肖偉松， 樂瀅玉， 曾勝瀾， 覃小賓， 吳 聰， 牙程玉， 毛德文

1 廣西中醫(yī)藥大學(xué) 研究生學(xué)院， 南寧 530222； 2 廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院 肝病一區(qū)， 南寧 530023

肝臟炎癥已被證實與肝硬化、感染誘導(dǎo)的肝纖維化以及肝細(xì)胞癌(HCC)發(fā)展過程中的細(xì)胞焦亡有關(guān)[1]。細(xì)胞焦亡參與了針對細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌感染的免疫防御機(jī)制。作為促炎性程序性細(xì)胞死亡的一種新形式，正常情況下，有助于及時清除感染細(xì)胞，但越來越多的證據(jù)表明過度的炎癥小體激活會誘發(fā)無菌炎癥，導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡、嚴(yán)重組織損傷和器官衰竭，并最終導(dǎo)致某些疾病，例如急性或慢性肝炎和肝纖維化。因此，本綜述將重點論述細(xì)胞焦亡在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、酒精性肝病(ALD)、病毒性肝炎、肝纖維化和HCC發(fā)生、發(fā)展中的作用機(jī)制。

1 細(xì)胞焦亡的典型特征

細(xì)胞焦亡是依賴caspase-1/4/5/11介導(dǎo)的一種新型的程序性細(xì)胞死亡，caspase-1/4/5/11是一類促炎性半胱氨酸蛋白酶，均屬于caspase家族。細(xì)胞焦亡是機(jī)體應(yīng)對細(xì)菌入侵的重要先天免疫反應(yīng)。但是，過度的細(xì)胞焦亡可能會導(dǎo)致敗血性休克和其他免疫疾病。有研究[2]表明，在各種微生物和內(nèi)源性刺激的情況下，人類的caspase-1/4/5和小鼠的caspase-1/11被激活以裂解gasdermin D(GSDMD)蛋白，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的細(xì)胞膜破裂，證明焦亡細(xì)胞質(zhì)膜的破裂與GSDMD蛋白密切相關(guān)，caspase-1/11能夠切割GSDMD的接頭結(jié)構(gòu),釋放gasdmin-N端結(jié)構(gòu)域,然后其與質(zhì)膜的內(nèi)部小葉相結(jié)合發(fā)生寡聚化,在細(xì)胞膜上形成1～2 nm的孔隙,從而增大了細(xì)胞膜的通透性,K+外流、Na+內(nèi)流,細(xì)胞的離子梯度消失,細(xì)胞內(nèi)滲透壓增加,細(xì)胞膜失去了調(diào)控物質(zhì)進(jìn)出的能力,迅速膨脹,最終導(dǎo)致細(xì)胞滲透性崩解。損傷相關(guān)分子模式(DAMP)等細(xì)胞內(nèi)容物釋放到細(xì)胞外環(huán)境中，募集更多細(xì)胞因子，進(jìn)一步延續(xù)組織中的炎癥級聯(lián)反應(yīng)。細(xì)胞焦亡主要受兩個主要途徑調(diào)控：caspase-1誘導(dǎo)的經(jīng)典型炎癥途徑和caspase-11誘導(dǎo)的非經(jīng)典型炎癥途徑[3]。在經(jīng)典型細(xì)胞焦亡中，來自細(xì)胞膜的一系列DAMP通過典型的炎癥小體激活caspase-1，從而釋放GSDMD-N末端以引發(fā)焦亡。對于非經(jīng)典型細(xì)胞焦亡，細(xì)胞質(zhì)脂多糖(LPS)激活capase-4/5/11后,主要通過裂解GSDMD來誘發(fā)細(xì)胞程序性死亡，其發(fā)生不同于經(jīng)典型，不依賴于炎癥小體和caspase-1。

1.1 經(jīng)典細(xì)胞焦亡途徑分子機(jī)制 經(jīng)典型細(xì)胞焦亡途徑的激活主要由多種病原體相關(guān)分子模式(pathogen-associated molecular pattern，PAMP)和DAMP觸發(fā)，依賴于模式識別受體(pattern-recognition receptor,PRR)接受危險信號分子刺激,通過ASC招募caspase-1前體(pro-caspase-1)組裝形成炎癥小體，并激活caspase-1分子進(jìn)一步切割下游GSDMD目的蛋白,最終促進(jìn)細(xì)胞焦亡的發(fā)生[4]。炎癥小體一般包括3個主要成分[5]: (1) 感受器:位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的PRR, 主要有NOD樣受體 (NOD-like receptor，NLR)和黑色素瘤缺乏因子2樣受體 (absent in melanoma 2，AIM2) ; (2) 效應(yīng)器:pro-caspase-1; (3) 凋亡相關(guān)微粒蛋白 (apoptosis associated speck-like protein containing a CARD, ASC) :將PRRs與pro-caspase-1結(jié)合起來的銜接蛋白。新興證據(jù)[6]表明，已經(jīng)鑒定出5個典型的炎性小體，包括NLRP1、NLRP3、NLRP4、NLRP7和IFI16，均可由不同的刺激觸發(fā)[6]。在細(xì)胞焦亡的最初過程[7]中，炎癥小體通過NOD樣受體(NLRP1、3、6、7、12，NLRC4)和AIM2激活caspase-1，同時通過ASC的同源蛋白互作結(jié)構(gòu)域和C端半胱天冬酶募集域(CARD)的寡聚化來募集上下游的PRR和pro-caspase-1,組裝成炎癥小體進(jìn)行下游的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。通過CARD-CARD相互作用將pro-caspase-1募集到ASC中，導(dǎo)致其裂解成N端前結(jié)構(gòu)域和C端催化和相互作用結(jié)構(gòu)域；形成二聚體的pro-caspase-1進(jìn)一步裂解成為p10亞基、p20亞基，并激活其自身的蛋白酶生成caspase-1。炎性體復(fù)合物的形成最終導(dǎo)致caspase-1的活化，將會誘導(dǎo)促炎性前體細(xì)胞因子(pro-IL-1β和pro-IL-18)的蛋白水解，從而釋放出活性的IL-1β和IL-18,最終誘導(dǎo)細(xì)胞焦亡。

1.2 非經(jīng)典細(xì)胞焦亡途徑分子機(jī)制 多年來，caspase-1介導(dǎo)的途徑被認(rèn)為是介導(dǎo)焦磷酸化的唯一途徑。但在2011年，Kayagaki等[8]觀察到caspase-11對于感染大腸桿菌、嚙齒動物檸檬酸桿菌和霍亂弧菌的巨噬細(xì)胞中IL-1β的產(chǎn)生和焦磷酸化至關(guān)重要，可激活小鼠巨噬細(xì)胞中caspase-11介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)途徑，導(dǎo)致IL-1β/IL-18的成熟和釋放，這揭示了細(xì)胞焦亡的另一條調(diào)控途徑。與經(jīng)典型途徑不同,非經(jīng)典型焦亡途徑依賴于caspase-4/5/11的激活。具體而言，caspase-4/5/11通過其CARD結(jié)構(gòu)域直接與LPS尾部的脂質(zhì)體A相結(jié)合，可促進(jìn)其自身的寡聚化和激活，活化的胱天蛋白酶裂解GSDMD可產(chǎn)生具有生物活性的GSDMD-NT，從而導(dǎo)致細(xì)胞焦亡的發(fā)生[9]。因此，在非經(jīng)典型細(xì)胞焦亡途徑中，炎癥小體的裝配對于caspase-4/5/11介導(dǎo)的GSDMD裂解不是必需的。GSDMD-NT引起caspase-1依賴性NLRP3炎性小體的激活，導(dǎo)致IL-1β和IL-18的分泌。隨著研究的不斷深入細(xì)化,一些新的分子機(jī)制逐漸被發(fā)現(xiàn)[10]。Pannexin-1是細(xì)胞膜上的通道蛋白,控制小分子物質(zhì)進(jìn)出,caspase-11的激活會導(dǎo)致Pannexin-1蛋白斷裂形成通路,將ATP釋放到細(xì)胞外,當(dāng)P2X7受體受到ATP長期反復(fù)的刺激時,P2X7通道開放使K+、Na+、Ca2+外流,打破細(xì)胞膜內(nèi)外離子平衡,細(xì)胞發(fā)生滲透性腫脹進(jìn)而膜破裂,最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。值得令人思考的是，LPS可直接與caspase-4/5/11的CARD域結(jié)合，但不與其他caspase結(jié)合。目前的研究尚不足以解釋其具體作用機(jī)制，需要對LPS結(jié)合的caspase-4/5/11進(jìn)行結(jié)構(gòu)性研究以證實這些發(fā)現(xiàn)。

1.3 細(xì)胞焦亡的關(guān)鍵蛋白——GSDMD 最近的研究[11]已確定蛋白GSDMD是活性caspase-11和caspase-1的主要底物。Gasdermin(GSDM)蛋白家族是先天免疫和細(xì)胞死亡反應(yīng)的調(diào)節(jié)劑。GSDMD包含一個N末端(gasdermin-N)和一個C末端(gasdermin-C)，兩者通過一個環(huán)連接。gasdermin-N結(jié)構(gòu)域具有強(qiáng)大的成孔活性，可與gasdermin-C結(jié)構(gòu)域相互作用并受其抑制。激活的caspase-1和4/5/11裂解了GSDMD中的連接環(huán)，從而啟動了gasdermin-N結(jié)構(gòu)域的自抑制作用。未釋放的gasdermin-N結(jié)構(gòu)域通過與膜磷酸肌醇結(jié)合而遷移到質(zhì)膜上，促使細(xì)胞膜穿孔，從而引起細(xì)胞腫脹并最終導(dǎo)致滲透裂解。GSDMD孔釋放細(xì)胞內(nèi)容物，包括炎性細(xì)胞因子IL-1β和IL-18，這是caspase-1的其他底物。此外，活化的caspase-11裂解pannexin-1(ATP的膜通道)的胞質(zhì)區(qū)，從而誘導(dǎo)ATP的細(xì)胞外釋放，后者以自分泌或旁分泌的方式與P2X7受體結(jié)合，從而打開P2X7的通道，最終，小分子物質(zhì)(例如Na+，水，胞質(zhì)蛋白和促炎因子)將從通道流出，而較大的細(xì)胞器(如核糖體)將在細(xì)胞中被阻塞，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡，并在細(xì)胞周圍引發(fā)一系列免疫炎癥反應(yīng)[12]，從而導(dǎo)致細(xì)胞焦亡。GSDMD屬于gasdermin家族，其包含人類的6個成員和小鼠的10個成員。所有家族成員(DFNB59除外)都具有兩域結(jié)構(gòu)，其gasdermin-N結(jié)構(gòu)域能夠誘導(dǎo)細(xì)胞焦亡。最近的研究[13]表明，GSDME、GSDMA和GSDMA3的gasdermin-N結(jié)構(gòu)域也能夠在體外的脂質(zhì)體或單層膜上形成孔，提示了gasdermin家族采用了一種成孔機(jī)制來裂解細(xì)胞并執(zhí)行焦磷酸化，這可能將焦磷酸化重新定義為gasdermin介導(dǎo)的程序性壞死細(xì)胞死亡。但是，gasdermin-N結(jié)構(gòu)域組裝孔以穿透脂質(zhì)膜的機(jī)制尚不清楚。

2 細(xì)胞焦亡與肝臟疾病的關(guān)系

2.1 細(xì)胞焦亡與ALD的關(guān)系 ALD是慢性肝病和導(dǎo)致肝纖維化、肝硬化的一個重要病因。由于ALD的損傷機(jī)制錯綜復(fù)雜,具體致病分子機(jī)制尚不清楚，目前尚無有效的治療策略。故對ALD的發(fā)病機(jī)理和分子調(diào)控機(jī)制的了解將有助于開發(fā)良好的診斷指標(biāo)以及預(yù)防和治療方法。近年來發(fā)現(xiàn)細(xì)胞焦亡可能是ALD發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵機(jī)制。Khanova等[14]使用RNA測序分析發(fā)現(xiàn)，經(jīng)組織學(xué)驗證的酒精性肝炎患者和小鼠肝組織中的caspase-4/11基因上調(diào)，但慢性酒精性脂肪性肝炎小鼠和健康的人類肝臟中沒有。另有研究[15]表明，在酒精喂養(yǎng)的小鼠中NLRP3、caspase-1和IL-1β高表達(dá)，而在NLRP3-/-或caspase-1-/-小鼠中，肝臟炎癥和脂肪變性卻明顯減弱。由此可見，NLRP3炎性小體參與了ALD的發(fā)生發(fā)展，酒精對細(xì)胞焦亡的影響是由PAMP和DAMP所觸發(fā)，例如ATP和可溶性尿酸，從乙醇誘發(fā)受損的原代肝細(xì)胞中釋放，并觸發(fā)炎性依賴性細(xì)胞因子的釋放，刺激并維持ALD的炎癥周期。在肝細(xì)胞中酒精代謝也增加活性氧(ROS)的產(chǎn)生和導(dǎo)致線粒體功能障礙，從而增加炎性細(xì)胞因子對肝細(xì)胞的敏感性。此外，酒精還可通過叉頭盒蛋白O1降低肝細(xì)胞中miRNA-148a的表達(dá)，并誘導(dǎo)硫氧還蛋白相互作用蛋白(TXNIP，α-arrestin家族成員)的過表達(dá)。TXNIP結(jié)合并促使NLRP3炎癥小體的活化，從而導(dǎo)致caspase-1介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡。值得重視的是，有研究[16]證明慢病毒傳遞引起的肝細(xì)胞特異性表達(dá)miRNA-148a可直接抑制硫氧還蛋白與NLRP3之間的相互作用，從而減緩細(xì)胞焦亡和降低ALD的發(fā)生率。上述報告提供了證據(jù)和方向，表明NLRP3炎性小體在ALD的發(fā)展過程中具有致病性，但是，啟動NLRP3激活的觸發(fā)因素尚待確定。

2.2 細(xì)胞焦亡與NAFLD的關(guān)系 NAFLD是一種無過量飲酒史, 以彌漫性肝細(xì)胞大泡性脂肪變性為主要特征的臨床病理綜合征。其病程包括單純性脂肪肝、脂肪性肝炎和脂肪性肝纖維化, 最后可能演變成肝硬化和HCC。目前對于NALFD病理機(jī)制認(rèn)識尚淺，缺乏有效的治療對策，因此如何延緩NAFLD進(jìn)展并嘗試逆轉(zhuǎn)這一過程一直是倍受關(guān)注的話題。研究[17]發(fā)現(xiàn)在NAFLD發(fā)展成為NASH的過程中, 細(xì)胞焦亡具有十分重要的作用，NLRP3炎性小體的激活加速了這一病理進(jìn)程，并加重了肝臟的炎癥反應(yīng)。最近的研究[18]表明，與普通飲食喂養(yǎng)的小鼠相比，NAFLD小鼠的NLRP3、ASC和caspase-1的表達(dá)明顯增加。在HepG2和L02細(xì)胞中證實了相同的結(jié)果，表明抑制NLRP3活性會降低兩種細(xì)胞系中脂質(zhì)的積累。另有試驗[19]發(fā)現(xiàn)，NAFLD患者肝臟的NLRP3、IL-1β、IL-18和pro-caspase-1 mRNA水平顯著高于健康人群。值得重視的是，NAFLD發(fā)病的始動因素與胰島素抵抗有著緊密的聯(lián)系。而NLRP3可通過激活與胰島素抵抗相關(guān)的炎性因子(IL-1β、IL-18和NF-κB)，促進(jìn)NAFLD的病理進(jìn)展。此外，在NAFLD狀態(tài)下，肝細(xì)胞承受過度的氧化應(yīng)激，產(chǎn)生過量的ROS。使TXNIP與硫氧還蛋白分離，從而激活了NLRP3。有研究[20]表明TXNIP上調(diào)會導(dǎo)致IL-1β和IL-18的分泌增多，加重肝臟炎癥反應(yīng)。在NASH模型中，具有IL-1α和IL-1β基因敲除的小鼠顯著減緩了從脂肪變性到脂肪性肝炎的病理過程，而IL-1β通過與TNFα的協(xié)同作用增加了肝細(xì)胞的TG水平并誘導(dǎo)肝細(xì)胞死亡。由此可見，抑制NLRP3炎性小體形成和活化的過程，能夠減弱肝臟細(xì)胞焦亡后引起的肝臟炎癥反應(yīng)、細(xì)胞損傷和脂肪變性的現(xiàn)象, 具有一定減緩NAFLD的作用。

2.3 細(xì)胞焦亡與病毒性肝炎的關(guān)系 病毒性肝炎是肝炎病毒感染肝細(xì)胞并引起高病死率的肝臟炎癥，其中約90%可歸因于HBV和HCV引起的慢性感染, 嚴(yán)重的病毒性肝炎發(fā)展成肝纖維化、肝硬化甚至HCC。值得注意的是，NLRP3炎性小體是病毒性肝炎發(fā)生發(fā)展的潛在因素。研究[21]發(fā)現(xiàn)，活動性未經(jīng)治療的慢性HBV患者肝臟的NLRP3、caspase-1和IL-1β的表達(dá)水平明顯高于慢性緩解的患者。此外，在HBV感染者中，IL-1β的水平與肝臟炎癥的嚴(yán)重程度之間存在很強(qiáng)的相關(guān)性，由此可見，NLRP3介導(dǎo)的IL-1β是HBV誘導(dǎo)的病毒性肝炎的潛在驅(qū)動力。此外，有關(guān)HCV感染的研究[22]表明，Kupffer細(xì)胞已被鑒定為慢性HCV感染者IL-1β的主要細(xì)胞來源，Kupffer細(xì)胞產(chǎn)生的IL-1β與炎癥反應(yīng)增強(qiáng)有關(guān)。另外NLRP3炎性體亦能刺激肝細(xì)胞中脂質(zhì)滴的形成，從而促進(jìn)HCV的形態(tài)變化和復(fù)制，加速了肝臟疾病的進(jìn)展。因此，進(jìn)一步研究HBV和HCV與肝臟細(xì)胞焦亡關(guān)系, 能夠更深層次的探索人肝炎病毒誘導(dǎo)肝臟疾病產(chǎn)生和發(fā)展的致病機(jī)制。

2.4 細(xì)胞焦亡與肝纖維化的關(guān)系 肝纖維化是各種病因?qū)е碌募?xì)胞外基質(zhì) (ECM) 的形成與降解失衡, 使得ECM過度沉積并最終可發(fā)展為肝硬化和HCC。近年來發(fā)現(xiàn)，NLRP3炎性小體的激活在肝纖維化的發(fā)病機(jī)理中具有十分重要的作用。在肝纖維化的病理過程中，最顯著的表征是肝星狀細(xì)胞 (HSC)的激活。HSC具有促纖維化、促炎效應(yīng)等性質(zhì), 激活過程中分泌多種ECM的成分, 如α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、膠原蛋白等。在HSC中的NLRP3炎癥小體活化可導(dǎo)致α-SMA陽性細(xì)胞數(shù)量增加, 而α-SMA陽性是HSC活化的關(guān)鍵標(biāo)志物, 與肝纖維化的發(fā)展密切相關(guān)。因此, NLRP3炎癥小體活化可激活HSC, 繼而導(dǎo)致肝纖維化發(fā)生、發(fā)展。研究[23]表明，與NLRP3-/-和ASC-/-小鼠相比，野生型小鼠具有更高的α-SMA表達(dá)和更大的天狼星紅染色面積，誘發(fā)嚴(yán)重的肝纖維化，證明了上述觀點。相反，小鼠NLRP3炎性小體的激活促進(jìn)了肝臟炎癥和纖維化的病理過程。值得注意的是，活化的caspase-1、IL-18和IL-1β信號傳導(dǎo)也是使得NLRP3炎性小體活化，從而導(dǎo)致肝纖維化發(fā)展的關(guān)鍵。IL-1β和IL-18均可誘導(dǎo)膠原蛋白的沉積。有報道[24]MCC950是一種可阻斷NLRP3炎性體的藥物，降低肝臟caspase-1的表達(dá)以及巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的數(shù)量，最終緩解肝纖維化，說明通過阻斷NLRP3炎性小體激活可能是治療肝纖維化的關(guān)鍵機(jī)制。研究[25]表明，腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensin system，RAS)對肝纖維化具有調(diào)節(jié)作用。血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)是RAS的關(guān)鍵分子，它誘導(dǎo)NADPH氧化酶4/線粒體來源ROS的生成并加劇肝纖維化，而NLRP3的激活與兩者的生成緊密相關(guān)。Ang Ⅱ的抑制作用通過減少ROS的產(chǎn)生并影響NLRP3炎性小體的活化而減輕了肝纖維化。NF-κB信號在肝纖維化的病理過程中也很重要[26]，NLRP3炎性小體的活化則伴隨著NF-κB信號的上調(diào)。抑制NF-κB信號傳導(dǎo)以及促進(jìn)HSC凋亡可改善肝纖維化。這些因素與NLRP3炎性小體的激活密切相關(guān)，由此可見，通過探索對NLRP3炎性小體活性抑制的具體分子作用機(jī)制，從而預(yù)防和治療肝纖維化將是一個很好的選擇。

2.5 細(xì)胞焦亡與HCC的關(guān)系 HCC是肝臟中最常見，最具侵略性的原發(fā)腫瘤，治療選擇有限。手術(shù)切除被認(rèn)為是標(biāo)準(zhǔn)的治療方法之一。但HCC仍表現(xiàn)出較高的術(shù)后復(fù)發(fā)率，進(jìn)展迅速且預(yù)后極差。迫切需要尋找新的HCC治療靶點。細(xì)胞焦亡作為一種新的細(xì)胞程序性死亡方式, 可能是繼細(xì)胞衰老、凋亡后新的治療HCC的方法。Xia等[27]發(fā)現(xiàn)，NLRP3在HCC組織中的表達(dá)顯著下調(diào)，甚至完全不存在，并且與HCC的病理分級和臨床分期呈負(fù)相關(guān)，表明NLRP3炎性小體參與了HCC的發(fā)展進(jìn)程?？紤]到HCC發(fā)生率的性別差異，17β-雌二醇(E2)和雌激素受體(ER)β等因素也受到了重視。研究[28]表明，ERβ的表達(dá)在HCC組織中也降低，并且發(fā)現(xiàn)用E2激活的NLRP3炎性小體通過E2/ERβ/MAPK信號處理的HCC細(xì)胞系(SMMC7721、BEL7402和HepG2細(xì)胞)最終改善了HCC的進(jìn)程。此外，E2處理激活的NLRP3炎性體誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞中的caspase-1依賴性凋亡，導(dǎo)致HCC進(jìn)程受到抑制。結(jié)果表明，E2和ERβ通過激活NLRP3炎性小體引發(fā)焦磷酸化，發(fā)揮抗癌作用。另外，關(guān)于晚期HCC的研究[29]發(fā)現(xiàn), AIM2炎癥小體通過阻滯mTOR-S6K1信號通路, 使雷帕霉素靶蛋白對S6K1蛋白的激活作用減弱, 從而抑制HCC細(xì)胞生長、增殖, 且AIM2炎癥小體的堆積會使HCC細(xì)胞發(fā)生焦亡, 進(jìn)而發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)。表明通過誘導(dǎo)AIM2炎癥小體表達(dá), 增強(qiáng)細(xì)胞焦亡的效應(yīng), 可能延緩HCC的進(jìn)展。綜上所述，細(xì)胞焦亡有關(guān)的因素具有促進(jìn)和抑制腫瘤發(fā)生的雙重機(jī)制。以藥理學(xué)靶向NLRP3炎性體可能會抑制HCC的增殖和轉(zhuǎn)移，這表明這可能是一種新的治療策略。

3 總結(jié)與展望

綜上所述，細(xì)胞焦亡作為一種新型炎性相關(guān)的程序性死亡方式，其在慢性肝臟疾病發(fā)生發(fā)展扮演著極其重要的角色，通過阻斷相關(guān)分子(例如NLRP3 caspase、IL-1)抑制焦磷酸化影響肝病的進(jìn)展，并為肝病提供了一種潛在未來的治療方法。但是基于細(xì)胞焦亡研究肝臟疾病的領(lǐng)域仍然存在著許多需要解決的問題：(1)由于焦磷酸化是抵抗病原體必不可少的防御路線，抑制磷酸化可能會增加機(jī)會性感染，目前，要轉(zhuǎn)化為臨床療效，仍需要大量的研究。(2)PRR激活和細(xì)胞穩(wěn)態(tài)之間的相互作用及其對生理功能的影響仍在研究中,許多PRR的功能和特異性配體仍然未知,了解受體激活機(jī)制和配體識別的受體結(jié)構(gòu)對于設(shè)計新的免疫療法將是至關(guān)重要的。(3)此外，肝纖維化中炎癥小體信號傳導(dǎo)的機(jī)制尚有許多未知，需要進(jìn)一步研究以闡明炎癥小體類型及其在不同類型肝損傷中的作用之間的相關(guān)性，以期為開發(fā)抑制炎癥小體組裝或作用于下游信號分子的療法提供機(jī)會。(4)值得注意的是，GSDMD主要在免疫細(xì)胞和胃腸道中表達(dá)，肝細(xì)胞中的表達(dá)水平可能較低。將來需要在免疫細(xì)胞和肝細(xì)胞中使用組織特異性GSDMD KO小鼠的工作將有助于確定細(xì)胞焦亡在免疫細(xì)胞與肝細(xì)胞中在酒精性肝炎的發(fā)病機(jī)制中的作用。(5)炎癥和細(xì)胞焦亡在NAFLD發(fā)展的作用機(jī)制研究中，還需要在更大且獨立的患者隊列中驗證肝臟GSDMD和GSDMD-N表達(dá)與NASH評分和纖維化指數(shù)之間的相關(guān)性，將其表達(dá)與疾病晚期(如NAFLD肝硬化)和/或NAFLD-HCC進(jìn)行比較，可有助于確定其預(yù)后價值和治療干預(yù)措施的適當(dāng)疾病階段。目前細(xì)胞焦亡調(diào)控肝臟疾病的具體機(jī)制尚不清楚, 還存在很多尚未闡明的關(guān)鍵科學(xué)問題。該領(lǐng)域的探索能夠為預(yù)防和治療慢性肝臟疾病提供新的方法和策略。

作者貢獻(xiàn)聲明：毛德文、肖偉松負(fù)責(zé)課題設(shè)計，資料分析，撰寫論文，修改論文；毛德文、肖偉松負(fù)責(zé)擬定寫作思路，指導(dǎo)撰寫文章并最后定稿；樂瀅玉、曾勝瀾、覃小賓、吳聰、牙程玉參與收集數(shù)據(jù)。