陳 鵬 張 詠 劉 蘇 楊宇晴 袁 凱 張海發(fā) 丁雪娟

(1. 華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院, 廣州市亞熱帶生物多樣性與環(huán)境生物監(jiān)測重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 廣東省水產(chǎn)健康安全養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 廣州 510631; 2. 廣東省海洋漁業(yè)試驗(yàn)中心, 惠州 516081)

車輪蟲(Trichodinid)隸屬于纖毛門寡膜綱游走目車輪蟲科(Trichodinidae Claus, 1874), 是一類具有附著盤結(jié)構(gòu)、可自由運(yùn)動(dòng)的纖毛蟲, 廣泛寄生或共棲生于淡海水魚類的鰓及體表, 是水產(chǎn)養(yǎng)殖(尤其是高密度養(yǎng)殖)中常見且危害較大的一類纖毛蟲,車輪蟲的寄生可導(dǎo)致宿主嚴(yán)重的組織病變, 造成經(jīng)濟(jì)損失[1—3]。因此對(duì)魚類寄生車輪蟲的調(diào)查研究既有理論意義, 又有應(yīng)用價(jià)值。

全球已發(fā)現(xiàn)10屬近400種車輪蟲, 我國記錄有5屬約80種, 其中淡水車輪蟲50余種, 主要采自四川、重慶、湖北等內(nèi)陸地區(qū)[4—7]; 海水車輪蟲20余種, 主要分布于黃渤海海域[8,9], 南海僅見王文強(qiáng)等[10]報(bào)道的寄生于海南三亞海區(qū)野生魚類的4個(gè)種。車輪蟲的相關(guān)研究主要集中在分類學(xué)上, 生態(tài)學(xué)方面的研究報(bào)道較少[11,12]。大亞灣位于廣東省東南, 是廣東省沿岸最大的海灣之一, 也是全省唯一的水產(chǎn)資源自然保護(hù)區(qū), 灣內(nèi)面積約600 km2, 自然環(huán)境優(yōu)越、生物資源豐富, 為華南重要漁場之一[13]。已有學(xué)者對(duì)大亞灣魚類寄生黏抱子蟲、單殖吸蟲、復(fù)殖吸蟲和甲殼動(dòng)物等進(jìn)行了調(diào)查研究[14—17], 但車輪蟲的相關(guān)研究空缺。本文首次對(duì)大亞灣主要養(yǎng)殖魚類寄生車輪蟲進(jìn)行了調(diào)查研究, 以期探明該海區(qū)車輪蟲的種類組成, 揭示相關(guān)車輪蟲的種群季節(jié)動(dòng)態(tài), 填補(bǔ)該海區(qū)魚類寄生車輪蟲研究的空缺, 為海水養(yǎng)殖魚類車輪蟲病的診斷及防控提供科學(xué)參考。

1 材料與方法

2017年8月至2018年7月對(duì)大亞灣養(yǎng)殖的8種經(jīng)濟(jì)魚類鰓寄生車輪蟲進(jìn)行了為期一年的調(diào)查研究。調(diào)查的宿主魚包括: 卵形鯧鲹(Trachinotus ovatus)、眼斑擬石首魚(Sciaenops ocellatus)、黑鯛(Sparus macrocephalus)、星點(diǎn)笛鯛(Lutjanus stella-tus)、大西洋鯛(Sparus aurata)、斜帶髭鯛(Hapalogenys nitens)、鞍帶石斑魚(Epinephelus lanceolatus)和虎龍雜交斑(E. fuscoguttatus(♀) ×E. lanceolatus(♂), Hulong grouper), 其中鞍帶石斑魚和虎龍雜交斑取自廣東省海洋漁業(yè)試驗(yàn)中心(22.71°N, 114.54°E)的室內(nèi)養(yǎng)殖池, 其余6種魚則取自3 km外的養(yǎng)殖網(wǎng)箱。每月采樣1次, 每次每種魚各取5尾, 魚的體長與體重信息見表 1(括號(hào)外為平均值, 括號(hào)內(nèi)為量度變化范圍), 解剖后取鰓進(jìn)行濕涂片(每一鰓片涂一張片), 同時(shí)測量水體的水溫及pH。

采用干銀法對(duì)空干的鰓涂片進(jìn)行染色制片: 在3%硝酸銀溶液中浸泡150s, 流水沖洗5s, 45℃烘干后于50W白熾燈下曝光120s, 再加顯影劑顯影20s,流水沖洗5s, 95%酒精脫水120s, 45℃烘干后用中性樹膠封片。隨后在光學(xué)顯微鏡(Olympus BX51)下觀察、拍照。形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)的測量依Lom[18]所倡導(dǎo)的統(tǒng)一特定方法進(jìn)行, 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)模式為: Min-Max(Mean±SD), 即最小值-最大值(算術(shù)平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)。齒體定位圖借助Adobe Photoshop CS6完成,并采用Van As和Basson[19]提出和唐發(fā)輝等[6]修正的方法進(jìn)行齒體定位描述; 種群周年動(dòng)態(tài)數(shù)據(jù)整理及統(tǒng)計(jì)分析借助Excel和SPASS20.0軟件進(jìn)行。寄生車輪蟲的感染率(Prevalence)與平均感染強(qiáng)度(Mean intensity)等的統(tǒng)計(jì)依Bush等[20]。

表 1 宿主魚體長和體重信息Tab. 1 The body length and weight of host fishes

2 結(jié)果與討論

2.1 種類組成與形態(tài)特征

本調(diào)查共檢獲車輪蟲5種, 描述如下。

亞卓車輪蟲Trichodina jadranica(Raabe, 1958)Lom & Laird, 1969(表 2、圖 1A和1B、圖2A)

宿主: 卵形鯧鲹, 虎龍雜交斑, 鞍帶石斑魚。

該蟲為中、大型車輪蟲; 附著盤中央具有一個(gè)大且圓的顆粒; 齒鉤近半月型, 其外切緣平滑略高于骨突, 骨突圓鈍, 齒鉤后緣平滑且彎曲, 齒鉤前緣平滑, 不及Y+1軸, 齒鉤凸點(diǎn)不及Y+1軸, 與齒鉤凹點(diǎn)在同一水平上, 無鉤突及后突起; 齒鉤連接粗壯, 齒錐較發(fā)達(dá), 齒錐頂點(diǎn)鈍圓, 未到達(dá)Y軸至Y-1軸距離的一半, 齒錐間嵌合緊密; 齒棘短且粗, 整體平直, 無棘突。

該種在亞洲、歐洲、非洲和澳洲均有分布, 宿主范圍廣, 能適應(yīng)海、淡水環(huán)境[21]。我國黃渤海海域的牙鲆(Paralichthys oblivaceus)、石蝶(Kareius bicoloratus)和紅鰭東方鲀(Takifugu rubripes)上有寄生該蟲的記錄[22,23]。在不同的宿主和生境中, 種群的齒體形態(tài)有一定差異, 但均具該種明顯的鑒別特征, 即附著盤中央有一大而圓的顆粒。

表 2 大亞灣五種車輪蟲的形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)比較Tab. 2 Morphometric comparison of five trichodinids from Daya Bay (μm)

長須鳠車輪蟲Trichodina guliaeAsmat, 2006(表 2、圖 1C、圖 2B)

宿主: 卵形鯧鲹, 虎龍雜交斑。

該蟲為中型車輪蟲; 附著盤中央具一個(gè)圓形顆粒; 齒鉤近半圓形, 齒鉤外切緣圓滑, 骨突略尖銳且低于外切緣, 齒鉤后緣略彎曲, 齒鉤前緣平滑, 齒鉤凸點(diǎn)幾乎接觸Y+1軸, 且與齒鉤凹點(diǎn)位于同一水平線上, 無鉤突及后突起; 齒鉤連接較纖細(xì), 齒錐發(fā)達(dá), 齒錐頂點(diǎn)鈍圓, 到達(dá)Y軸至Y–1軸距離的一半,齒錐間嵌合緊密, X軸上下錐形不相似; 齒棘細(xì)長,整體略向前傾斜, 無棘突。

Asmat等[24]在孟加拉國的長須鳠(Mystus gulio)上首次發(fā)現(xiàn)該蟲, 鑒別特征為近半月形的齒鉤、近三角形的齒錐及末端膨大的齒棘。大亞灣種群除蟲體直徑、緣膜寬及齒棘長比原始描述略小外, 其他形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)與原始描述吻合。卵形鯧鲹、虎龍雜交斑為該蟲的宿主新記錄。

萊普斯車輪蟲Trichodina lepsiiLom, 1962(表 2、圖 1D和1E、圖 2C)

宿主: 卵形鯧鲹, 虎龍雜交斑, 星點(diǎn)笛鯛。

該蟲為中型車輪蟲; 附著盤中央無明顯顆粒;齒鉤近平行四邊形, 齒鉤外切緣平滑, 骨突圓鈍且與外切緣水平, 齒鉤前緣和后緣均平直, 且兩者近乎平行, 齒鉤凸點(diǎn)幾近接觸Y+1軸, 且與齒鉤凹點(diǎn)位于同一水平線上, 無鉤突及后突起; 齒鉤連接和齒錐均較纖細(xì), 齒錐欠發(fā)達(dá), 其頂點(diǎn)尖銳, 未到達(dá)Y軸至Y–1軸距離的一半, 齒錐間嵌合緊密; 齒棘短粗, 略有彎曲且向前傾斜, 齒棘頂點(diǎn)超過Y軸至Y+1軸距離的一半, 無棘突。

圖 1 五種車輪蟲的銀染標(biāo)本顯微照片F(xiàn)ig. 1 Photomicrographs of silver impregnated adhesive disc of five trichodinids

圖 2 五種車輪蟲的齒體定位圖Fig. 2 Diagrammatic representations of the denticles of five trichodinids

該蟲已記錄的宿主多為鯔類, 如Mugil auratus、M. platanus、M. cephalus等, 并常與浦氏車輪蟲(T. puytoraci)混合感染[25,26]。本研究為該蟲在亞洲的首次記錄, 其緣膜寬、齒體數(shù)和齒體縱長比原始描述略小, 其他形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)吻合。大亞灣的種群主要寄生在卵形鯧鲹和虎龍雜交斑上, 星點(diǎn)笛鯛上也有少量寄生, 卵形鯧鲹上該蟲與其他4種車輪蟲混合感染。

勞牧小車輪蟲Trichodinella lomiXu, Song &Warren, 1999(表 2、圖 1F、圖 2D)

宿主: 卵形鯧鲹, 星點(diǎn)笛鯛, 眼斑擬石首魚。

該蟲為小型車輪蟲; 附著盤中央無明顯顆粒;齒鉤發(fā)達(dá), 呈狹長棒狀齒鉤整體明顯向后傾斜且超過Y+1軸, 骨突鈍圓, 齒鉤前后緣均平直, 偶見鉤突,無后突起; 齒鉤連接纖細(xì)且難與齒錐相區(qū)分; 齒錐不發(fā)達(dá), 齒錐頂點(diǎn)鈍圓且未及Y軸, 齒錐間嵌合略疏松; 齒棘多數(shù)缺失。

該蟲為我國海水養(yǎng)殖真鯛(Pagrosomus major)和鱸(Lateolabrax japonicus)的常見寄生蟲, 并常與日本車輪蟲(Trichodinajaponica)、直鉤車輪蟲(T.rectuncinata)、杜氏車輪蟲(T. domerguei)和簡單兩分蟲(Dipartiella simplex)等混合感染[22]。大亞灣卵形鯧鲹上的勞牧小車輪蟲種群與長須鳠車輪蟲、萊普斯車輪蟲、亞卓車輪蟲和斜擬車輪蟲混合感染, 其蟲體直徑和附著盤直徑比原始描述略小, 能看到很短的齒棘, 其他形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)與原始描述吻合。

斜擬車輪蟲Paratrichodina obliqueLom, 1963(表 2、圖 1G—I、圖 2E)

宿主: 卵形鯧鲹, 虎龍雜交斑, 星點(diǎn)笛鯛, 眼斑擬石首魚。

該蟲為小型車輪蟲; 附著盤中央無明顯顆粒;齒鉤近三角形, 齒鉤外切緣平直, 骨突圓鈍, 齒鉤前緣平直, 后緣略彎曲, 齒鉤凸點(diǎn)略低于齒鉤凹點(diǎn), 少數(shù)具有鉤突; 齒鉤連接粗壯, 與齒錐難以區(qū)分, 齒錐發(fā)達(dá), 齒錐頂點(diǎn)鈍圓, 略超過Y軸, 齒錐間嵌合疏松;齒棘相對(duì)纖細(xì)且整體平直, 齒棘頂點(diǎn)較鈍, 無棘突。

大亞灣的斜擬車輪蟲種群, 除附著盤直徑和齒鉤長較小、齒環(huán)直徑和齒體數(shù)較大外, 其他形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)與原始描述吻合, 也與Grupcheva等[27]在地中海竹莢魚(Trachurus mediterraneus)和保加利亞的寬吻海龍(Syngnathus typhle)及徐奎棟等[22]在黃海的牙鲆上采獲的種群一致。

2.2 種群季節(jié)動(dòng)態(tài)

在檢測的8種魚中, 有5種魚感染了車輪蟲, 分別為: 卵形鯧鲹、虎龍雜交斑、鞍帶石斑魚、星點(diǎn)笛鯛和眼斑擬石首魚, 而黑鯛、大西洋鯛和斜帶髭鯛上未檢出車輪蟲。共檢獲5種車輪蟲。從周年感染情況看, 卵形鯧鲹5種蟲均有感染, 且5種蟲的感染率均是卵形鯧鲹的最高(10%—30%), 眼斑擬石首魚上2種蟲的感染率最低(1.67%, 表 2和表 3); 平均感染強(qiáng)度最高的是斜擬車輪蟲(70.5), 隨后依次是亞卓車輪蟲(35.5)、勞牧小車輪蟲(33.8)、長須鳠車輪蟲(22.8)和萊普斯車輪蟲(20)。從季節(jié)動(dòng)態(tài)看, 萊普斯車輪蟲感染率及平均感染強(qiáng)度的峰值出現(xiàn)在冬季, 其余4種蟲冬季的感染率均顯著低于其他季節(jié), 斜擬車輪蟲、亞卓車輪蟲的平均感染強(qiáng)度在秋季達(dá)最高峰, 長須鳠車輪蟲和勞牧小車輪蟲的分別為春季和夏季(表 4)。卵形鯧鲹上5種車輪蟲的感染率均為冬季最低, 平均感染強(qiáng)度除勞牧小車輪蟲外也是冬季最低(表 5), 其中斜擬車輪蟲春夏秋季的平均感染強(qiáng)度均高于其他4種, 感染高峰出現(xiàn)在秋季。

有研究表明溫度是影響車輪蟲種群季節(jié)變動(dòng)的重要因素, 且不同蟲種對(duì)溫度的敏感性不一[12,28—31]。本研究顯示大亞灣海區(qū)養(yǎng)殖魚類寄生的5種車輪蟲,除萊普斯車輪蟲外, 4種蟲的感染率和平均感染強(qiáng)度都與溫度呈正相關(guān)關(guān)系。感染高峰出現(xiàn)在水溫較高的季節(jié), 亦是魚類生長的旺季。而車輪蟲的大量寄生可導(dǎo)致宿主的組織病變, 引起養(yǎng)殖魚類特別是魚苗魚種發(fā)病死亡, 造成經(jīng)濟(jì)損失[2,3]。在今后大亞灣海區(qū)的魚類養(yǎng)殖過程中, 需加強(qiáng)寄生車輪蟲病的監(jiān)測及預(yù)防。

表 3 大亞灣養(yǎng)殖魚類寄生車輪蟲周年感染情況Tab. 3 The annual infection of trichodinids in gills of farmed fish in Daya Bay

表 4 大亞灣五種車輪蟲感染的季節(jié)動(dòng)態(tài)Tab. 4 Seasonal dynamics of five trichodinids infection in Daya Bay

表 5 卵形鯧鯵上五種車輪蟲的季節(jié)動(dòng)態(tài)Tab. 5 Seasonal dynamics of five trichodinids from the host fish Trachinotus ovatus

致謝:

感謝華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院動(dòng)物學(xué)專業(yè)研究生李有智、王琳和朱培煒協(xié)助采集標(biāo)本。