察兩組葉酸代謝關鍵酶各基因點位基因型頻率分布,并進行比較分析。

        1.4 統(tǒng)計學分析 采用SPSS21.0軟件處理數據。計量資料采用(±s)表示,行t檢驗;計數資料采用n(%)表示,行X2檢驗。P<0.05差異有統(tǒng)計學意義。

        2 結果

        2.1 兩組H-W遺傳平衡情況的比較 在H-W遺傳平衡結果方面,兩組育齡婦女相比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。由此可以看出,各位點基因型頻率分布差異不顯著,表明了受試對象具有群體代表性,因此可作為研究的對象。

        2.2 兩組MTHFR基因組C677T位點基因型 高Hcy組C677T基因組TT占比高于低Hcy組,CC占比低于低Hcy組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。如附表1所示。

        2.3 兩組MTRR基因組A66G位點基因型 高Hcy組A66G基因組AG占比高于低Hcy組,AA占比低于低Hcy組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。詳情見附表2。

        3 討論

        葉酸是碳單位載體之一,對機體各組織功能的正常運行起著關鍵性的作用,常見的如甘氨酸、絲氨酸以及Hcy等,另外在DNA以及血紅蛋白的合成過程中也扮演著重要的角色[4]。研究發(fā)現(xiàn)[5],葉酸代謝對Hcy的影響,主要是由各關鍵酶實現(xiàn),如MTHFR、MTRR等,在這一過程中,MTHFR、MTRR等關鍵酶參與到Hcy向蛋氨酸轉化以及DNA合成的過程中,引起代謝變化,進而實現(xiàn)對機體葉酸代謝網絡的干擾,引起相關指標的變化。Hcy是人體內含硫氨基酸的一個重要的代謝中間產物,可能是動脈粥樣硬化等心血管疾病發(fā)病的一個獨立危險因子[6]。正常情況下[4],Hcy水平介于5~15μmol/L范圍內,異常狀態(tài)下其水平可能升高,進而嚴重影響血管增殖,相應的修復功能也出現(xiàn)障礙。

        研究發(fā)現(xiàn)[7],葉酸代謝相關酶在體內Hcy水平的維持過程中作用顯著,具體可以從以下兩個關鍵酶體現(xiàn):①MTHFR酶,對Hcy催化甲基化生成met有積極的作用,有利于Hcy水平在體內維持平穩(wěn)狀態(tài)。MTHFR酶中,主要的基因位點為C677T,其在不良妊娠中受到高度的關注。②MTRR酶,是met合成酶的輔助因子,對于Hcy水平的維持意義重大,特別是A66G基因位點可引起Hcy水平的明顯變化。目前,葉酸代謝關鍵酶主要集中于基因多態(tài)性研究,但其與高Hcy水平兩者的關系的研究卻較少。本研究針對育齡婦女不同Hcy水平與葉酸代謝關鍵酶基因多態(tài)性分布進行研究,結果發(fā)現(xiàn)兩組MTHFR基因組C677T位點基因型、MTRR基因組A66G位點基因型分布均存在顯著的差異(P<0.05),表明了不同Hcy水平與葉酸代謝關鍵酶基因多態(tài)性之間的關系,從而間接體現(xiàn)了葉酸代謝關鍵基因位點對Hcy水平的影響。

        綜上所述,育齡婦女不同Hcy水平與葉酸代謝關鍵酶基因多態(tài)性分布存在一定的差異,高Hcy水平極有可能引起高風險基因突變,因此需加強對Hcy水平的定期檢測,以為預防出生缺陷提供有效的參考,提高出生人口的質量和水平。

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