□ 李文偉 湖北省鄂州市疾病預防控制中心

單核細胞增生李斯特氏菌是一種主要通過水產(chǎn)品、肉制品、蔬菜等食品進行傳播的食源性病原菌，人、畜皆可因為感染該細菌而患病，會導致人類感染者出現(xiàn)單核細胞增多、腦膜炎、神經(jīng)癥狀或敗血癥等，亦可導致孕婦流產(chǎn)，故積極強化對食品中單核細胞增生李斯特氏菌的檢測并明確其抗藥性十分必要[1]。

1 材料及方法

1.1 樣本來源

59 株單核細胞增生李斯特氏菌檢測樣品均獲自隨機采集的某地農(nóng)貿(mào)市場、食品超市水產(chǎn)魚貝類、熟肉類、生肉類食品。

1.2 試劑、培養(yǎng)基

所應用哥倫比亞血瓊脂平板、李斯特氏菌增菌肉湯、李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基、API 測試條、凍干型細菌定量藥敏測試盒分別由環(huán)凱生物技術有限公司、路橋技術有限責任公司、博賽生物技術股份有限公司、生物梅里埃公司與金章科技發(fā)展有限公司提供。

1.3 質(zhì)控菌株

自環(huán)凱生物技術有限公司獲取的肺炎鏈球菌。

1.4 方法

1.4.1 菌株分離鑒定

于（30±1）℃條件下對李氏增菌培養(yǎng)液（LB1、LB2）行兩次增菌，增菌方法符合GB 4789.30—2010 國家標準[2]；然后在科馬嘉顯色培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)種LB2 培養(yǎng)物，（36±1）℃條件下培養(yǎng)24 ～48 h 后，于TSA—YE 平板上接種可疑菌落，再對其進行24 ～48 h的（30±1）℃的純培養(yǎng)，利用API 試紙條鑒定。

1.4.2 藥敏試驗

利用微量肉湯稀釋法對59 株單核細胞增生李斯特氏菌行藥物敏感性試驗，所應用抗生素分別為紅霉素、甲氧芐啶、克林霉素、四環(huán)素和苯唑西林，分別于哥倫比亞血瓊脂平板接種待檢菌株、質(zhì)控菌株后于（36±1）℃條件下行24 h 的純培養(yǎng)；自培養(yǎng)所獲純新菌落中挑取3 ～5 個置于細菌稀釋管中，并將菌液細菌含量調(diào)整至1×108cfu/mL；將10 μL 均 液 加 入12 mL 肉湯中完成接種，確保接種濃度在1 ～2×108cfu/mL；對藥敏試劑盒行16 ～20 h 的（36±1）℃培養(yǎng)，并參照CLSI 藥敏標準中M100—820 及M45—A 表的解釋標準判定結(jié)果。

2 結(jié)果

59 株單核細胞增生李斯特氏菌對于紅霉素、甲氧芐啶、克林霉素、四環(huán)素、苯唑西林5 種抗生素的耐藥率分別為1.69%（1/59）、5.08%（3/59）、5.08%（3/59）、10.17%（6/59）、91.53%（54/59）。

3 討論

對于多部分抗生素，單核細胞增生李斯特氏菌的藥敏試驗結(jié)果均顯示為敏感，但最近幾年學術界逐漸出現(xiàn)了單核細胞增生李斯特氏菌對一種抗生素或多種抗生素具有耐藥性的研究報道。通過對相關文獻的研究、分析后得出，對于青霉素、四環(huán)素、萬古霉素、甲氧芐氨嘧啶、氨基苷類抗生素、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素單核細胞增生李斯特氏菌皆敏感，但對于第一代喹諾酮類抗生素、頭孢類抗生素單核細胞增生李斯特氏菌則顯露出敏感性下降趨勢，甚至對其中某種抗生素產(chǎn)生抗藥性[3]。同時，有關單核細胞增生李斯特氏菌對于包括紅霉素、環(huán)丙沙星、四環(huán)素在內(nèi)的二線藥物的耐藥性亦經(jīng)諸多專家、學者的研究、分析明確。

本研究中的59 株單核細胞增生李斯特氏菌的藥物敏感性試驗結(jié)果顯示，對于苯唑西林這種一線治療藥物，單核細胞增生李斯特氏菌的耐藥率高達91.53%（54/59），針對此項研究結(jié)果，相關部門應予以高度重視，注意嚴格控制抗生素在水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)、畜牧行業(yè)飼料中的添加，確保嚴格遵循休藥期規(guī)定，以對食源性疾病進行預防和控制，降低老年人、嬰幼兒、慢性病人等抗病弱勢群體面臨單核細胞增生李斯特氏菌感染的風險。

綜上所述，食品中單核細胞增生李斯特氏菌對紅霉素、甲氧芐啶、克林霉素、四環(huán)素、苯唑西林均具有抗藥性，應進一步強化對食源性單核細胞增生李斯特氏菌抗藥性的檢測，以確保廣大民眾身體健康和食品安全。