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        傳染性單核細(xì)胞增多癥128例實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的早期診斷價(jià)值

        2020-12-08 08:19:00張立營(yíng)陳樸彭宇生王鵬
        安徽醫(yī)藥 2020年12期
        關(guān)鍵詞:病兒淋巴細(xì)胞陽(yáng)性率

        張立營(yíng),陳樸,彭宇生,王鵬

        作者單位:宜賓市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,四川 宜賓644000

        傳染性單核細(xì)胞增多癥(infectious mononucleosis,IM)是兒童時(shí)期比較常見(jiàn)的由EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染所致的單核-巨噬細(xì)胞系疾病。它可發(fā)生于全年,兒童感染時(shí)其癥狀不同,且常累及多臟器和多系統(tǒng),導(dǎo)致多種臨床表現(xiàn)。因此,應(yīng)盡快進(jìn)行相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室檢查,從而綜合分析以明確診斷。

        目前診斷IM包括異型淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、VCAIgM、EBV-DNA載量和嗜異凝集試驗(yàn)陽(yáng)性等多種實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。為了有效對(duì)IM進(jìn)行早期診斷,本研究選擇128例IM病兒和80例健康兒童,分別對(duì)其進(jìn)行異型淋巴細(xì)胞、EBV抗CA-IgM(VCA-IgM)和EB病毒-DNA(EBV-DNA)載量檢測(cè)。

        1 資料與方法

        1.1一般資料選擇2018年9月至2019年4月在宜賓市第一人民醫(yī)院住院且處于治療前的128例IM病兒和80例健康兒童作為受試者,所有病兒均符合IM診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。研究分為感染組和健康對(duì)照組,感染組中包括69例男性病兒,59例女性病兒,年齡(5.6±0.5)歲,范圍為0.4~12.0歲。另選正常體檢的健康兒童80例作為對(duì)照組,對(duì)照組中包括男性48例,女性32例,年齡(5.4±0.4)歲,范圍為0.9~12歲。兩組性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。病兒監(jiān)護(hù)人或其近親屬對(duì)所受治療知情同意,本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。

        1.2方法

        1.2.1 異型淋巴細(xì)胞檢測(cè) 采集研究對(duì)象的靜脈血制作成血涂片后進(jìn)行瑞吉染色,利用光學(xué)顯微鏡觀察并計(jì)算異型淋巴細(xì)胞的百分率。異型淋巴細(xì)胞百分率大于10%判定為陽(yáng)性。

        1.2.2 VCA-IgM抗體檢測(cè) 對(duì)受試者進(jìn)行靜脈血液取樣,血容量為2 mL,3 000 r/min,5 min,取上清,通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)檢測(cè)抗體。按試劑盒試劑相關(guān)說(shuō)明書(shū)(德國(guó)OUMEMG公司)進(jìn)行操作,判斷標(biāo)準(zhǔn)為病人樣本吸光度與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度比值≥1.1為陽(yáng)性。

        1.2.3 EBV-DNA檢測(cè) 對(duì)研究對(duì)象抽取靜脈血2 mL并用EDTA抗凝,立即顛倒混勻備用無(wú)須離心,采用上海宏石SLAN-96S/48P熒光定量PCR儀進(jìn)行EBV-DNA測(cè)定,并根據(jù)儀器試劑的相關(guān)說(shuō)明使用圣湘生物有限公司的EBV-DNA試劑,EBV-DNA>4×102/mL為陽(yáng)性。

        1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法用SPSS 20.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料采用表示,采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用百分率表示,組間比較通過(guò)χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 EBV感染組和健康對(duì)照組異型淋巴細(xì)胞、VCA-IgM抗體和EBV-DNA陽(yáng)性率比較異型淋巴細(xì)胞、VCA-IgM抗體和EBV-DNA陽(yáng)性率兩組對(duì)比均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001),見(jiàn)表1。

        表1 EB病毒(EBV)感染組和健康對(duì)照組異型淋巴細(xì)胞、EBV抗CA-IgM(VCA-IgM)和EB病毒-DNA(EBV-DNA)陽(yáng)性率的比較/例(%)

        2.2異型淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、VCA-IgM和EBV-DNA三項(xiàng)指標(biāo)對(duì)IM診斷效能價(jià)值的比較EBV感染組異型淋巴細(xì)胞、VCA-IgM和EBV-DNA對(duì)IM診斷靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值結(jié)果見(jiàn)表2,EBV-DNA診斷IM的靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值高于異型淋巴細(xì)胞和VCA-IgM(P<0.05)。

        表2 異型淋巴細(xì)胞、EBV抗CA-IgM(VCA-IgM)和EB病毒-DNA(EBV-DNA)三項(xiàng)指標(biāo)對(duì)傳染性單核細(xì)胞增多癥診斷效能的比較/%(n/N)

        2.3異型淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、VCA-IgM和EBV-DNA三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)異型淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、VCA-IgM和EBV-DNA以一項(xiàng)或多項(xiàng)陽(yáng)性為依據(jù)的聯(lián)合檢測(cè)診斷IM的靈敏度為96.88%(124/128);以三項(xiàng)指標(biāo)均陰性為依據(jù)的聯(lián)合檢測(cè)診斷IM的特異度為96.25%(77/80),其中對(duì)照組EBV-DNA假陽(yáng)性的病兒與VCA-IgM假陽(yáng)性病兒之一是同一病兒。

        3 討論

        IM是兒童時(shí)期EBV感染最常見(jiàn)的發(fā)病類(lèi)型,感染多集中于12歲以下兒童,占發(fā)病人數(shù)的58.62%,感染時(shí)其癥狀差別較大,是小兒時(shí)期發(fā)熱的病因之一。臨床表現(xiàn)主要以發(fā)熱、咽峽炎、肝脾淋巴結(jié)腫大、外周血中淋巴細(xì)胞增加并出現(xiàn)異形淋巴細(xì)胞等為特征。它可以影響全身多個(gè)系統(tǒng),引發(fā)多種疾病或存在隱性感染[1-2]。

        目前對(duì)于IM的診斷有多種實(shí)驗(yàn)室指標(biāo),其中包括異型淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、VCA-IgM和EBV-DNA載量檢測(cè)等。當(dāng)病人感染EBV時(shí),其主要入侵B淋巴細(xì)胞,導(dǎo)致T細(xì)胞出現(xiàn)免疫反應(yīng),最終導(dǎo)致在血中可以觀察到異型淋巴細(xì)胞。在健康人群中,異型淋巴細(xì)胞非常罕見(jiàn),但異型淋巴細(xì)胞在病毒感染病人中更為常見(jiàn)。異型淋巴細(xì)胞比例增加到10%的時(shí)候,具有臨床診斷價(jià)值[3-4]。本研究結(jié)果顯示,感染組病兒異型淋巴細(xì)胞(大于10%)陽(yáng)性率為61.72%,略低于徐福勝等[5]報(bào)道的86%陽(yáng)性率,高于林勝元[6]的報(bào)道,這可能與受試病兒免疫狀況和檢測(cè)時(shí)期不同等因素有關(guān)。

        VCA-IgM在EBV感染早期產(chǎn)生,數(shù)周后消失,是急性感染的可靠標(biāo)志。但由于EBV初次感染病兒的年齡較低,其免疫系統(tǒng)發(fā)育還未完善,病毒進(jìn)入機(jī)體后,無(wú)法對(duì)EBV產(chǎn)生充分的免疫反應(yīng),尤其是在感染的早期,一些病兒體內(nèi)產(chǎn)生的抗體甚至低于檢測(cè)下限,因此不能通過(guò)ELISA將其檢測(cè)出來(lái),VCA-IgM陽(yáng)性率低也可能與部分病兒缺乏典型臨床表現(xiàn),忽視檢測(cè)VCA-IgM或檢測(cè)時(shí)間不當(dāng)有關(guān)[7-9]。VCA-IgM抗體主要反映感染后人感染的免疫狀態(tài),不檢測(cè)病毒本身,但EBV可能是潛伏感染。因此,抗體難以準(zhǔn)確地反映EBV感染,容易導(dǎo)致漏診。本研究結(jié)果顯示,感染組病兒VCA-IgM抗體陽(yáng)性比例為70.31%,與朱傳新等[10]報(bào)道的陽(yáng)性比例大致相同,略低于王曉亮、劉曉鶯[11]報(bào)道的陽(yáng)性率,這可能與病人所處疾病的不同時(shí)期有關(guān)。

        EBV-DNA檢測(cè)是一種靈敏度和特異度都很高的檢測(cè)方法,在抗體檢查結(jié)果不明確時(shí),有助于早期診斷。但在病程兩周以后,大多數(shù)IM病人血清中幾乎檢測(cè)不到病毒核酸[12]。胡榮盛等[13]發(fā)現(xiàn),在EBV活動(dòng)期,兒童外周血中EBV-DNA水平升高,在健康EBV攜帶者中,EBV-DNA幾乎檢測(cè)不到,并且僅存在少量外周血淋巴細(xì)胞。外周血EBV-DNA測(cè)試被認(rèn)為在評(píng)估EBV感染狀態(tài)中是重要的[13]。本研究結(jié)果顯示,感染組病兒EBV-DNA陽(yáng)性率為95.31%,略高于湯俊峰等[14]報(bào)道的82%陽(yáng)性率,這也可能與受試病兒檢測(cè)時(shí)期不同等因素有關(guān)。

        研究數(shù)據(jù)顯示,IM感染組病人異型淋巴細(xì)胞、VCA-IgM和EBV-DNA陽(yáng)性率顯著高于健康對(duì)照組(P<0.05)。EBV-DNA診斷IM的靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值均顯著高于異型淋巴細(xì)胞和VCA-IgM(P<0.05),然而,后二者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),三者診斷IM的特異度和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。EBV-DNA對(duì)IM的診斷效能明顯高于其他兩項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo),但異型淋巴細(xì)胞(大于10%)診斷IM的特異度達(dá)到100%。以上述一項(xiàng)或多項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性為依據(jù)的聯(lián)合檢測(cè)診斷IM的靈敏度為96.88%;以三項(xiàng)指標(biāo)均陰性為依據(jù)的聯(lián)合檢測(cè)診斷IM的特異度為96.25%。因此,異型淋巴細(xì)胞、VCA-IgM和EBV-DNA陽(yáng)性率三者聯(lián)合檢測(cè)能大大提高對(duì)兒童IM的明確診斷。

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