何旭棟李思鈺季慧華陳華才
(1.中國計量大學(xué)光學(xué)與電子科技學(xué)院,浙江 杭州 310018;2.杭州益昊農(nóng)業(yè)科技有限公司,浙江 杭州 310018)
在外界光照的刺激下,昆蟲會做出定向行動反應(yīng),其中靠近光源的行動稱為正趨光性,背離光源的行動稱為負趨光性[1]。研究昆蟲對不同光波的趨性,將特征光波用于農(nóng)業(yè)害蟲的防治,對實現(xiàn)誘集害蟲、趨避益蟲的目的具有非常重要的作用,可以更好地為開展綠色防控研究和應(yīng)用提供參考和借鑒。
國內(nèi)外對昆蟲趨光性相關(guān)實驗報道有很多,相關(guān)昆蟲行為實驗都是采用自制的實驗裝置,沒有統(tǒng)一規(guī)格和要求。林明江等采用直管實驗裝置,利用暗室/亮室的對比設(shè)計,研究甘蔗螟蟲趨光性反應(yīng),得到誘捕不同種甘蔗螟蟲最有效的波長[2]。還有許多研究者采用暗室/亮室的設(shè)計,如郭健玲等利用這個方法研究3種扁谷盜對不同波長光趨性,裝置將腔體分為3個部分:棲息反應(yīng)室、趨光反應(yīng)室、避光反應(yīng)室,每次采用一種波長進行實驗,得到誘捕效果最好的波長[3]。Jun-Hwan Park等人利用自制Y型迷宮腔探究米象蟲的趨光性,將米象蟲放置在連接點,兩端分別用對照光源和實驗光源進行照射,實驗得出藍光(84.3%)對米象蟲最有吸引力[4]。與此較為相似的是Min-Gi Kim等人利用L型實驗裝置,將麥蛾成蟲投放到裝置折點,同樣在兩端設(shè)置對照光源和實驗光源,實驗結(jié)果表明365nm波長的光源對麥蛾成蟲具有最好的誘捕效果[5]。以上這些實驗都是單因素實驗,實驗昆蟲只能在實驗光源和對照光源二者中作出選擇。關(guān)于多種波長同時實驗的裝置,丁巖欽等曾在1974年利用自制的裝置研究棉鈴蟲和煙青蟲成蟲的趨光性反應(yīng),該裝置利用波長選擇器得到不同波長,4個通道的設(shè)計一次性最多可以比較4種波長,最終得到棉鈴蟲和煙青蟲對333nm的光源最敏感[6]。Mazza等利用相似的裝置得到薊馬的趨性峰在紫外315nm處[7]。
以上雙通道(單因素)及四通道的實驗裝置存在的問題是,供試?yán)ハx必須面對被動的選擇壓力,容易引起實驗的系統(tǒng)誤差。為此設(shè)計一種多通道(多光譜)昆蟲趨光性行為實驗裝置,讓供試?yán)ハx在多通道中對不同波長的光源作出自由的選擇,避免昆蟲趨光性行為受到被動選擇壓力的影響,并以此裝置進行了庫蚊的趨光性行為研究。
庫蚊屬蚊科庫蚊亞科,分布極其廣泛,是蚊科的第2大屬,已知800余種和亞種。庫蚊是傳播多種疾病的重要媒介,流行性乙型腦炎以及多種馬腦脊髓炎等均是由庫蚊傳播的。蚊蟲的趨光性實驗?zāi)壳昂苌儆腥搜芯?,李思鈺曾?jīng)對蚊蟲的趨光性進行探究性實驗[8]。
多光譜誘蟲實驗裝置主體由3個部分組成,包括昆蟲投放室、誘蟲通道和控制電路,裝置結(jié)構(gòu)如圖1所示。圖2是裝置的結(jié)構(gòu)拆分圖。其中昆蟲投放室主要由圓柱形腔體和頂部的昆蟲釋放口組成,誘蟲通道分為3部分,分別是連接管、昆蟲收集器和單色LED誘蟲光源;昆蟲投放室的主要作用是用于投放實驗昆蟲,LED誘蟲光源通過連接管與投放室腔壁上的圓形開口相連。昆蟲收集器由電機葉輪和昆蟲收集袋構(gòu)成,用于捕獲實驗昆蟲,其通過T型連接管與誘蟲通道連接。
圖1 多光譜誘蟲實驗裝置示意圖
圖2 多光譜誘蟲實驗裝置結(jié)構(gòu)拆分圖1.昆蟲投放室;2.誘蟲通道;3.控制電路;4.頂蓋;5.昆蟲釋放口;6.懸空隔離條;7.連接管;8.昆蟲收集器;9.單色LED誘蟲光源;10.T型三通連接管;11.電機葉輪;12.昆蟲收集袋
昆蟲投放室為一圓柱形腔體,內(nèi)壁敷貼黑色燈芯絨布料。LED光源以及昆蟲收集器通過連接管與腔體上的圓形開口相連接。LED光源發(fā)出特定波長的光,通過連接管照進昆蟲投放室,昆蟲投放室內(nèi)的昆蟲感受到不同波長的光源,選擇進入其最敏感的光源的連接管。當(dāng)昆蟲靠近光源時,被電機葉輪產(chǎn)生的倒吸式氣流吸入昆蟲收集袋,風(fēng)干致死。
圖3 裝置工作原理圖
1.2.1 光譜范圍廣
多光譜誘蟲實驗裝置一共設(shè)有16條單色LED通道,可以自由組合光譜范圍。
1.2.2 多光譜同時工作,效率高
與傳統(tǒng)的測試?yán)ハx趨光性實驗裝置最大的不同在于其實現(xiàn)了多光譜同時工作。每個通道內(nèi)的光源都是獨立互不影響的,由于實驗昆蟲均處于同一個昆蟲投放室中,保證了所處的環(huán)境都相同,避免了環(huán)境因素對實驗結(jié)果的影響,這是傳統(tǒng)實驗裝置無法實現(xiàn)的。同時,光譜同時工作的方式可以縮短實驗時間,提高實驗效率。
1.2.3 結(jié)果精確
為了降低裝置本身可能帶來的誤差,對多個部分都進行了處理,如,昆蟲投放室內(nèi)壁貼有黑色燈芯絨,可以減少各個通道的光線反射避免相互干擾;昆蟲收集袋的鏤空設(shè)計,保證在電機葉輪工作時產(chǎn)生的負壓不會對昆蟲造成影響,使影響昆蟲趨向性的因素只有光源波長。
1.2.4 實驗參數(shù)可調(diào),多樣化
多光譜誘蟲實驗裝置不僅可以探究蚊蟲對各波長光源的趨向性反應(yīng),還可以通過改變連接管的長度進一步探究不同光強、工作距離對昆蟲趨光性的影響。
用于實驗的庫蚊為杭州種群,為了保證庫蚊的活力,實驗前需要將其培養(yǎng)于蚊籠中,并定期提供糖水。此外,蚊籠內(nèi)的環(huán)境應(yīng)調(diào)到適宜庫蚊生存的條件,溫度控制在25℃左右,相對濕度RH保持在70%。從蚊籠中選取450只具有活力的庫蚊進行實驗。
實驗采用前述裝置進行,選取16條通道參與實驗,且設(shè)置每條通道的工作長度為60cm。實驗開始前利用光譜儀測得參與實驗的光源的峰值波長分別為365nm、380nm、390nm、405nm、420nm、430nm、450nm、460nm、520nm、580nm、590nm、610nm、660nm、730nm,最后一組采用白光光源進行對照,利用功率計測得各光源的額定功率均在2W左右。
實驗地點選在暗室,實驗時間為20∶00—次日8∶00,共12h,為了避免庫蚊對環(huán)境不適應(yīng)而死亡,將室溫控制在25℃左右,濕度控制為70%。實驗分3組進行,具體實驗方法如下:
選定實驗參數(shù),選取150只大小相近,具有活力的庫蚊作為實驗對象,誘蟲通道的長度統(tǒng)一定為60cm,實驗時間定為20∶00—次日8∶00,實驗室內(nèi)溫度為25℃,相對濕度RH為70%。
打開裝置頂部的昆蟲釋放口,將選取好的庫蚊投入昆蟲投放室中,關(guān)閉釋放口。接通電源前,先對用于實驗的庫蚊進行1h的暗處理。
暗處理結(jié)束后,接通裝置電源,各波長光源發(fā)光,電機葉輪運轉(zhuǎn),實驗開始。
次日8∶00,關(guān)閉裝置電源,統(tǒng)計并記錄各波長光源對應(yīng)的昆蟲收集袋中的庫蚊數(shù)量,并清理昆蟲收集器。
打開裝置頂蓋,拆下連接管,清理未進入昆蟲收集器中的庫蚊,并記錄數(shù)據(jù),清理結(jié)束后重新連接裝置準(zhǔn)備進行下一組實驗。
光源對庫蚊誘集率通過下式計算:
式中,Q為光源的蚊蟲誘集率;T為實驗組光源誘集到的蚊蟲的數(shù)量;C為用于實驗的蚊蟲的總數(shù)量。
通過專業(yè)統(tǒng)計軟件SPSS對實驗結(jié)果進行單因素方差分析,經(jīng)過Duncan法的多重分析后,得出各波長光源的平均誘集率和標(biāo)準(zhǔn)差及其顯著性差異。
圖4 庫蚊趨光性行為現(xiàn)場實驗
庫蚊對不同波長光源的趨光率如表1所示。
表1 不同波長LED光源對庫蚊的誘集率
可以看出庫蚊對不同光源的趨向性存在一定的差異。中心波長為365nm、405nm、420nm以及450nm的LED光源誘集到的蚊蟲數(shù)量顯著多于其它光源,特別是365nm、420nm的光源對庫蚊的誘集數(shù)量極顯著高于其它光源,其次是405nm和450nm的光源,誘集的蚊蟲數(shù)量都顯著高于對照組白光光源。中心波長為520nm、580nm、590nm和850nm的LED光源對庫蚊并無誘捕作用。
通過對庫蚊對不同光波長的趨向性的實驗,得到以下結(jié)論:在環(huán)境溫度為25℃,相對濕度為70%的暗室條件下,庫蚊對365~460nm波段的紫外和藍紫光光源的趨向性明顯;在365~460nm這個波長范圍內(nèi),庫蚊對365nm、405nm、420nm和450nm的趨向性相對突出,其中光源波長為365nm和420nm,誘蚊效果最顯著,誘集率均在23%左右,405nm和450nm波長的光源庫蚊誘集率均在10%以上,盡管誘集效果沒有365nm和420nm突出,但是仍優(yōu)于其它光源波段。分析實驗得出的數(shù)據(jù),并結(jié)合對照組白光光源,可以發(fā)現(xiàn),除了紫外和藍紫光,庫蚊對其它光源的趨向性都很弱,誘集率均不足2%。庫蚊對黃光和紅外光均無趨向性,進一步分析可知蚊蟲復(fù)眼無法識別紅外光波段,對830nm的光源不會存在趨向性,而蚊蟲是可以識別黃光的,由此推斷庫蚊對其具有趨避性,可以做出進一步的探究。