胡啟超 羅仍卓么 魏大為 楊箭 賈立 王興平 馬云

（寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院，銀川 750021）

奶牛乳腺炎是由病原微生物感染乳腺組織而產(chǎn)生的一種復(fù)雜性疾病，其發(fā)病率高，治愈率低，易復(fù)發(fā)，可造成產(chǎn)奶量下降，乳品質(zhì)降低，甚至被迫奶牛過早淘汰，給現(xiàn)代奶業(yè)造成了極大的經(jīng)濟(jì)損失［1］。影響奶牛乳腺炎的因素很多，包括奶牛個(gè)體狀況、飼養(yǎng)環(huán)境（主要為病原微生物）和飼養(yǎng)管理等。在個(gè)體狀況中，機(jī)體固有免疫與乳腺炎的易感性、抗病性和發(fā)病程度密切相關(guān)［2］。

乳腺組織是宿主被病原微生物侵入時(shí)的重要結(jié)構(gòu)屏障，而乳腺上皮細(xì)胞（bMEC）是奶牛乳腺組織的主要細(xì)胞類型，在宿主被病原微生物侵入后的固有免疫反應(yīng)中起著重要的作用。近年來，學(xué)者們以奶牛乳腺組織和bMEC炎癥模型為研究材料，進(jìn)行奶牛乳腺炎的分子機(jī)制研究。本文綜述了乳腺固有免疫相關(guān)編碼基因在奶牛乳腺炎調(diào)節(jié)中的研究進(jìn)展，為系統(tǒng)了解奶牛乳腺炎的分子機(jī)制提供參考。

1 固有免疫相關(guān)編碼基因的分類

固有免疫是動物機(jī)體在長期進(jìn)化過程中形成的一種防御機(jī)制，可對感染的病原體作出迅速應(yīng)答，產(chǎn)生非特異抗感染作用［2］。根據(jù)編碼基因及其蛋白質(zhì)在固有免疫反應(yīng)中的作用特點(diǎn)，可將固有免疫編碼基因分為：細(xì)胞模式識別受體基因（如TLRs和NODs）、信號通路相關(guān)基因（NF-κB信號通路等相關(guān)基因）、炎癥細(xì)胞因子基因（TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10和IL-1β等）、炎癥趨化因子基因（CC、CXC和CXCL家族基因等）、宿主防御素（如BNBD家族和DEFB家族基因）和抗菌肽（如LAP）等。上述基因雖然在功能上相對獨(dú)立，特點(diǎn)明顯，但是在啟動固有免疫反應(yīng)和抗感染作用中具有協(xié)同作用，如：bMEC在病原體或病原體相關(guān)分子模式（如LPS，E.coli細(xì)胞表面成分）的刺激下，可激活Toll樣受體（Toll-like receptors，TLRs）和NOD樣受體（NOD-like receptors，NLRs）介導(dǎo)的NF-κB信號通路，使促炎癥細(xì)胞因子和炎癥趨化因子的分泌迅速增加［3］，從而誘導(dǎo)T細(xì)胞活化、增殖與分化，并促使白細(xì)胞向感染部位定向遷移，起到抗感染作用［4］。此外，bMEC表達(dá)的宿主防御素和抗菌肽具有加強(qiáng)固有免疫反應(yīng)的作用［5］。

2 固有免疫相關(guān)編碼基因在奶牛乳腺炎中的表達(dá)模式

奶牛乳腺炎的分子機(jī)制非常復(fù)雜，其發(fā)生和發(fā)展過程受多個(gè)基因的共同調(diào)節(jié)［6］。為了闡明奶牛乳腺炎的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，近年來，國內(nèi)外學(xué)者分別采用候選基因qPCR、基因芯片和高通量測序等技術(shù)［7］，檢測了乳腺組織、bMEC和血液中的基因表達(dá)譜，并篩選了大量的差異表達(dá)基因（Differentially expressed genes set，DEGs），其中有很多基因功能富集在奶牛乳腺固有免疫信號通路上。

2.1 乳腺組織固有免疫相關(guān)編碼基因的表達(dá)譜分析

奶牛乳腺組織是病原微生物感染的首要部位，在機(jī)體固有免疫中極其重要［3，8］。近些年，國內(nèi)外學(xué)者利用qPCR方法在臨床乳腺炎奶牛的乳腺組織中檢測出了TLR2、TLR4、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、CXCL10、CD14和CCL5等DEGs［9-10］，而且這些基因參與了TLRs、NF-κB和MAPK等固有免疫相關(guān)的信號通路。此外，還發(fā)現(xiàn)在病原微生物感染乳腺組織前后，β-防御素家族中的DEFB1、BNBD4、BNBD5、BNBD10和LAP基因在奶牛乳腺組織中的表達(dá)量也發(fā)生了顯著變化［11］。

除了臨床乳腺炎的乳腺組織的基因表達(dá)譜研究外，學(xué)者們也對常見病原菌誘導(dǎo)炎癥的乳腺組織進(jìn)行了高通量測序分析。Mitterhuemer等［12］對感染E.coli6 h和24 h后的奶牛乳腺組織中分別篩選出13個(gè)和2 154個(gè)DEGs，其中包括抗菌基因（S100A8、S100A9、S100A12和CXCL2），急性期基因（LBP、SAA3、C6、C4BPA和IF）和氧化應(yīng)激相關(guān)基因等，涉及固有免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)、抗原處理和呈遞、細(xì)胞因子的分泌、蛋白質(zhì)降解和細(xì)胞凋亡等過程。而羅仍卓么等［13］在E. coli感染7 d后的奶牛乳腺組織中也篩選出了包括TLR4、S100A8、S100A9和LAP在內(nèi)的2 388個(gè)DEGs。此外，學(xué)者們在S. aureus感染的奶牛乳腺組織中也進(jìn)行了mRNA表達(dá)模式研究。Wang等［14］對S. aureus感染的奶牛乳腺組織進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組測序，結(jié)果表明在感染組中檢測到了602個(gè)表達(dá)上調(diào)和750個(gè)表達(dá)下調(diào)的mRNA，其中ITGB6、MYD88、ADA和TNFRSF1B基因與固有免疫有關(guān)。Fang等［15］分別采用高濃度和較低濃度的S.aureus感染奶牛乳房，24 h后在高濃度和低濃度感染組分別檢測到194和21個(gè)DEGs。羅仍卓么等［13］和Kosciuczuk等［16］采用S. aureus誘導(dǎo)奶牛乳腺組織，前者在誘導(dǎo)7 d后的奶牛乳腺組織中篩選出了1 693個(gè)表達(dá)上調(diào)和949個(gè)表達(dá)下調(diào)的mRNA，后者發(fā)現(xiàn)差異表達(dá)基因數(shù)目和表達(dá)水平與奶牛的泌乳期有關(guān)。上述研究結(jié)果說明，乳腺組織在感染后使得mRNA表達(dá)產(chǎn)生變化，來應(yīng)對抗感染的生物學(xué)過程。但是，感染菌的類型、感染劑量、誘導(dǎo)時(shí)間和檢測方法等都會影響篩選出的DEGs的類型、數(shù)目以及表達(dá)量變化差異倍數(shù)［13，16］。值得一提的是，上述研究結(jié)果有一個(gè)共同點(diǎn)，即：差異表達(dá)基因的KEGG和GO功能富集結(jié)果均富集到了TLRs信號通路、趨化因子信號通路和MAPK等固有免疫信號通路上［12-16］?？梢?，固有免疫信號通路轉(zhuǎn)導(dǎo)是乳腺炎發(fā)生和發(fā)展的必要生物學(xué)過程。

2.2 bMEC炎癥反應(yīng)中的mRNA表達(dá)譜分析

bMEC是乳腺組織主要的細(xì)胞類型，在外源病原微生物感染乳腺早期發(fā)揮重要作用。因此，在研究奶牛乳腺炎的分子機(jī)制時(shí)，學(xué)者們常常以誘導(dǎo)炎癥的bMEC作為細(xì)胞模型展開相關(guān)研究［17］。

眾所周知，脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）和脂磷壁酸（Lipteichoic acid，LTA）分別是E.coli和S.aureus的主要致毒因子［18］。Xu等［19］用LPS和LTA刺激bMEC，通過RNA-Seq技術(shù)研究這兩種不同毒力因子對bMEC轉(zhuǎn)錄組的影響，結(jié)果在LPS處理組檢測到95個(gè)表達(dá)上調(diào)和5個(gè)表達(dá)下調(diào)基因；而在LTA處理組檢測到表達(dá)上調(diào)和表達(dá)下調(diào)基因各12個(gè)，說明在固有免疫應(yīng)答中，LPS較LTA有更強(qiáng)的感染刺激作用。結(jié)合Strandberg等［20］學(xué)者的研究結(jié)果，共同解釋了E. coli常常會引起急性乳腺炎，而S.aureus則會引起慢性乳腺炎。此外，學(xué)者們也利用基因芯片技術(shù)檢測了S. uberis感染的bMEC，發(fā)現(xiàn)了固有免疫相關(guān)基因C3、IL-8、IFN-γ、IL-10、IL-1β、IL-6、TLR2、TNF-α、SAA3、LF和LBP的mRNA在處理組中的表達(dá)量顯著上調(diào)［21］。Wang等［22］用S56、S178和S36共3株不同毒力因子的S. aureus處理體外培養(yǎng)的bMEC，3 h后進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序，結(jié)果顯示S56處理組有1 028個(gè)表達(dá)上調(diào)和692個(gè)表達(dá)下調(diào)的mRNA；S178處理組有249個(gè)表達(dá)上調(diào)和178個(gè)表達(dá)下調(diào)的mRNA；S36 處理組有172個(gè)表達(dá)上調(diào)和47個(gè)表達(dá)下調(diào)的mRNA。上述DEGs功能都富集到了固有免疫相關(guān)的NOD樣受體和趨化因子受體信號通路上，可見在不同病原菌或病原體相關(guān)分子模式（Pathogen-associated molecular patterns，PAMPs）誘導(dǎo)的bMEC炎癥反應(yīng)中，差異表達(dá)mRNA參與調(diào)節(jié)了細(xì)胞固有免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)。

3 奶牛乳腺固有免疫相關(guān)主要信號通路的研究進(jìn)展

在病原體感染乳腺組織的早期，機(jī)體細(xì)胞表面的模式識別受體（Pattern-recognition receptors，PRRs），主要包括TLRs和NLRs，可快速識別PAMPs，激活固有免疫相關(guān)信號通路，使機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)［2，23］。固有免疫信號通路主要包括TLR2/TLR4介導(dǎo)的NF-κB信號通路和NOD1/NOD2介導(dǎo)的NF-κB信號通路。

3.1 TLR2/TLR4介導(dǎo)的NF-κB信號通路

TLRs是一類細(xì)胞跨膜蛋白，廣泛表達(dá)于包括動物乳腺在內(nèi)的多種組織，是首先被發(fā)現(xiàn)的PRRs［24］。牛TLRs有10個(gè)家族成員（TLR1-10）［25］，其中TLR2和TLR4分別是識別革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌的主要成員，也是奶牛乳腺感染先天防御的關(guān)鍵傳感器［26］。研究表明，在病原微生物感染機(jī)體后，TLR2和TLR4基因的表達(dá)量升高［27］，所表達(dá)的蛋白質(zhì)胞外LRR結(jié)構(gòu)域可識別多種病原微生物的PAMPs［23］，而胞內(nèi)TIR功能域可集結(jié)MyD88和TRIF等接頭分子。通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，激活細(xì)胞內(nèi)NF-κB和AP1等炎性信號通路［28］，最終使核轉(zhuǎn)錄因子活化，導(dǎo)致相關(guān)炎性介質(zhì)基因表達(dá)與分泌，招募免疫細(xì)胞到感染部位，激活相關(guān)免疫細(xì)胞，以清除病原微生物［29］。

近年來，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)了miRNA可調(diào)節(jié)TLRs介導(dǎo)的NF-κB信號通路，從而調(diào)控奶牛乳腺炎癥［30］。目前已發(fā)現(xiàn)牛miR-146a可靶向抑制TRAF6和TLR4基因的表達(dá)，負(fù)反饋調(diào)節(jié)TLR4/TRAF6/NF-κB通路，進(jìn)而緩解bMEC炎癥反應(yīng)［31］。Yang等［32］研究表明，小鼠miR-106a是LPS通過TLR4/NF-κB信號途徑刺激炎癥反應(yīng)的負(fù)反饋調(diào)節(jié)因子。上述研究可能為乳腺炎提供一種潛在的分子治療的方法。

除了TLRs介導(dǎo)的固有免疫分子機(jī)制的研究外，學(xué)者們也利用這些機(jī)制開展了抗炎方面的研究。Gondaira等［33］研究結(jié)果表明，活牛分枝桿菌可抑制bMEC中TLR2和TLR4基因的表達(dá)。Sun等［34］發(fā)現(xiàn)外源性H2S通過減輕LPS誘導(dǎo)的bMEC氧化應(yīng)激，阻斷TLR4/NF-κB通路發(fā)揮抗炎作用。而Li等［35］通過超表達(dá)泛素樣修飾酶1（UFL1）抑制了TLR4/NF-κB通路的激活，減輕了內(nèi)毒素誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、細(xì)胞凋亡、自噬和氧化應(yīng)激，從而減輕了炎癥反應(yīng)和細(xì)胞損傷。Wang等［36］實(shí)驗(yàn)表明苯丁酸鈉通過抑制TLR2/NF-κB/NLRP3信號通路而減輕S.aureus誘導(dǎo)的細(xì)胞炎癥反應(yīng)。

3.2 NOD1/NOD2介導(dǎo)的NF-κB信號通路

NLRs是發(fā)現(xiàn)不久的一類細(xì)胞內(nèi)PRRs，從結(jié)構(gòu)上可分為NLRCs和NLRPs，與多種疾病和自發(fā)炎癥失調(diào)密切相關(guān)［37］。NOD1和NOD2是NLRs家族的主要成員，是識別病原體的胞漿受體，可以被PAMPs激活［38］。在穩(wěn)定狀態(tài)下，NLRs以自動抑制非活化的形式存在，而在病原體感染后，它們通過C端LRR結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)受體相互作用蛋白2（RIP2），激活下游的NF-κB信號途徑［39］。有研究表明，NODs還可以與NLRPs分子（如NLRP1、NLRP3和NLRP12）相互作用，并導(dǎo)致Caspase-1的激活和IL-1β、IL-18的活化，與細(xì)胞凋亡和炎癥壞死有關(guān)［37］。除此之外，NODs也可使MAPK信號通路中的Iκ-Bα、P38、ERK和JNK磷酸化，從而使得細(xì)胞因子、趨化因子、一氧化氮和活性氧的產(chǎn)生，進(jìn)而使得細(xì)胞產(chǎn)生炎癥［40］。

NOD樣受體家族是一類重要的模式識別受體，可參與調(diào)控乳腺固有免疫進(jìn)程。Askarian等［37］研究表明，小鼠乳腺中NOD1和NOD2基因表達(dá)量與RIP2、NF-κB、IL-6以及TNF-α的表達(dá)量成正相關(guān)關(guān)系，表明NOD1/NOD2可能是S. aureus的識別受體，可通過識別S. aureus激活NF-κB信號通路，促進(jìn)IL-6和TNF-α的表達(dá)，參與免疫應(yīng)答［41］。Wu等［42］研究發(fā)現(xiàn)E. coli感染引起宿主細(xì)胞內(nèi)NOD1和NOD2表達(dá)增加，從而激活NLRP 3炎癥小體，引起Caspase-1和促炎細(xì)胞因子基因的轉(zhuǎn)錄上調(diào)，促使細(xì)胞產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。但是，他們又發(fā)現(xiàn)可通過添加鼠李糖乳桿菌GR-1來限制過度和有害的炎癥反應(yīng)。Wei等［43］研究表明，通過抑制NOD1依賴的NF-κB激活可使中性粒細(xì)胞NOD1的表達(dá)略有下降，而NOD1/NF-κB通路的損傷可能導(dǎo)致圍產(chǎn)期奶牛感染早期中性粒細(xì)胞存活減少，從而引起E. coli型乳腺炎的易感性增加。上述研究為進(jìn)一步分析NLRs在奶牛不同類型乳腺炎中的分子作用有一定指導(dǎo)意義，為乳腺炎治療新策略帶來了新的前景。

3.3 TLRs與NODs協(xié)同調(diào)控病原菌引起的固有免疫應(yīng)答

TLRs可以多途徑激活NF-κB信號通路，而NODs只能依賴于RIP2。倘若細(xì)胞內(nèi)RIP2基因被敲除，NODs介導(dǎo)的NF-κB信號通路的活化就會被完全阻斷［44］。近些年來有報(bào)道稱，RIP2也可以激活MAPK信號通路，并且可參與到TLRs介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中。若RIP2基因缺失，TLRs信號通路誘導(dǎo)的炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生就會大程度減少［45］。從以上得知TLRs與NLRs在參與機(jī)體免疫反應(yīng)的過程中有各自的信號通路，但同時(shí)又相互協(xié)同，識別了病原菌的TLRs會促進(jìn)NODs mRNA表達(dá)的上調(diào)（圖1）。

盡管如此，在NODs基因缺失的情況下，機(jī)體對病原菌的清除能力顯著下降，相反，在TLR2/TLR4基因缺失的情況下，機(jī)體的固有免疫細(xì)胞對病原菌的清除能力并不受過多影響［46］。同樣還有研究表明，當(dāng)TLRs缺失或不足時(shí)，NOD1會發(fā)揮免疫作用；在機(jī)體感染了革蘭氏陽性菌時(shí)，NOD2可以繞過TLRs途徑直接發(fā)揮清除病原菌的作用，而NOD1會在NOD2缺失或不足時(shí)才會發(fā)揮抗感染作用［43］。另外，NOD2基因缺失的巨噬細(xì)胞，不能識別菌體的細(xì)胞壁成分，此時(shí)NOD1活化，激活NF-κB和MAPK途徑，從而發(fā)揮免疫應(yīng)答作用［47］，這些研究強(qiáng)有力的證實(shí)了NOD1/NOD2在機(jī)體發(fā)揮固有免疫抵抗病原菌的機(jī)制中占有重要地位［48］。從以上研究結(jié)果可以看出，編碼基因調(diào)控病原菌引起的固有免疫應(yīng)答過程是非常復(fù)雜的，確定各個(gè)信號通路之間的關(guān)系尤為重要，通過總結(jié)完善PRRs之間協(xié)同調(diào)控的信號通路機(jī)制網(wǎng)絡(luò)，可為系統(tǒng)了解奶牛乳腺固有免疫的分子調(diào)控機(jī)制奠定基礎(chǔ)。

圖1 TLRs與NODs協(xié)同調(diào)控病原菌引起的固有免疫應(yīng)答［23］

4 固有免疫相關(guān)編碼基因的SNP與乳腺炎的關(guān)聯(lián)

在奶牛乳腺炎固有免疫相關(guān)編碼基因方面，除了研究分子調(diào)控機(jī)制外，學(xué)者們也試圖挖掘與奶牛乳腺炎易感性或抗病性密切相關(guān)的SNP位點(diǎn)。近年來，關(guān)于奶牛乳腺炎相關(guān)SNP的研究，主要集中在TLRs/NF-κB和趨化因子信號通路相關(guān)基因上。

4.1 TLRs/NF-κB信號通路相關(guān)基因SNP與乳腺炎的關(guān)聯(lián)

如上所述，TLRs/NF-κB信號通路是奶牛固有免疫的主要信號通路。在奶牛乳房炎SNP挖掘方面，主要集中在TLR4、TLR2和IRAK2基因上。

關(guān)于TLR4基因，王興平等［49］系統(tǒng)檢測了荷斯坦牛TLR4基因的SNPs，共發(fā)現(xiàn)了31個(gè)SNPs，其中EXON2-24和TIR2AA位點(diǎn)上的AA基因型為乳腺炎抗性基因型；陳仁金等［50］發(fā)現(xiàn)TLR4基因1760C＞T突變位點(diǎn)的等位基因C為優(yōu)勢等位基因，其個(gè)體具有更低的體細(xì)胞評分（SCS）。Wang等［51］進(jìn)行了404頭中國荷斯坦牛、三河牛和中國西門塔爾牛的TLR4基因的6個(gè)SNPs進(jìn)行單倍型構(gòu)建及其效應(yīng)分析，發(fā)現(xiàn)Hap2、Hap4和Hap12對SCS有負(fù)效應(yīng)，而Hap13對SCS有正效應(yīng)。

關(guān)于TLR2基因，馬騰壑等［52］發(fā)現(xiàn)TLR2基因的EcoR V酶切多態(tài)位點(diǎn)BB基因型個(gè)體的SCS顯著低于AA和AB基因型個(gè)體，說明BB基因型可能為抵御乳腺炎的有利基因型。Zhang等［53］在TLR2基因編碼胞外結(jié)構(gòu)域的編碼區(qū)檢測到385T＞G、398G＞A和1884G＞A的3個(gè)錯(cuò)義突變，并發(fā)現(xiàn)385T＞G位點(diǎn)的GG基因型個(gè)體的SCS均值顯著低于TT基因型和TG基因型個(gè)體。

此外，學(xué)者們也進(jìn)行了TLRs信號通路關(guān)鍵基因IRAK2的多態(tài)性與奶牛乳腺炎的關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果表明IRAK2基因g.28879位點(diǎn)的CC基因型個(gè)體的SCS顯著低于CT基因型個(gè)體，且以加性效應(yīng)為主；g.28916位點(diǎn)的GG基因型個(gè)體的SCS顯著低于AG基因型個(gè)體［54］。

4.2 NOD2與趨化因子相關(guān)基因與乳腺炎的關(guān)聯(lián)

NOD2作為PRRs的主要成員，在乳腺炎的關(guān)聯(lián)分析上，也受到學(xué)者們關(guān)注。Pant等［55］發(fā)現(xiàn)加拿大荷斯坦牛NOD2基因編碼區(qū)c.3020A＞T與SCS的EBVs相關(guān)。Wang等［56］在中國荷斯坦牛和中國西門塔爾牛NOD2基因第12外顯子144A＞T和1594G＞A發(fā)現(xiàn)兩個(gè)突變位點(diǎn)的基因型組合BBFF的SCS極顯著高于其他基因型組合。在趨化因子基因方面，李虹［57］對奶牛CXCL1基因3'UTR及5'端側(cè)翼區(qū)的3個(gè)SNPs進(jìn)行單倍型組合分析發(fā)現(xiàn)，H1H1、H2H4和H3H4單倍型組合（H1∶CCA；H2∶CCG；H3∶ATA 和H4∶ATG）具有較低的SCS。郭潤晴［58］發(fā)現(xiàn)奶牛CCL5基因5'端側(cè)翼區(qū)的g.727 T＞A可調(diào)控啟動子的活性，其TT基因型個(gè)體的SCS顯著高于AA基因型個(gè)體，還發(fā)現(xiàn)CCL5基因3'UTR的g.7413 G＞A可抑制牛miR-2295和靶標(biāo)3'UTR的結(jié)合，其野生型（GG）個(gè)體的SCS顯著高于突變型（AA）個(gè)體。

目前，雖然已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了影響奶牛乳腺炎的多個(gè)SNP位點(diǎn)，但是這些SNP影響乳腺炎的具體分子調(diào)控機(jī)制尚不完全清楚，能真正用于抗乳腺炎分子育種的分子標(biāo)記位點(diǎn)仍然有限，更多的SNP以及調(diào)控機(jī)制有待于深入研究和在大群體中驗(yàn)證。

5 展望

隨著高通量測序和分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，對大量數(shù)據(jù)進(jìn)一步挖掘成為篩選奶牛固有免疫相關(guān)基因和分子標(biāo)記的重要途徑。如前文所述，現(xiàn)已獲得了部分奶牛乳房炎固有免疫相關(guān)編碼基因的表達(dá)模式、分子作用機(jī)制和分子標(biāo)記位點(diǎn)。然而，固有免疫反應(yīng)在不同細(xì)胞類型和不同亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)中有多種識別機(jī)制，其在奶牛乳腺炎中的分子調(diào)控機(jī)制也尚未完全闡明。特別是關(guān)于候選基因與乳腺炎的關(guān)聯(lián)性及其群體遺傳多態(tài)性與乳腺炎的準(zhǔn)確關(guān)系，以及如何用于分子標(biāo)記進(jìn)行輔助抗乳房炎分子育種和分子治療等方面的研究還很缺乏。因此，繼續(xù)篩選可能用于提高奶牛固有免疫力的候選基因和分子標(biāo)記，更深入地探索PRRs之間相互作用以及固有免疫與適應(yīng)性免疫的聯(lián)動控制，仍然顯得尤為重要。