田海蓉，夏永波，張人俊*

(1. 貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽(yáng)550008； 2. 貴州省龍里縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州龍里551200)

冠狀病毒屬是1個(gè)大型病毒家族，自然宿主范圍很廣，可感染人、豬、牛、貓、狗、鼠、禽類等脊椎動(dòng)物，是引起人和動(dòng)物呼吸道、消化道、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等的重要病原。犬冠狀病毒(Canine coronavirus，CCV)是冠狀病毒的1個(gè)種，屬于套式病毒目(Nidovirales)、冠狀病毒科(Coronaviridae)、冠狀病毒屬(Coronaviurs)，冠狀病毒Ⅰ群[1]。CCV已確定有2個(gè)基因型，即CCV-Ⅰ和 CCV-Ⅱ[2]。犬冠狀病毒病是由CCV感染犬引起的1種高度接觸性傳染病，以急性胃腸炎為主要癥狀，病死率較低。

1 病原特點(diǎn)

CCV的直徑為60～200 nm，呈球形，帶囊膜，核衣殼呈絲狀螺旋對(duì)稱；病毒粒子的表面具有冠狀病毒特有的“冠狀”突起，呈放射狀，長(zhǎng)12～24 nm，末端呈球棒狀，寬約10 nm，排列有序，間隔較寬，均勻分布于整個(gè)病毒粒子表面；病毒基因組是不分節(jié)段的單鏈正股RNA，大小在27～32 kb之間[3]。CCV基因在病毒自身RNA聚合酶的存在下以先導(dǎo)引物轉(zhuǎn)錄機(jī)制進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，不同的病毒基因組和亞基因組翻譯產(chǎn)生除病毒依賴的RNA聚合酶以外，還產(chǎn)生其他病毒的結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白，其中有相對(duì)比較保守、參與病毒核衣殼形成、介導(dǎo)宿主細(xì)胞免疫的核衣殼蛋白(N)；在病毒出芽、組裝和成熟中起重要作用的膜蛋白(M)；能刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體，且易變異的纖突蛋白(S)，S蛋白決定病毒的血清型和感染力，同時(shí)通過(guò)識(shí)別與病毒宿主細(xì)胞受體相互作用決定病毒感染的宿主范圍[4]。CCV對(duì)熱、紫外線、脂溶劑、非離子去污劑、甲醛和氧化劑等一般的化學(xué)藥品均敏感，對(duì)酸穩(wěn)定，在-70 ℃或凍干后4 ℃下可保存數(shù)年，在糞便中可存活6～9天，污染物在水中可保持?jǐn)?shù)天的傳染性。

2 流行病學(xué)

CCV由Binn等在1971年首先從腹瀉的德國(guó)軍犬中分離到，目前該病已在世界范圍內(nèi)廣泛流行。1985年徐漢坤等首次報(bào)道本病在我國(guó)流行，后來(lái)相繼有CCV分離鑒定的報(bào)道[5]。2008年，張晉在北京地區(qū)進(jìn)行犬病流行情況調(diào)查，CCV感染占41.42%(70/169)，其中并發(fā)有2種疾病感染的占13.2%(47/356)[5，6]。CCV感染有一定的季節(jié)性，據(jù)北京地區(qū)調(diào)查統(tǒng)計(jì)，以1月份發(fā)病最高(42.86%)，3月份次之(27.14%)，其他月份都相對(duì)較少[6]；在山東地區(qū)春初、秋末和冬季CCV檢出率為22.2%～81.8%，而夏季檢出率為10%～23.5%[7]。傳播途徑主要是經(jīng)呼吸道和消化道傳染，大多通過(guò)直接接觸而感染發(fā)病。CCV傳染力強(qiáng)，傳播快，數(shù)日內(nèi)常成窩暴發(fā)；臨床上以犬嚴(yán)重脫水、嘔吐、腹瀉和血便為主要特征，病死率較低，但與其他傳染病混合感染時(shí)死亡率升高，對(duì)幼犬危害嚴(yán)重[8]。據(jù)山東地區(qū)調(diào)查統(tǒng)計(jì)，1歲以內(nèi)犬CCV檢出率為25.2%～72.4%；2～4月齡的犬對(duì)該病最易感，CCV檢出率平均為72.4%；大于 1歲的犬CCV檢出率低于13.4%，無(wú)種屬特異性，任何品種的犬均易感[7]。

3 臨床癥狀

臨床上一般都是幼犬先發(fā)病，然后波及其他年齡的犬。病犬精神沉郁，喜臥，厭食，鼻鏡干裂，但體溫一般不高。常出現(xiàn)輕重不一的胃腸炎，病初嘔吐持續(xù)數(shù)天，至出現(xiàn)腹瀉后嘔吐減輕或停止。糞便呈糊狀、半糊狀乃至水樣，橙色或綠色，其中常含有黏液和血液。經(jīng)藥物治療病犬臨床癥狀消失后1個(gè)月內(nèi)可能會(huì)出現(xiàn)復(fù)發(fā)，控制不及時(shí)會(huì)造成死亡，幼犬的發(fā)病率和病死率明顯高于成年犬。有的成年犬呈隱性感染，不表現(xiàn)臨床癥狀，耐過(guò)會(huì)自愈，但會(huì)排毒傳染給幼犬使其發(fā)病。

4 診斷方法

CCV感染和其他病原體引起的腸炎在臨床上難以區(qū)別，如與輪狀病毒感染就特別相似，且常與輪狀病毒、犬細(xì)小病毒等混合感染，臨床無(wú)法進(jìn)行鑒別診斷，必須通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)進(jìn)行確診。目前檢測(cè)CCV的方法主要有病毒分離培養(yǎng)、電鏡觀察、RT-PCR、核酸探針和間接ELISA等。間接ELISA是檢測(cè)CCV的主要血清學(xué)方法，比較靈敏、快速；病毒核酸檢測(cè)可用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法，特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好[9]。每種檢測(cè)方法各有利弊，為了提高CCV診斷結(jié)果的精確性與準(zhǔn)確性，應(yīng)結(jié)合臨床實(shí)際情況進(jìn)行至少2種方法的平行檢測(cè)。近年來(lái)，隨著分子免疫診斷技術(shù)與新型材料研發(fā)技術(shù)的迅速發(fā)展，新的檢測(cè)方法應(yīng)運(yùn)而生，納米金、核酸探針、芯片技術(shù)及納米生物傳感器等技術(shù)更加敏感、便捷、高效且都具有制備試劑盒的可能性，在CCV診斷上更具有簡(jiǎn)便性和普適性，大大提高了診斷效率[10]。當(dāng)多種疫病同時(shí)混合感染時(shí)，可采用多重PCR檢測(cè)方法，同時(shí)對(duì)病毒含量較低的病原也能夠達(dá)到快速準(zhǔn)確的檢測(cè)[11]。

5 防治措施

堅(jiān)持“預(yù)防為主、加強(qiáng)飼養(yǎng)管理”的原則，采取檢測(cè)、消毒、免疫、無(wú)害化處理等綜合防控措施，能有效控制CCV的發(fā)生與流行。對(duì)于高發(fā)病疫區(qū)，疫苗免疫接種是預(yù)防本病的有效措施。無(wú)論是CCV基因疫苗或弱毒苗單獨(dú)免疫還是聯(lián)合免疫，均可引起特異性體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答，且聯(lián)合免疫能誘導(dǎo)更強(qiáng)的免疫應(yīng)答水平[12]。現(xiàn)市面上寵物多使用多聯(lián)疫苗進(jìn)行預(yù)防接種。發(fā)現(xiàn)病犬應(yīng)及時(shí)隔離，防止疾病傳播和擴(kuò)散。用生石灰、1︰30漂白粉溶液、0.2%～1%甲醛溶液等有效消毒劑徹底消毒飼養(yǎng)場(chǎng)地和圈舍，避免健康犬接觸病犬污染物，飼喂干凈飲水。犬舍應(yīng)每天打掃，清除糞便。每周用消毒液消毒犬舍，消毒劑交替使用，以防止病原產(chǎn)生耐藥性。病死犬及時(shí)進(jìn)行無(wú)害化處理，焚燒或深埋，禁止解剖和食用。普通腸型CCV患犬一般采取對(duì)癥治療和支持療法相結(jié)合的治療方案：抗毒消炎，止吐止瀉，防止脫水，糾正酸中毒，加強(qiáng)護(hù)理，增強(qiáng)抗病力。嚴(yán)重者或有條件的注射CCV高免血清或單克隆抗體，早期使用可提高療效[2]。高免血清與抗菌消炎藥同時(shí)使用，可提高治療效果。病犬常因脫水而死，因此補(bǔ)液是治療本病的主要措施。補(bǔ)液的同時(shí)靜脈注射抗菌消炎藥控制繼發(fā)感染，常用抗菌類藥物有青霉素、慶大霉素、頭孢噻肟，按說(shuō)明書用量連續(xù)使用3天，每天1次。注意抗菌素不要長(zhǎng)時(shí)間使用，以防腸道正常菌群失調(diào)，反而延緩腸道消化功能的恢復(fù)。嘔吐嚴(yán)重者可肌注愛茂爾、雷尼替丁，腹瀉嚴(yán)重可用瀉痢停、藥用炭、維迪康等，按說(shuō)明書用量。加強(qiáng)護(hù)理，注意對(duì)病犬保暖，在發(fā)病后嚴(yán)格控制飲食，禁食禁水，通過(guò)輸液等方式防止脫水，因此時(shí)病犬腸胃功能紊亂和減弱，喂食只能增加消化負(fù)擔(dān)，導(dǎo)致病情嚴(yán)重。當(dāng)病犬在48小時(shí)內(nèi)不再嘔吐和腹瀉，可試探性喂食易消化食物，如泡軟的狗糧[13]。