李 強(qiáng) 任冰潔 胡穎熹 李道明 李大鵬 陶 敏 梁容瑞 趙 晶

微波消融(Microwave Ablation,MWA)廣泛用于治療不能切除的HCC和復(fù)發(fā)性HCC，具有侵襲性小，療效好，無(wú)放射或化療副作用的優(yōu)點(diǎn)，其五年生存率與手術(shù)切除相似[1]。研究表明T細(xì)胞亞群在化療、放療等抗癌治療后發(fā)生改變，尚不清楚其是否在肝惡性腫瘤患者M(jìn)WA前后發(fā)生了變化。本項(xiàng)研究中，我們探討了MWA對(duì)肝臟惡性腫瘤患者T細(xì)胞亞群水平的影響。

1 材料與方法

1.1 患者與樣本

本研究的人群來(lái)自蘇州大學(xué)第一附屬醫(yī)院于2015年6月至2019年2月收治的患者?；颊吖?3例，其中轉(zhuǎn)移性肝癌37例，原發(fā)性肝癌6例。納入標(biāo)準(zhǔn)是腫瘤位于肝臟部位，原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性均可。所有患者均簽署了抽血和相關(guān)治療的知情同意書(shū)。在消融治療前，治療后24 h，治療后15 d，治療后30 d，采集全血(4 ml)用于檢測(cè)。

1.2 消融方法

本研究中使用的消融方法是微波消融。在CT引導(dǎo)下確定穿刺部位和路徑。使用0.5%利多卡因進(jìn)行局部浸潤(rùn)麻醉。我們根據(jù)腫瘤的大小，數(shù)量和位置為每位患者設(shè)計(jì)消融功率和時(shí)間，使用功率范圍為40～70 W和能量輸出時(shí)間范圍5～20 min。

1.3 T細(xì)胞亞群檢測(cè)

在消融治療前3天以?xún)?nèi)及消融治療后的24 h，15 d，30 d從患者收集外周血樣品。應(yīng)用BD Multi-TEST IMK試劑盒通過(guò)流式細(xì)胞儀分析T細(xì)胞(CD3+)，CD4+T細(xì)胞(CD3+/CD4+)和CD8+T細(xì)胞(CD3+/CD8+)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié)果

2.1 入組患者的臨床特征(表1)

共分析了43例肝臟腫瘤部位(37例肝轉(zhuǎn)移，6例原發(fā)性肝癌)。對(duì)治療前，治療后24 h，治療后15 d和治療后30 d細(xì)胞因子和T淋巴細(xì)胞水平進(jìn)行比較。

表1 入組患者的臨床特征

2.2 MWA治療前后T淋巴細(xì)胞亞群的水平

MWA治療前后T淋巴細(xì)胞亞群的水平變化如表2所示，肝部腫瘤微波消融前、消融后24 h、消融后15 d、消融后30 d外周血中CD3+細(xì)胞比例逐漸升高，消融后30 d CD3+細(xì)胞比率與消融前有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；消融后15 d CD3+/CD4+細(xì)胞比例與消融前有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；消融后24 h CD3+/CD8+細(xì)胞比例顯著高于消融前，24 h后CD3+/CD8+細(xì)胞比例將至消融前水平；消融后24 h CD4+/CD8+比值顯著低于消融前，消融后15 d CD4+-CD8+比值顯著高于消融前，消融后30 d CD4+/CD8+比值恢復(fù)至消融前水平。從治療后15 d到30 d，除CD3+仍呈上升趨勢(shì)，其他T細(xì)胞亞群大多恢復(fù)到治療前的水平。

3 討論

1994 年日本學(xué)者 Seki 等[2]第一次報(bào)道了MWA治療肝癌患者，在MWA治療的臨床應(yīng)用上具有里程碑式意義。MWA優(yōu)點(diǎn)是熱效率高、消融時(shí)間短，消融范圍大、受血流灌注影響較小等，可在最低限度損傷正常肝組織的情況下完全殺滅原位腫瘤[3]。傳統(tǒng)意義上的熱消融的功效主要取決于其直接的腫瘤殺傷作用，目的是使腫瘤完全消融。近年來(lái)，熱消融的間接全身效應(yīng)也引起了人們的關(guān)注，例如由熱消融引起的抗腫瘤免疫反應(yīng)。研究證據(jù)表明消融治療不僅可以直接殺死原位癌細(xì)胞，還可以調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞，促進(jìn)肝臟惡性腫瘤患者的免疫[4-5]。Zhang等[5]研究表明，微波消融術(shù)后，肝癌患者CD3+T細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞數(shù)量顯著上升，微波消融可緩解腫瘤引起的免疫功能的抑制，改善肝細(xì)胞癌患者的免疫功能紊亂。張愛(ài)華等[6]研究發(fā)現(xiàn)，微波消融能使復(fù)發(fā)性肝癌患者的CD4+T淋巴細(xì)胞比例升高，同時(shí)降低CD8+T淋巴細(xì)胞比例并提高CD4+/CD8+的比值。CD4+/CD8+比值能夠反映機(jī)體的T細(xì)胞免疫功能狀態(tài)。本研究結(jié)果顯示，在微波消融后15 d，CD3+，CD3+/CD4+和CD3+/CD8+細(xì)胞比率顯著增加。在微波消融后30 d，僅CD3+細(xì)胞顯著增加，但其在消融后24 h未發(fā)現(xiàn)顯著差異。由此可見(jiàn)，MWA可改善肝惡性腫瘤患者的免疫功能狀態(tài)，然而這些T細(xì)胞亞群的變化是否對(duì)患者的復(fù)發(fā)或生存時(shí)間有影響仍有待進(jìn)一步研究揭示。

表2 消融治療前后T淋巴細(xì)胞亞群的變化