曹雅菲，劉君星，劉玉榮，高 怡

(1.佳木斯大學臨床醫(yī)學院，黑龍江 佳木斯 154007；2.佳木斯大學基礎醫(yī)學院，黑龍江 佳木斯 154007)

糖尿病是由遺傳因素、環(huán)境因素及社會因素等綜合作用引發(fā)的代謝性疾病[1]。它是21世紀全球最大健康問題之一，世界衛(wèi)生組織(World Health Organization，WHO)估計全球范圍內(nèi)，高血糖是繼高血壓和抽煙之后，過早死亡率最高的第三大危險因素[2]。我國糖尿病發(fā)病率逐年升高，是糖尿病患者的第一大國，2015年病患人數(shù)高達1.096億，有130萬人死于糖尿病及其并發(fā)癥。同時據(jù)國際糖尿病聯(lián)盟(International Diabetes Federation，IDF)預測，如果不加以干預，2040年全球糖尿病患者將達6.42億[3]。其中2型糖尿病約占糖尿病患者的95%，糖尿病腎病是糖尿病病人最重要的合并癥之一[4]。

黑木耳多糖(Auricularia auricular Polysaccharide)，為黑木耳中具有活性的主要成分。自古以來，就有用黑木耳治療多種疾病的記錄[5]。近年來，研究發(fā)現(xiàn)多糖類化合物具有抗氧化、抗腫瘤、降糖、調節(jié)免疫等生物活性[6]，因而多糖研究成為天然產(chǎn)物研究的一個熱點課題。本實驗就黑木耳多糖對2型糖尿病大鼠的血糖、體重及腎臟保護作用進行了探究。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

健康雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠28只，體重180～200g(60 ～ 70d齡)，由佳木斯大學實驗動物中心提供及飼養(yǎng)。

1.2 主要試劑與儀器

普通飼料和高糖高脂飼料為清潔級顆粒鼠糧(沈陽市于洪區(qū)前民動物實驗飼料廠)飼料質量合格(SCXK(遼)2015-0002)高糖高脂飼料配方：基礎飼料59%，白糖20%，豬油18%，蛋黃3%[7]。

黑木耳多糖購自上?？抵壅婢嗵怯邢薰?，血糖儀購自德國羅氏診斷公司，鏈脲佐菌素購自美國Sigma公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 2型糖尿病模型的制備

28只大鼠，體重180～200g，適應性喂養(yǎng)1周后，隨機抽取20只給予高脂高糖飼料喂養(yǎng)，正常組的8只給予普通飼料，保證食物和飲水充足。喂養(yǎng)4周后，禁食12h，不禁水。以35mg/kg劑量腹腔注射STZ，(STZ溶于檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液中，避光，現(xiàn)配現(xiàn)用，冰浴，于30min內(nèi)用完)，正常組大鼠腹腔注射相同體積的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。7d后，尾靜脈檢測大鼠的空腹血糖，以空腹血糖值>16.7mmol/L為糖尿病成模標準。

在STZ注射1周后檢測大鼠空腹血糖值，有16只大鼠血糖值達到2型糖尿病的成模標準，有2只死亡，2只血糖值低于16.7mmol/L。成模后的16只大鼠即可用于實驗。

檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液的配置：檸檬酸2.1g加雙蒸水100mL配成A液，檸檬酸鈉2.94g加雙蒸水100mL配成B液。用時A、B液按1:1.32比例混合，pH計調節(jié)pH=4.2～4.5[8]。

1.3.2 實驗分組及處理

將STZ誘導成模后的16只鼠隨機分為2組：黑木耳多糖治療組和糖尿病模型組，每組8只鼠。黑木耳多糖治療組，給予黑木耳多糖70mg/(kg·d)[9]灌胃，糖尿病模型組和正常組，給予等量的生理鹽水灌胃，連續(xù)灌胃4周，每周測空腹血糖值(禁食不禁水)和體重變化。

1.3.3 測定指標

灌胃4周后，內(nèi)眥靜脈取血，分離血清。將血清送往佳木斯大學附屬第一醫(yī)院，檢測血尿素氮(BUN)和尿素(UREA)。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 黑木耳多糖對2型糖尿病大鼠血糖的影響

造模前，由于高脂高糖飼料的誘導，治療組與模型組的血糖均高于正常組，具有顯著差異(P<0.01)，造模后，治療組與模型組，血糖迅速升高，高于16.7mmol/L，說明造模成功。待模型血糖穩(wěn)定后，給予黑木耳多糖治療，治療組血糖較模型組確實有所下降(P<0.01)，但仍然高于正常組血糖值(P<0.01)。血糖變化趨勢見圖1。

2.2 黑木耳多糖對2型糖尿病大鼠體重的影響

造模前，由于高脂高糖飼料的誘導，治療組與模型組的生長速度均高于正常組，故治療組和模型組的體重明顯高于正常組，存在顯著差異(P<0.01)。造模后，治療組與模型組，體重呈下降趨勢。給予黑木耳多糖治療后，治療組體重下降比模型組下降緩慢，體重高于模型組，存在顯著差異(P<0.05)。對比正常組，模型組和治療組體重明顯下降存在顯著差異(P<0.01)，證明造模成功。體重變化趨勢見圖2。

2.3 黑木耳多糖對2型糖尿病大鼠腎臟功能的影響

2.3.1 BUN的改變

黑木耳多糖治療后，治療組BUN含量低于模型組，但無明顯差異(P>0.05)，正常組BUN含量低于模型組和治療組，存在明顯差異(P<0.05)。不同組BUN對比見圖3。

2.3.2 UREA的改變

黑木耳多糖治療后，治療組UREA含量高于模型組，存在顯著差異(P<0.01)，治療組與正常組的UREA值相近，且不存在明顯差異(P>0.05)。不同組UREA對比見圖4。

3 討論

2型糖尿病是糖代謝紊亂的一種全身性疾病。隨著病程的發(fā)展，可以導致多組織、多器官的慢性進行性并發(fā)癥。糖尿病腎病較為常見，其中BUN和UREA是反映腎臟功能的常見指標[10]。STZ是自由基激活劑，能夠選擇性的破壞胰島細胞，引起糖紊亂，而且對肝、腎等臟器的損害還比較小[11,12]，故本實驗采用此法造模。

黑木耳多糖對于降低2型糖尿病大鼠血糖和減緩體重降低的作用確實存在，本實驗已經(jīng)給予證實，但是血糖水平對于正常組來講還是屬于偏高，推測原因可能是由于藥物作用的時間過短，所以我們可以適當增加藥物作用時間，來觀察藥物療效，就很可能會出現(xiàn)使用黑木耳多糖明顯降低血糖的現(xiàn)象。

血尿素氮(BUN)，它是血漿中除蛋白質以外的一種含氮化合物，通過腎小球的濾過而排出體外。在腎功能不全失代償時，BUN可以升高，潘永梅等[13]利用活血化瘀復方治療患有糖尿病腎病的SD大鼠的實驗中，通過觀察BUN的變化情況來證明活血化瘀復方可以起到保護腎臟的作用。許嘯虎等[14]也是根據(jù)BUN水平的變化來判斷，交泰丸對糖尿病腎病具有改善作用。本實驗中模型組BUN指標升高，使用藥物之后出現(xiàn)了降低表現(xiàn)，說明藥物具有改善2型糖尿病對腎臟的毒害作用，且該作用與活血化瘀復方和交泰丸的相同。

對于尿素(UREA)，主要由腎臟排出體外，所以血清中尿素水平可以適當?shù)胤从吵瞿I臟功能。但是對于早期的腎臟功能受損，它可能不會導致血清中的含量升高[15]。本實驗中模型組UREA的含量就沒有升高。尿素是蛋白質的終末產(chǎn)物，在肝臟中生成，模型組含量低于其他兩組，可能原因是糖尿病早期對肝臟的毒害作用先于腎臟，肝臟相對應產(chǎn)生的尿素減少，最終導致血清中尿素含量降低。而對于治療組的UREA水平，與模型組相比有所升高，由此推測黑木耳多糖還可能會對2型糖尿病大鼠的肝臟的功能有一定的改善作用。

綜上所述，黑木耳多糖可以降低2型糖尿病大鼠的血糖，減緩體重的下降，改善對腎臟的損害。