王新鋒 郭宏強(qiáng) 張燕平 徐海元

肺癌屬于1種惡性腫瘤，近年來，其發(fā)病率日益提升?，F(xiàn)階段，臨床普遍認(rèn)為，機(jī)體免疫功能狀態(tài)對肺癌的發(fā)展造成了直接而深刻的影響[1]。流式細(xì)胞術(shù)能夠?qū)α馨图?xì)胞亞群分類進(jìn)行直接檢測，從而對機(jī)體免疫狀態(tài)進(jìn)行分析，將有效依據(jù)提供給臨床對患者病情的判斷及療效的評估，因此在臨床得到了廣泛應(yīng)用[2]。本研究對40例非小細(xì)胞肺癌患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，研究了多西他賽治療非小細(xì)胞肺癌前后患者T淋巴細(xì)胞亞群的變化，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

對我院2015年1月至2017年1月收治的40例非小細(xì)胞肺癌患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均經(jīng)病理檢查確診為非小細(xì)胞肺癌，均接受多西他賽化療治療至少4個周期；排除標(biāo)準(zhǔn)：將接受過抗腫瘤治療、有心理障礙、精神疾患、缺乏清晰的意識等患者及妊娠、哺乳期婦女排除在外。男性患者26例，女性14例，年齡38～74歲，平均(53.4±8.4)歲。病理類型：28例為腺癌，12例為鱗狀細(xì)胞癌；臨床療效：32例疾病控制(完全緩解+部分緩解+疾病穩(wěn)定)，8例疾病進(jìn)展。將這些患者作為肺癌組，另選取我院同期接收的40例健康體檢人員為對照組，其中男性25例，女性15例，年齡39～74歲，平均(54.2±8.3)歲。2組人員的一般資料比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 肺癌組于化療前2 d、化療后20 d采集患者2 ml外周靜脈血，肝素抗凝。對照組于入院時采集2 ml靜脈血，肝素抗凝，當(dāng)天送檢。

1.2.2 標(biāo)本處理 將100 μl肝素抗凝外周血取出來，將20 μl CD3+/CD16+56+FITC/PE雙色標(biāo)記、CD4+/CD8+/CD3+FITC/PE/PC5三色標(biāo)記抗體加入其中，室溫下進(jìn)行15 min的避光和10 min的裂解，裂解過程中將Immunoprep Reagent System 細(xì)胞裂解液充分利用起來。

1.2.3 2組T細(xì)胞亞群檢測 采用Epics-XL流式細(xì)胞儀，應(yīng)用Beckman Coulter 原裝試劑盒，運用直接免疫熒光標(biāo)記全血溶血法對2組人員的T淋巴細(xì)胞總體(CD3+)、輔助/誘導(dǎo)T細(xì)胞(CD4+)、抑制/殺傷T細(xì)胞(CD8+)、NK細(xì)胞(CD3+/CD16+56+)等淋巴細(xì)胞及其亞群進(jìn)行檢測，將各陽性細(xì)胞分別計算出來。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 肺癌組患者化療前后與對照組人員的T淋巴細(xì)胞亞群比較

肺癌組患者化療前、化療后的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells均顯著低于對照組(P<0.05)，2組人員的CD3+CD8+之間的差異不顯著(P>0.05)。肺癌組化療后的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells均顯著高于化療前(P<0.05)，見表1、2。

表1 肺癌組患者化療前與對照組人員的T淋巴細(xì)胞亞群比較

表2 肺癌組患者化療后與對照組人員的T淋巴細(xì)胞亞群比較

2.2 肺癌組不同臨床療效患者與對照組人員的T淋巴細(xì)胞亞群比較

肺癌組疾病控制患者的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells均顯著高于高于疾病進(jìn)展組(P<0.05)，疾病進(jìn)展患者的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells均顯著均顯著低于對照組(P<0.05)，但疾病控制患者與對照組人員的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells之間的差異均不顯著(P>0.05)，2組人員的CD3+CD8+之間的差異不顯著(P>0.05)，見表3、4。

表3 肺癌組疾病進(jìn)展患者與對照組人員的T淋巴細(xì)胞亞群比較

表4 肺癌組疾病控制患者與對照組人員的T淋巴細(xì)胞亞群比較

3 討論

近年來，我國肺癌的發(fā)病率日益提升，現(xiàn)階段，臨床普遍認(rèn)為，多因素、多階段參與了肺癌的發(fā)生過程[3]。近年來，臨床通過不斷深入研究腫瘤免疫學(xué)，發(fā)現(xiàn)在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展過程中，淋巴細(xì)胞的免疫功能發(fā)揮著極為重要的作用，機(jī)體免疫功能在T細(xì)胞亞群比例發(fā)生變化的情況下會紊亂[4]。目前，化療仍然是臨床治療非小細(xì)胞肺癌的治療方法，雖然化療能夠?qū)⒛[瘤細(xì)胞殺傷，但是也會對正常細(xì)胞造成損害，從而引發(fā)嚴(yán)重毒副作用[5]。

在抗腫瘤免疫中，T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞占有極為重要的地位，近年來，臨床日益重視了腫瘤與其比例失調(diào)的關(guān)系[6]。機(jī)體免疫功能隨著CD3+T淋巴細(xì)胞的降低而降低，其將總T細(xì)胞水平反映了出來[7-9]；免疫反應(yīng)誘導(dǎo)及效應(yīng)隨著CD4+T淋巴細(xì)胞(T輔助細(xì)胞Th)的降低而降低，進(jìn)而降低特異抗腫瘤效應(yīng)[10-12]；CD4+細(xì)胞及B細(xì)胞功能受到CD8+T淋巴細(xì)胞(細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞Tc)的抑制，進(jìn)而對細(xì)胞免疫反應(yīng)及抗體形成進(jìn)行抑制[13-15]；為了對穩(wěn)定的機(jī)體細(xì)胞免疫功能進(jìn)行維持，應(yīng)該對CD4+/CD8+的動態(tài)平衡進(jìn)行保持，機(jī)體T細(xì)胞亞群在其降低的情況下失衡，進(jìn)而降低機(jī)體免疫功能，能夠?qū)⒂行б罁?jù)提供給臨床診斷、治療疾病及評估疾病預(yù)后的工作[16]。NK細(xì)胞(自然殺傷細(xì)胞)能夠?qū)⒁恍┎《靖腥炯?xì)胞或腫瘤細(xì)胞直接殺傷，機(jī)體免疫功能隨著其數(shù)量的減少而降低[17]。相關(guān)醫(yī)學(xué)研究表明，非小細(xì)胞肺癌患者機(jī)體免疫功能變化的一個重要表現(xiàn)就是外周血T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞變化。本研究結(jié)果表明，肺癌組患者化療前、化療后的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells均顯著低于對照組(P<0.05)，而化療后的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells均顯著高于化療前(P<0.05)；肺癌組疾病控制患者的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells均顯著高于高于疾病進(jìn)展組(P<0.05)，疾病進(jìn)展患者的CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、NK cells均顯著均顯著低于對照組(P<0.05)，和相關(guān)醫(yī)學(xué)研究結(jié)果一致。

總之，多西他賽治療非小細(xì)胞肺癌前后患者T淋巴細(xì)胞亞群的變化能夠?qū)ζ浏熜нM(jìn)行有效評估，值得臨床充分重視。