文│邢林林 李玉杰 徐聰 姜秀云 陳靜（山東省動物疫病預防與控制中心）

李佳璇（青島農業(yè)大學海都學院）

禽白血病（Avian Leukosis）是由禽白血病病毒（ALV）引起的禽類的多種傳染性腫瘤疾病的統(tǒng)稱，在我國禽類養(yǎng)殖場中廣泛流行，給家禽業(yè)造成了較大的經(jīng)濟損失。根據(jù)其宿主范圍以及各病毒之間的干擾情況，ALV分為A、B、C、D、E和J等亞群，其中常見的外源性病毒是ALV-A和ALV-B，ALV-J最早是在19世紀80年代后期，從英國的商品肉雞中分離出來的，也是商品雞群中最常分離到的病毒。

外源性ALV主要有兩種傳播方式：經(jīng)蛋的垂直傳播以及通過直接接觸或間接接觸的水平傳播，在流行病學上垂直傳播是禽白血病主要傳播方式，并能產(chǎn)生免疫耐受，接著排毒并通過種蛋產(chǎn)生垂直傳播。自2008年以來，我國逐步建立了全國禽白血病凈化項目，在《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012——2020年）》中，將禽白血病列為重點凈化疫病，經(jīng)過多年的實施，ALV發(fā)病率明顯降低，ALV感染得到有效控制，J亞群尤為明顯。然而，Yawen Zhang等通過對吉林省、遼寧省、天津市、河北省、山東省、江蘇省以及其他省份的采樣發(fā)現(xiàn)，2018年以來山東8個養(yǎng)殖場均出現(xiàn)ALV感染。

本研究利用商品化的ALV抗原檢測試劑盒，對山東省內7個種禽場的ALV進行流行病學調查，統(tǒng)計分析ALV的陽性率、感染程度等，探討山東省ALV凈化情況，為制定禽白血病的防治措施奠定基礎。

一、材料與方法

2019年12月至2020年1月，對山東省內7個種禽場進行血清及蛋清的隨機抽檢，抽樣不小于以下方式計算數(shù)量，具體根據(jù)養(yǎng)殖場現(xiàn)況調整。

種雞群抗體檢測采樣數(shù)量：采集血清。生產(chǎn)公雞存欄100只以下，100%采樣；生產(chǎn)公雞100只以上，按照發(fā)現(xiàn)疫情公式計算（置信度95%，預期流行率3%），將采樣數(shù)量按照存欄比例分配到不同棟舍后隨機抽樣；其他雞只按照發(fā)現(xiàn)疫情公式計算采樣數(shù)量（置信度95%，預期流行率3%），將采樣數(shù)量按照存欄比例分配到不同群體和棟舍后隨機抽樣。

禽白血病P27抗原檢測采樣數(shù)量：采集蛋清。根據(jù)養(yǎng)殖場產(chǎn)蛋雞具體存欄量及產(chǎn)蛋情況，根據(jù)種雞存欄量，按照預期合格率公式計算采樣數(shù)量（置信度95%，預期合格率90%，相對誤差10%），將采樣數(shù)量按照存欄比例分配到不同群體和棟舍后隨機抽樣。

檢測試劑。禽白血病病毒抗體檢測試劑盒購自IDEXX公司，用于雞血清中ALV-A/B亞群的抗體檢測；禽白血病病毒J亞群抗體檢測試劑盒購自IDEXX公司，用于雞血清中ALV-J亞群的抗體檢測；禽白血病病毒ELISA抗原檢測試劑盒購自哈爾濱國生生物科技股份有限公司，用于檢測蛋清中p27蛋白。

檢測方法。各檢測項目的具體操作過程按照試劑盒說明書進行。

二、結果

1.山東省種雞場ALV檢測情況。此次禽白血病流行病學調查針對7個種雞場，分布于6個地市，共采集1298份血清和1000份蛋清，對于1298份血清樣品進行ALV-A/B和ALV-J亞群的抗體檢測，對于1000份蛋清進行p27抗原檢測。結果顯示，A/B亞群抗體陽性率為6.39%，其中有6個種雞場A/B亞群抗體陽性，占85.71%（6/7）；J亞群抗體陽性率為19.80%，7個種雞場ALV的J亞群抗體均呈陽性；p27抗原陽性率為0.10%，其中有1個種雞場p27抗原陽性，占20.00%（1/5），其余種雞場均未檢出。具體檢測結果見表1。

2.各種雞場ALV-A/B及ALV-J亞群感染情況。由表1可知，禽白血病A/B亞群抗體陽性率各種雞場存在差異，總陽性率為6.39%，被感染種雞場占比較高，7個種雞場，最高陽性率為36.73%，最低未檢出。禽白血病J亞群抗體陽性率各種雞場也存在差異，總陽性率為19.8%，且7個雞場均有不同程度的檢出，7個種雞場最高陽性率為52.00%，最低為1.00%。因此山東省內禽白血病A/B亞群和J亞群感染較普遍，且J亞群感染高于A/B亞群。

3.各種雞場禽白血病p27抗原檢測結果。由表1可知，禽白血病p27抗原總陽性率為0.10%，5個種雞場，最高陽性率為1.00%，最低未檢出，未檢出的種雞場占比較高。由此可知，采樣的種蛋ALV感染率較低，幾乎無感染，ALV凈化效果較好。

三、討論與結論

目前，在我國雞群中，ALV感染比較常見，該病會導致免疫抑制、生長遲緩、產(chǎn)蛋率下降等情況出現(xiàn)，給我國家禽業(yè)造成較大經(jīng)濟損失，因而必須對ALV采取較嚴格的凈化措施。目前，對于ALV凈化主要是通過對待檢雞群進行病毒分離或者通過檢測不同樣品中p27抗原確定陽性個體進而淘汰。

此次流行病學調查顯示，7個種雞場的ALV-A/B亞群和ALV-J亞群抗體陽性率分別為6.39%和19.80%，ALV-J亞群抗體水平明顯高于ALV-A/B亞群抗體水平，因此山東省內ALV感染以J亞群為主，而ALV-J的致病性和傳染性要比其他亞群ALV強得多，這就提醒我們要加強禽白血病的監(jiān)測力度，持續(xù)推進檢疫凈化。p27抗原檢測陽性率僅為0.10%，且僅有一個種雞場出現(xiàn)一例陽性，根據(jù)凈化標準，這說明山東省內ALV凈化效果較好。

但與此同時，我們可以看到其與相應的ALV-A/B亞群和ALV-J亞群抗體檢測水平相矛盾，可能是由以下幾點原因導致：第一，檢測方法問題。此次檢測使用IDEXX的抗體檢測試劑盒，工作原理是酶聯(lián)免疫吸附試驗法，該方法在臨床上有一定的假陽性率，且無法保證試劑的準確性。因此，目前原種雞場禽白血病凈化評估標準為禽白血病p27抗原檢測陽性率，若全為陰性，則判定為達到禽白血病凈化狀態(tài)，若陽性率高于1%，則判定為未達到凈化狀態(tài)，若陽性率介于0～1%，則需通過病毒分離鑒定是否有陽性出現(xiàn)。第二，血清樣品和種蛋樣品來源不同。血清樣品與種蛋樣品有可能來自不同棟舍，血液樣品通過隨機抽樣在不同棟舍按一定比例進行采集，而種蛋可能是來自某一確定已凈化ALV的棟舍，導致此檢測結果的出現(xiàn)。

因此，在采樣時應有專人現(xiàn)場采樣或現(xiàn)場監(jiān)督采樣，隨機抽檢，保證采集樣品的有效性，能夠反應整體感染情況。并且在實施種禽場禽白血病凈化后應定時抽檢、隨機抽檢，以保證凈化效果。

禽白血病的凈化是一個復雜的過程，涉及多方主體，養(yǎng)殖場、市場等應互相配合、互相監(jiān)督，共同促進ALV凈化。在實施凈化過程中，最重要的一點就是要做到在每個世代盡最大可能檢出和淘汰外源性ALV檢測陽性的帶毒雞，并且不同檢測方法靈敏度不同適用情況不同，在凈化過程中需采取不同檢測方法，增加檢測次數(shù)，從而提高檢出率，最大程度縮短凈化周期。

表1 山東種雞場禽白血病流行病學調查結果