李知翰 崔永輝 張西亮

胃癌是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，主要由于飲食結(jié)構(gòu)改變及幽門螺桿菌感染等原因引起，死亡率較高[1-2]。晚期胃癌患者以貧血和營養(yǎng)不良為主要表現(xiàn)，臨床上化療常被用來治療晚期胃癌?？镙嫉萚3]研究證明，阿帕替尼可抑制腫瘤組織的生成，使晚期胃癌患者的生命延長。因此本研究旨在探究血清結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因-1(MACC1蛋白)在晚期胃癌患者中的表達情況及對阿帕替尼化療療效的預測價值，現(xiàn)將結(jié)果作出如下報道。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2017年12月我院收治的60例晚期胃癌患者，按治療方法的不同將其分為對照組(n=36)和觀察組(n=24)，其中男性37例，女性23例；年齡32～65歲，平均(44.32±7.13)歲，腺癌有28例，其他類型有32例；低分化癌22例，中高分化癌38例。納入標準：經(jīng)影像學或細胞學檢查證實為胃癌的患者，且腫瘤臨床分期為Ⅳ期；既往化療失敗或復發(fā)轉(zhuǎn)移者；生存期大于3個月者；美國東部腫瘤協(xié)作組(ECOG)[4]評分為0～2分者；簽署知情同意書者等。排除標準：靶病灶處接受過放療者；按照NYHA標準[5]，Ⅲ～Ⅳ級心功能不全者；大手術(shù)后30天內(nèi)者；伴有重度肝腎功能不全、腸穿孔、活動性出血等癥狀者等。分別取患者的胃癌組織及對應的正常胃黏膜組織進行MACC1蛋白檢測。2組基線資料差異不顯著(P>0.05)，可比較分析。本院醫(yī)學倫理委員會審核并通過本研究。

1.2 治療方法

對照組患者口服替吉奧片80 mg/m2，每日1次，連續(xù)服用2周；每個化療周期第1天靜脈點滴奧沙利鉑甘露醇注射液100 ml，21 d為1個化療周期；觀察組在對照組的基礎(chǔ)上，口服甲磺酸阿帕替尼片(艾坦)，850 mg/d，每日1次。2組均在化療3個周期后評估療效。

1.3 觀察指標

(1)統(tǒng)計MACC1蛋白在胃癌組織和正常胃黏膜組織中的表達情況。Western印跡檢測MACC1的表達水平：分別將胃癌組織及相應正常胃黏膜組織剪碎成塊，用冷磷酸鹽緩沖液(PBS)清洗，加入裂解液，勻漿器勻漿后，置于冰上裂解30 min。取5 μl蛋白樣品，按BCA蛋白定量檢測試劑盒說明書檢測蛋白樣品的濃度。剩余蛋白樣品與5倍上樣緩沖液按4∶1比例混合，煮沸5 min。在聚丙烯酰胺凝膠電泳樣品孔中加入40 μl變性蛋白質(zhì)樣品，在80 V電壓下觀察到溴酚藍，將電壓調(diào)整到120 V，直到溴酚藍進入底端。取出蛋白凝膠，在4 ℃，90 V電壓下將蛋白轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，5%脫脂奶粉在37 ℃環(huán)境下封閉1.5 h后，在4 ℃下加入1∶800一抗反應過夜，然后再加入1∶2000二抗中在37 ℃下反應1.5 h，加顯色液，以GAPDH為內(nèi)參照，分析目的蛋白相對表達水平。(2)統(tǒng)計2組患者化療前和化療3個周期后MACC1蛋白含量的變化情況。(3)統(tǒng)計2組患者化療3個周期后的預后情況。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 在正常胃黏膜組織和胃癌組織中MACC1蛋白的表達情況比較

MACC1蛋白在胃癌組織中的陽性表達率為63.33%(38/60)，顯著高于正常胃黏膜組織中的表達率6.67%(4/60)，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=42.344，P<0.01)。

2.2 晚期胃癌患者化療前后MACC1蛋白含量比較

化療3個周期后，2組患者的MACC1蛋白含量均降低，且觀察組較對照組降低的更顯著(P<0.01)。見表1。

表1 晚期胃癌患者化療前后MACC1蛋白含量比較

2.3 2組患者化療3個周期后預后情況比較

化療3個周期后，與對照組相比，觀察組的無進展生存時間和總生存時間均較長(P<0.01)。見表2。

表2 2組患者化療3個周期后預后情況比較月)

3 討論

晚期胃癌患者常存在貧血、消瘦、營養(yǎng)不良等現(xiàn)象，多選擇化療延長生命，同時會選擇靶向治療以減輕對正常細胞的損害[6-7]。由于缺乏準確的治療策略，且組織學等分子生物學差異使胃癌患者對化療的敏感性有較大差異，晚期患者化療后的5年生存率不超過5%[8-9]，因此，尋找低損傷、能預測化療療效的生物標志物已迫在眉睫。

MACC1基因編碼的蛋白質(zhì)包含852個氨基酸，可通過調(diào)控信號轉(zhuǎn)導發(fā)揮作用，激活信號通路，促進腫瘤血管生成、誘導血管內(nèi)皮生長因子，促進腫瘤細胞轉(zhuǎn)移[10-11]；MACC1可調(diào)控β-鏈蛋白等信號轉(zhuǎn)導通路發(fā)揮作用[12-14]。在本研究中，胃癌組織中的MACC1蛋白陽性表達率高于正常胃黏膜組織中的表達率，說明MACC1蛋白能有助于胃癌的診斷，MACC1的異常激活導致腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及異常增生，也可以通過上調(diào)β-鏈蛋白的表達發(fā)揮作用，從而抑制MACC1表達，使癌細胞凋亡，抑制癌細胞增殖[15-16]。Nishikawa等[17]報道在胃癌中MACC1的表達水平高于正常的組織，發(fā)揮促腫瘤細胞轉(zhuǎn)移，控細胞周期的作用。

阿帕替尼是受體酪氨酸激酶抑制劑，是目前世界上第一種小分子抗血管生成靶向藥物[18]，其用于晚期胃癌標準化療失敗后被證明是安全有效的，可有效抑制腫瘤組織新血管的生成，是晚期胃癌患者三線及三線以上的臨床治療藥物[19-20]。本研究中，患者在口服阿帕替尼3個療程之后，疾病對照組MACC1蛋白含量顯著大于疾病觀察組，化療后，疾病對照組MACC1蛋白含量下降不明顯。說明阿帕替尼化療效果良好，MACC1越低化療效果越好，并且在臨床應用中，阿帕替尼不良反應少[21]。本研究中疾病觀察組的無進展生存時間和總生存時間均顯著大于疾病對照組，說明阿帕替尼可延長晚期胃癌患者的生存時間。這與周自華等[22]的研究一致。

綜上，MACC1有助于胃癌的診斷，且MACC1越低阿帕替尼的化療效果越好。