李彩霞　蔡云梅

摘要 在安徽、廣西和山東3地開(kāi)展50%醚菌酯水分散粒劑在黃瓜及土壤中的田間殘留及消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)。建立了測(cè)定黃瓜和土壤中醚菌酯的氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器（GC-ECD）分析方法。樣品經(jīng)乙腈振蕩提取，離心分層進(jìn)GC-ECD進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明，在0.005～5.000 mg/L 濃度時(shí)，線性關(guān)系良好，r均大于0.999 7。在4個(gè)添加水平下，醚菌酯的平均回收率在88%～109%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）小于2.4%;在黃瓜和土壤中的定量限（LOQ）均為0.005 mg/kg。田間試驗(yàn)結(jié)果表明，醚菌酯在黃瓜和土壤中的消解符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程，在黃瓜中的半衰期為1.6～4.1 d，在土壤中的半衰期為2.4～6.2 d;距末次施藥后3～10 d，醚菌酯在黃瓜中的最高殘留量為0.081 mg/kg，低于我國(guó)規(guī)定的黃瓜中醚菌酯最大殘留限量值（0.500 mg/kg）。

關(guān)鍵詞 醚菌酯;黃瓜;殘留;消解動(dòng)態(tài)

中圖分類號(hào) S481+.8文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A文章編號(hào) 0517-6611（2020）22-0087-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.22.023

Residue and Dissipation Dynamics of Kresoxim-methyl in Cucumber and Soil

LI Cai-xia， CAI? Yun-mei

（Department of Environmental Monitoring， Guangdong Polytechnic of Environmental Protection Engineering，F(xiàn)oshan，Guangdong? 528216 ）

Abstract Field trials were conducted to evaluate the dissipation and residue of 50% kresoxim-methyl WG in cucumber and soil in Anhui Province， Guangxi Province and Shandong Province. A gas chromatography with electron capture detector （GC-ECD） method was developed for the determination of kresoxim-methyl in cucumber and soil samples. The samples were extracted with acetonitrile by oscillation， then centrifuged and filtered and detected by GC-ECD. The results showed that， the linearity of kresoxim-methyl was in the concentration range of 0.005-5.000 mg/L with correlation coefficients higher than 0.999 7. The average recoveries of kresoxim-methyl in cucumber and soil were in the ranges of 88% to 109% at four spiked levels of 0.005， 0.05， 0.5 and 5.0 mg/kg， and the relative standard deviation （RSD） was less than 2.4%. The limit of quantification （LOQ） of kresoxim-methyl was 0.005 mg/kg which was the lowest spiked concentration. The results demonstrated that dissipation of kresoxim-methyl in cucumber and soil was in accordance with the first-order kinetic equation with the half-lives from 1.6 d to 4.1 d in cucumber and 2.4 d to 6.2 d in soil. The highest residue of kresoxim-emthyl in cucumber was 0.081 mg/kg， which was lower than the maximum residue limit （MRL， 0.500 mg/kg） of kresoxim-methyl in cucumber in China， when measured 3-10 d after final application. It was safe for human being when using this fungicide to control powdery mildew on cucumber.

Key words Kresoxim-methyl;Cucumber;Residue;Dissipation dynamics

作者簡(jiǎn)介 李彩霞（1976—），女，山東鄆城人，講師，碩士，從事分析化學(xué)方面教學(xué)科研工作。

收稿日期 2020-07-30

醚菌酯（kresoxim-methyl，分子式為C18H19NO4），化學(xué)名稱（E）-2-甲氧亞氨基-[2-（鄰甲基苯氧基甲基）苯基]乙酸甲酯，是巴斯夫公司開(kāi)發(fā)的一種strobilurins（丙烯酸甲酯類）殺菌劑，具有高效、廣譜、低毒等特點(diǎn)，對(duì)半知菌、子囊菌、擔(dān)子菌、卵菌綱等真菌引起的多種病害具有良好的防治效果，如葡萄和草莓白粉病、小麥銹病、馬鈴薯疫病、水稻稻瘟病等病害[1-4]。醚菌酯殺菌譜廣，且具有良好的保護(hù)和治療作用，與其他常用的殺菌劑無(wú)交互抗性，比常規(guī)殺菌劑持效期長(zhǎng)[5]。醚菌酯選擇性好，對(duì)人畜及非靶標(biāo)生物安全，對(duì)環(huán)境影響小。

關(guān)于醚菌酯在農(nóng)作物中殘留行為及檢測(cè)方法已有報(bào)道[6-12]，但對(duì)其殘留降解行為和對(duì)環(huán)境生態(tài)的研究相對(duì)較少。黃瓜（Cucumis sativus Linn.）屬葫蘆科，是我國(guó)主要出口蔬菜品種之一。黃瓜對(duì)環(huán)境條件要求嚴(yán)格且抗逆性較差，隨著栽培方式的變化，病蟲(chóng)害成為黃瓜生產(chǎn)中突出的問(wèn)題，嚴(yán)重影響黃瓜的產(chǎn)量和品質(zhì)，其中白粉病是危害黃瓜生產(chǎn)的主要病害之一[13]。為此，筆者在我國(guó)3個(gè)不同試驗(yàn)地進(jìn)行了田間試驗(yàn)，利用氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器（GC-ECD）測(cè)定黃瓜和土壤中的醚菌酯殘留量，對(duì)醚菌酯在黃瓜和土壤中的殘留消解動(dòng)態(tài)和最終殘留水平進(jìn)行研究，旨在確保50%醚菌酯

水分散粒劑在黃瓜上合理使用，確保黃瓜產(chǎn)品安全。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Agilent 6890氣相色譜儀，配有電子捕獲檢測(cè)器（美國(guó)Aglient公司）;XW-80A型渦旋混合器（江蘇海門(mén)其林貝爾儀器制造有限公司）;上海SCQ-2201B型超聲波清洗器（上海聲彥超聲波儀器有限公司）;EYELA SB-1000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（EYELA東京理化器械株式會(huì)社）;DL-4000B型冷凍離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）;BS210電子分析天平（德國(guó)賽多利斯公司）。

醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)品（純度99.7%），購(gòu)自上海安譜公司;氯化鈉、無(wú)水硫酸鈉均為分析純，由江蘇強(qiáng)盛功能化學(xué)公司提供;色譜純正己烷和乙腈，購(gòu)置于上海安譜科學(xué)儀器有限公司;0.22 um 濾膜，購(gòu)于上海安譜科學(xué)儀器有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)分別在廣西壯族自治區(qū)南寧市、山東省濟(jì)南市和安徽省宿州市3地進(jìn)行，供試黃瓜品種分別為豐元168、京優(yōu)選1號(hào)和津優(yōu)1號(hào)。參照《農(nóng)藥登記殘留田間試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》[14]和《農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》[15]，設(shè)計(jì)農(nóng)藥消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)和最終殘留試驗(yàn)。供試藥劑為50%醚菌酯水分散粒劑。每個(gè)試驗(yàn)處理設(shè)3個(gè)重復(fù)小區(qū)，小區(qū)面積為15 m2。另設(shè)清水空白對(duì)照小區(qū)。

1.2.1 醚菌酯在黃瓜中的消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)。于黃瓜生長(zhǎng)至成熟個(gè)體50%大小時(shí)施藥，施藥時(shí)應(yīng)保證用于動(dòng)態(tài)試驗(yàn)的黃瓜均勻著藥，并做標(biāo)記。施藥劑量為制劑量600 g/hm2，施藥1次。分別于施藥后2 h和1 d、2 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d采集黃瓜樣品。

1.2.2 醚菌酯在土壤中的消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)。在黃瓜地附近選一塊20 m2的空白地，施藥劑量為制劑量1 500 g/hm2，施藥1次。施藥后間隔2 h和1 d、2 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、21 d、30 d、45 d分別采集土壤樣本。

1.2.3 醚菌酯在黃瓜和土壤中的最終殘留試驗(yàn)。設(shè)2個(gè)施藥劑量，分別為制劑量300 g/hm2（低劑量）和450 g/hm2（高劑量），施藥次數(shù)分別3次和4次，施藥間隔為7 d。于末次施藥后3、5、7、10 d，分別采集黃瓜和土壤樣品。

1.2.4 采樣。黃瓜樣本的采集：隨機(jī)在試驗(yàn)小區(qū)內(nèi)不同方向及上下不同部位采集6條以上（不少于2 kg）生長(zhǎng)正常、無(wú)病害、成熟的黃瓜果實(shí)，粘好標(biāo)簽，裝入塑封袋中包扎妥當(dāng)，運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室（8 h內(nèi)）。在室內(nèi)用不銹鋼刀切成1 cm大小的碎塊，在不銹鋼盆中混勻，用四分法縮分樣品，分取2份150 g的樣品，貯存于-20 ℃冰柜中保存。土壤樣本的采集：隨機(jī)取點(diǎn)6～12個(gè)，采用土鉆采集0～15 cm的土壤1～2 kg，除去土壤中的碎石、雜草和植物根莖等雜物，粉碎，過(guò)1 mm孔徑篩，于-20 ℃中保存。

1.3 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取打碎后黃瓜樣品和過(guò)篩后的土壤樣品10 g于50 mL離心管內(nèi)，加入乙腈20 mL，手搖1 min，用超聲波超聲10 min，加入氯化鈉5 g和無(wú)水硫酸鈉5 g，劇烈搖動(dòng)1 min后，以3 000 r/min離心3 min。取上清液10 mL于45 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，氮?dú)獯蹈珊?，? mL正己烷定容，過(guò)0.22 um的濾膜后，待測(cè)。

1.4 檢測(cè)條件

色譜柱為Agilent DB-5，30 m×250 μm（i.d.）×0.25 μm石英毛細(xì)管柱。進(jìn)樣口溫度：260 ℃，檢測(cè)器溫度：320 ℃，柱溫：60 ℃保持1 min，以30 ℃/min升至180 ℃，保持1 min，以10 ℃/min升至280 ℃，保持4 min。載氣（氮?dú)狻?9.999%），流量：2 mL/min;氫氣流量：2 mL/min;空氣流量：60 mL/min。進(jìn)樣量：1 μL。

1.5 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制及標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

精確稱取醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)品（精確至0.1 mg），配成100 mg/L標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。按照梯度稀釋的原則，分別用黃瓜和土壤2種空白基質(zhì)配成0.005、0.010、0.050、0.100、0.500、1.000、5.000 mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液，按“1.4”（檢測(cè)條件）進(jìn)行測(cè)定。以醚菌酯的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的色譜峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，得到線性回歸方程。

1.6 添加回收率試驗(yàn)

分別向空白黃瓜和土壤樣品中添加 0.005、0.050、0.500和5.000 mg/kg 4個(gè)水平的醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)5次，用上述選定的分析與檢測(cè)方法測(cè)定其回收率。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法的線性范圍、正確度及精密度

根據(jù)NY/T 788—2018《農(nóng)作物中農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》[15]進(jìn)行方法有效性評(píng)價(jià)。在0.005～5.000 mg/L時(shí)，醚菌酯在黃瓜和土壤中的質(zhì)量濃度（x）與色譜峰面積（y）呈良好的線性關(guān)系（圖1），回歸方程：y =22 121x-461.59，r=0.999 7（黃瓜）和 y=22 213x-103.8，r=1.000 0（土壤）。

添加回收試驗(yàn)（表1）結(jié)果表明，在0.005、0.050、0.500和5.000 mg/kg 4個(gè)添加水平下，醚菌酯在黃瓜中的平均回收率在95%～109%，RSD為1.8%～2.4%;醚菌酯在土壤中的平均回收率在88%～99%，RSD為1.8%～2.4%。醚菌酯在黃瓜和土壤中的定量限（LOQ）均為0.005 mg/kg，最小檢出量為1×10-9 g。均符合《農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》的要求[12]。

2.2 醚菌酯在黃瓜和土壤中消解動(dòng)態(tài)

醚菌酯在黃瓜和土壤中消解動(dòng)力學(xué)方程見(jiàn)表2。3地田間試驗(yàn)結(jié)果表明，施藥后2 h取樣進(jìn)行檢測(cè)，黃瓜中醚菌酯的原始沉積量為0.220～0.533 mg/kg，14 d后在黃瓜中消解90.5%～100%。土壤中醚菌酯的原始沉積量為1.357～2.063 mg/kg，10 d 后在土壤中消解90.4%～98.8%。醚菌酯在黃瓜和土壤中的消解是一個(gè)逐漸降低的過(guò)程，且均符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程式（Ct=C0-kt）。醚菌酯在廣西、山東和安徽3地黃瓜中的半衰期為1.6～4.1 d。在廣西、山東和安徽3地土壤中的半衰期為2.4～6.2 d。醚菌酯在黃瓜和土壤中的消解速度快，半衰期短，對(duì)黃瓜的食用性和土壤環(huán)境的影響較小。

2.3 醚菌酯在黃瓜和土壤中的最終殘留

在廣西、山東和安徽3地田間試驗(yàn)結(jié)果（表3和4）表明，50%醚菌酯水分散粒劑分別按有效劑量150和225 g/hm2施藥，施藥3和4次時(shí)，施藥間隔7 d，距最后一次施藥3、5、7和10 d時(shí)采收，黃瓜中醚菌酯的殘留量分別為<0.005～0.081 mg/kg、<0.005～0.074 mg/kg、<0.005～0.045 mg/kg和0.006～0.041 mg/kg，均低于我國(guó)規(guī)定醚菌酯在黃瓜上的MRL值（0.500 mg/kg）。土壤中醚菌酯殘留量分別為<0.005～0.179 mg/kg、<0.005～0.147 mg/kg、<0.005～0.045 mg/kg和<0.005～0.027 mg/kg。總體上，隨著施藥劑量和施藥次數(shù)的增加而增加，隨采樣時(shí)間的延長(zhǎng)而降低。

3 結(jié)論與討論

該研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，醚菌酯在3地黃瓜中的原始沉積量為0.220～0.533 mg/kg，在山東黃瓜中的原始沉積量大于其他2個(gè)地區(qū)，可能與植株形態(tài)及施藥時(shí)的環(huán)境有關(guān)。結(jié)果表明，醚菌酯在黃瓜中的半衰期為1.6～4.1 d，劉聰云等[12]報(bào)道了醚菌酯在黃瓜中半衰期為1.5和2.1 d，葛謙等[10]報(bào)道醚菌酯在黃瓜中的半衰期為2.1～5.1 d，與該研究結(jié)果基本相似，表明醚菌酯在黃瓜易消解。醚菌酯在3地土壤中的半衰期為2.4～6.2 d，而研究表明，醚菌酯在土壤中的半衰期為4.9～10.8 d[10]。農(nóng)藥在土壤中的降解速率受試驗(yàn)?zāi)攴輾鉁?、降水情況、pH、土壤種類、有機(jī)質(zhì)含量等綜合因素的影響。

最終殘留試驗(yàn)結(jié)果表明，50%醚菌酯水分散粒劑按有效劑量150和225 g/hm2，施藥3、4次，施藥間隔期7 d，距末次施藥3、5、7和10 d后，黃瓜中醚菌酯殘留量均低于我國(guó)規(guī)定的黃瓜中醚菌酯的最大殘留限量（0.500 mg/kg）。因此，按照推薦劑量使用該農(nóng)藥不會(huì)造成農(nóng)藥殘留超標(biāo)，對(duì)人體健康是安全的。

參考文獻(xiàn)

[1] 關(guān)愛(ài)瑩，胡耐冬.Strobilurin類殺菌劑[J].世界農(nóng)藥，2002，24（2）：16-19.

[2] 呂國(guó)成.60%醚菌酯水分散粒劑防治黃瓜白粉病田間藥效試驗(yàn)[J].廣西植保，2011，24（4）：20-21.

[3] 丁佩，馬海芹，戴德江，等.醚菌酯防治草莓白粉病的田間藥效試驗(yàn)[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，56（7）：1058-1059，1066.

[4] 趙琪君，劉世江，丁怡，等.稻瘟病菌對(duì)丙環(huán)唑和醚菌酯的敏感性檢測(cè)[J].農(nóng)藥，2019，58（6）：462-464，468.

[5]SAUTER H，STEGLICH W，ANKE T.Strobilurions：Evolution of new class of active substances[J].Angew Chem Int Ed，1999，38（10）：1328-1349.

[6] 李國(guó)烈，覃明麗，蘇旭，等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定桑葚中醚菌酯殘留量[J].農(nóng)藥，2017，56（12）：905-907，911.

[7] 宋天瑋，熊勝，陳恒輝，等.氣相色譜法快速檢測(cè)小麥中醚菌酯和噻呋酰胺的殘留[J].農(nóng)藥，2019，58（4）：285-287.

[8] 常津毓，王曉梅，侯志廣，等.醚菌酯在平菇和榆黃蘑及培養(yǎng)料中的殘留動(dòng)態(tài)研究[J].食用菌，2015（2）：62-64.

[9] 于雪驪，蔡磊明.30%醚菌酯懸浮劑在小麥及土壤中的殘留動(dòng)態(tài)[J].農(nóng)藥，2010，49（5）：361-362，370.

[10] 葛謙，茍春林，姜瑞.30%醚菌酯懸浮劑在黃瓜和土壤中的殘留降解行為及安全使用技術(shù)[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（22）：7422-7425.

[11] 趙爾成，朱曉丹，鄭尊濤，等.醚菌酯和腐霉利在溫室草莓中的殘留行為及其膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2015，17（1）：75-82.

[12] 劉聰云，王有成，萬(wàn)凱，等.黃瓜中醚菌酯的殘留及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2012，14（6）：685-688.

[13] 郝俊杰，李磊，王波，等.黃瓜白粉病抗性基因定位及候選基因分析[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018，51（7）：3427-3434.

[14] 農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所.農(nóng)藥登記殘留田間試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程[M].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2007：395.

[15] 農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所.農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則：NY/T 788—2004[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2004.