5月25日,華中農(nóng)大油菜團隊楊光圣和洪登峰教授課題組在《The Plant Journal》雜志發(fā)表題為“Molecular mechanisms underpinning the multiallelic inheritance ofMS5in Brassica napus”的研究論文,揭示了一個在油菜雜交種制種中被廣泛應(yīng)用的MS5基因調(diào)控的細胞核雄性不育系統(tǒng)的復(fù)等位遺傳機制。
細胞核雄性不育是油菜雜種優(yōu)勢利用的重要途徑之一,也是開展輪回選擇的重要橋梁性狀。其中,Yi3A類型的細胞核雄性不育系統(tǒng)因其育性受到同一基因座位的3個復(fù)等位基因MS5a(恢復(fù)基因)、MS5b(不育基因)和MS5c(臨?;颍┛刂?,且3者之間具有MS5a>MS5b>MS5c的顯隱性關(guān)系,可方便實現(xiàn)油菜的“三系化”制種。2016年,該課題組成功克隆了MS5位點的3個復(fù)等位基因,并和中科院遺傳所程祝寬團隊合作解析了不育系中減數(shù)分裂進程異常的細胞學(xué)機制,但復(fù)等位遺傳背后的分子機制卻一直不為人所知。
本研究中,通過CRISPR/Cas9基因編輯證明恢復(fù)基因MS5a和臨保基因MS5c都是油菜育性維持所必需的,基因缺失后表現(xiàn)出與不育系相同的減數(shù)分裂異常表型。MS5a和MS5c基因在恢復(fù)或保持MS5b不育方面功能出現(xiàn)分化的主要原因是它們編碼區(qū)序列的差異,其次為啟動子區(qū)的不同造成的表達量差異。雄性不育基因MS5b編碼一個嵌合蛋白,包含完整的coiled coil(CC)結(jié)構(gòu)域,但缺失了整個MS5superfamily domain(MSD)。MS5a或MS5c蛋白可以通過CC結(jié)構(gòu)域形成同源二聚體,MS5b則能通過殘留的CC結(jié)構(gòu)域與MS5正常功能蛋白競爭性結(jié)合,形成無功能的二聚體。由于MS5b和MS5c表達量幾乎相同,在MS5b、MS5c雜合材料中,無功能的異源二聚體占優(yōu)勢,從而使得油菜減數(shù)分裂異常,遺傳上表現(xiàn)為MS5b對MS5c的顯性負效應(yīng);而在MS5a、MS5b雜合單株中,由于MS5a的高表達,大劑量MS5a蛋白的積累保證了減數(shù)分裂的正常進行。這一結(jié)果為遺傳學(xué)上完全顯隱性關(guān)系的復(fù)等位遺傳現(xiàn)象提供了一個新的分子機制解釋;同時,MS5復(fù)等位遺傳分子機制的解析,也為MS5調(diào)控的雄性不育在油菜及蕓薹屬其他物種中的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。