蔡婷 鐘美春

摘 要：本文基于對監(jiān)控潔凈區(qū)操作環(huán)境、檢驗人員素質(zhì)與儀器設(shè)備檢測、培養(yǎng)基與標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存等方面的分析，從室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)控兩個內(nèi)容闡釋藥品微生物檢驗實(shí)驗室質(zhì)控的因素及策略。

關(guān)鍵詞：藥品;微生物檢驗;實(shí)驗室質(zhì)控;策略分析

DOI：10.12249/j.issn.1005-4669.2020.25.321

隨著微生物檢測與控制技術(shù)迅猛發(fā)展，危害分析與關(guān)鍵控制點(diǎn)、微生物風(fēng)險評估等微生物控制技術(shù)為微生物檢驗方法的科學(xué)性提供了更高的要求。而實(shí)驗室的質(zhì)量控制是保證檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠的一個重要手段，是實(shí)驗室自我控制質(zhì)量的常規(guī)程序，它能反映檢測質(zhì)量的穩(wěn)定性，及時發(fā)現(xiàn)檢測分析中的異常情況，隨時采取相應(yīng)的校正措施，所以實(shí)驗室必須具有嚴(yán)格的質(zhì)量控制管理以確保實(shí)驗結(jié)果出具的每個檢驗數(shù)據(jù)都科學(xué)、公正、準(zhǔn)確。在實(shí)驗室質(zhì)量控制工作中，建立完善的實(shí)驗室質(zhì)量管理體系，加強(qiáng)環(huán)境設(shè)備、實(shí)驗室關(guān)鍵消耗品、人員、檢驗方法、實(shí)驗操作過程等的全面質(zhì)量管理，確保實(shí)驗結(jié)果的準(zhǔn)確

可靠。

1 實(shí)驗室室內(nèi)質(zhì)量控制

1.1 監(jiān)控潔凈區(qū)操作環(huán)境

實(shí)驗環(huán)境應(yīng)符合無菌檢查/ 微生物限度檢查的要求，無論是研發(fā)或者生產(chǎn)過程中，均需定期監(jiān)測操作臺以及潔凈區(qū)的操作環(huán)境，從而保證藥品檢驗結(jié)果的權(quán)威性。無菌檢驗需嚴(yán)格把控在B級背景A級層流環(huán)境下進(jìn)行，抑或采取無菌隔離器實(shí)施檢驗。為避免周圍環(huán)境對藥品造成污染并防止菌種間交叉污染，必須嚴(yán)格規(guī)范微生物檢測實(shí)驗室的布局設(shè)計，并遵守實(shí)驗室操作規(guī)范及消毒規(guī)程。布局方面，除了各操作室從空間上進(jìn)行分離之外，需維持陽性室與相鄰房間的負(fù)壓狀態(tài)并保持合理的壓差梯度，另外潔凈區(qū)建筑材料的安全性也是在考慮的范圍之內(nèi)。就潔凈區(qū)的清潔和消毒而言，需要嚴(yán)格遵守實(shí)驗室消毒規(guī)范，并在日常使用過程中對潔凈環(huán)境、表面微生物進(jìn)行監(jiān)測，必須確保清潔用消毒劑在保質(zhì)期內(nèi)并監(jiān)測消毒效果，確保藥品微生物檢測操作前后，潔凈區(qū)均經(jīng)過徹底的消毒處理。一旦潔凈區(qū)監(jiān)測結(jié)果超標(biāo)或者嚴(yán)重超標(biāo)時應(yīng)積極采取措施，應(yīng)立即對異常的微生物菌落采取鑒定措施，鑒定是否產(chǎn)生異常微生物菌種，并分析來源及數(shù)據(jù)。小概率性和不均一性是微生物污染發(fā)生的特點(diǎn)之一，所以潔凈環(huán)境控制并不能完全防止污染的發(fā)生，僅能夠有效降低污染風(fēng)險。因此有條件的進(jìn)行復(fù)試，強(qiáng)化檢出菌的鑒定與溯源，排除外部環(huán)境因素對結(jié)果的影響尤為重要。

1.2 檢驗人員素質(zhì)與儀器設(shè)備檢測

隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，各種新型的儀器不斷出現(xiàn)，儀器在微生物檢驗工作中的重要性越來越得到體現(xiàn)。檢測工作要使用計量檢定合格的儀器設(shè)備。但在實(shí)際工作中可能出現(xiàn)計量部門無法進(jìn)行計量儀器，如全自動微生物生化鑒定分析儀。對計量部門當(dāng)前無法計量的儀器，可以采用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行檢測分析判定其準(zhǔn)確性，如全自動微生物生化鑒定分析儀可以采用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行驗證確認(rèn)。壓力滅菌器是培養(yǎng)基除菌的重要設(shè)備，也是影響檢驗結(jié)果、保證生物安全的重要設(shè)備。但高壓滅菌器性能不佳或使用不當(dāng)會對結(jié)果造成誤差，如壓力滅菌器升溫緩慢會導(dǎo)致培養(yǎng)基過熱造成過度滅菌，破壞培養(yǎng)基的促生長能力。人員素質(zhì)是微生物檢驗質(zhì)量第一位的影響因素。從事微生物檢驗人員應(yīng)具備微生物相關(guān)的基礎(chǔ)理論知識和試驗技能，應(yīng)具有醫(yī)藥學(xué)相關(guān)的理論知識，并不斷接受新理論、新方法的技能培訓(xùn)。由于微生物檢驗工作的特殊性，實(shí)驗人員應(yīng)經(jīng)過實(shí)驗室生物安全方面的培訓(xùn)。對特定崗位人員從事新工作時需要進(jìn)行考核和授權(quán)，以確認(rèn)檢驗人員能夠適應(yīng)新的崗位職責(zé)。同時，應(yīng)定期組織開展人員比對、能力驗證、內(nèi)審及使用標(biāo)準(zhǔn)菌株等以提高檢驗人員的綜合素質(zhì)。對于人員的培訓(xùn)、考核等均應(yīng)記錄并歸檔。

1.3 培養(yǎng)基與標(biāo)準(zhǔn)菌株的保存

培養(yǎng)基為微生物提供生存、生長所需的養(yǎng)料，是微生物實(shí)驗的物質(zhì)基礎(chǔ)，合適的培養(yǎng)基利于提高檢驗的精確性，培養(yǎng)基驗收前需進(jìn)行適用性檢查，采購培養(yǎng)基前應(yīng)嚴(yán)格審核供應(yīng)商資質(zhì)，對于確定的培養(yǎng)基應(yīng)減少頻繁更換，廠家要選擇通過國家質(zhì)量認(rèn)證體系的，并要提供相關(guān)質(zhì)量證書，一旦發(fā)現(xiàn)問題，即驗收不合格立即棄用。嚴(yán)格按照科學(xué)的流程進(jìn)行培養(yǎng)基的制備并予之記錄。培養(yǎng)基應(yīng)按說明書的要求進(jìn)行規(guī)范的滅菌和儲存，并按實(shí)驗室儲存條件對培養(yǎng)基的保存期進(jìn)行確認(rèn)。特定的培養(yǎng)基應(yīng)采取特定的措施進(jìn)行處理，確保每批培養(yǎng)基滅菌后在25℃條件下pH達(dá)到規(guī)定，還要關(guān)注培養(yǎng)基可能的殘留。培養(yǎng)基使用前需進(jìn)行無菌性等實(shí)驗，培養(yǎng)基配置完成后及時進(jìn)行滅菌。標(biāo)準(zhǔn)菌株的性狀也是影響檢驗結(jié)果是否準(zhǔn)確的重要環(huán)節(jié)，標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)來源于專門的保存機(jī)構(gòu)，如中國CMCC、英國NTCC等，也可使用上級業(yè)務(wù)部門可溯源的標(biāo)準(zhǔn)菌株。菌株的保存需在適宜的條件下進(jìn)行，在保存過程中宜定期對菌株進(jìn)行純度分析以確保其典型的生物學(xué)特性。菌株的保存方法主要包括培養(yǎng)基保存法、冷凍干燥法以及超冰凍保存法等。培養(yǎng)基保存法比較適合基層微生物實(shí)驗室使用，培養(yǎng)基保存法主要包括普通瓊脂斜面、血瓊脂斜面、半固體穿刺3 種保存法，每支菌株應(yīng)以標(biāo)簽標(biāo)記來表示其名稱、標(biāo)準(zhǔn)號、接種日期和所傳代數(shù)并作確認(rèn)

實(shí)驗。

2 實(shí)驗室室間質(zhì)量控制

實(shí)驗室室內(nèi)質(zhì)控完成后，需開展實(shí)驗室間的質(zhì)量控制，包括實(shí)驗室比對和能力驗證。實(shí)驗室比對是由兩個或以上實(shí)驗室對相同或類似被檢測物進(jìn)行檢測的組織、實(shí)施和評價的活動，對比兩個實(shí)驗室在技術(shù)水平和管理能力上的區(qū)別和差異，從而及時找出問題，制定解決策略，提升實(shí)驗室檢測水平，最后由上級質(zhì)控中心進(jìn)行考核評價和監(jiān)督管理。

實(shí)驗室能力驗證是由上級業(yè)務(wù)部門和主管機(jī)構(gòu)根據(jù)能力驗證的國家標(biāo)準(zhǔn)或國際標(biāo)準(zhǔn)，對實(shí)驗室的檢驗?zāi)芰﹂_展的一項規(guī)范有效的考核考察和監(jiān)督確認(rèn)機(jī)制，從而確定并評價實(shí)驗室的檢測水平。實(shí)驗室間的實(shí)驗室比對和能力驗證，可以通過橫向和縱向的比較，了解本實(shí)驗室在本地區(qū)或更大范圍中的技術(shù)地位，有利于實(shí)驗室認(rèn)清自身的不足，學(xué)習(xí)其他實(shí)驗室優(yōu)秀的地方，利于實(shí)驗室技術(shù)水平的提高。實(shí)驗室應(yīng)確保參加這些活動，因而具有一定強(qiáng)制性。

3 結(jié)語

該文從檢驗檢測方法、標(biāo)準(zhǔn)與方法、菌種、培養(yǎng)基、環(huán)境和儀器設(shè)備等方面對其可能影響微生物檢驗結(jié)果進(jìn)行了綜合分析，對檢驗實(shí)驗室質(zhì)量控制與提高提供了一定參考。但由于微生物檢驗的特殊性，影響藥品微生物檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性的因素還有很多。因此，要不斷探索影響檢驗結(jié)果的因素，加強(qiáng)實(shí)施實(shí)驗室的內(nèi)部質(zhì)量控制，持續(xù)改進(jìn)，為微生物檢驗實(shí)驗室結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性提供依據(jù)，為提高藥品質(zhì)量控制和監(jiān)管提供支持。

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