譯校│劉林青 張淼潔 翟新驗

一、疫病描述

1.非洲豬瘟。非洲豬瘟（ASF）是一種高度傳染的病毒性出血性疫病，感染豬科動物，包括家豬、野豬和歐亞野豬。非洲野豬，如疣豬和灌木豬，可以作為病毒的自然宿主，不表現(xiàn)出疫病的癥狀。ASF病毒引起的感染類型包括最急性型、急性型、亞急性型和慢性型。從感染中恢復(fù)過來的豬只可能會成為病毒攜帶者，持續(xù)被感染。非洲鈍緣軟蜱是病毒的自然節(jié)肢動物宿主。ASF對人畜共患的危害可以忽略不計，沒有證據(jù)表明ASF病毒會感染人。該病在非洲地區(qū)流行。ASF的死亡率高，在沒有ASF的國家暴發(fā)，會嚴(yán)重影響?zhàn)B豬產(chǎn)業(yè)，限制生豬和豬肉產(chǎn)品的出口，增加控制和根除的成本。目前，沒有有效的疫苗或治療方法。

2.經(jīng)典豬瘟。經(jīng)典豬瘟（CSF）是由黃病毒科瘟病毒屬的包膜RNA病毒引起的一種高度傳染的病毒性敗血癥，并且只感染豬。該病有幾種臨床表現(xiàn)，包括急性、慢性和先天性感染，臨床表現(xiàn)取決于宿主先前接觸病毒的方式、病毒毒力（高、中、低）和宿主因素，如年齡和營養(yǎng)狀態(tài)。年幼的動物通常比大齡動物更容易受到嚴(yán)重的影響，死亡率可能高達90%；在較大的豬中，感染表現(xiàn)通常是輕微的甚至是亞臨床的。幼豬更容易受到嚴(yán)重影響，更有可能出現(xiàn)經(jīng)典的急性癥狀。然而，經(jīng)典的急性癥狀表現(xiàn)很少見。相反，更多是中度癥狀占主導(dǎo)地位。流行的CSF病毒具有中度或低度毒力，使得臨床診斷變得困難，特別是在大齡豬中難以診斷。低毒力毒株通常會導(dǎo)致輕度感染或亞臨床感染癥狀，長時間難以被發(fā)現(xiàn)。CSF感染會出現(xiàn)白細胞減少癥、白細胞數(shù)量下降等臨床表現(xiàn)。雖然很多國家已經(jīng)根除了CSF，但在世界許多地方依然流行。雖然可以使用CSF疫苗，但對于無疫情的國家，一旦發(fā)生疫情仍然會嚴(yán)重影響?zhàn)B豬生產(chǎn)，并且限制生豬和豬肉產(chǎn)品的出口，以及增加控制和根除的成本。

二、監(jiān)測目的

ASF在亞洲和歐洲的擴散以及加勒比和美國南部的CSF的增加，使得美國加強了對疫病傳入的關(guān)注。如果這些疫病傳入，可能會造成美國疫病形勢的復(fù)雜，因為這兩種疫病的臨床表現(xiàn)類似于美國生豬生產(chǎn)中流行的其他疫病。因此，美國農(nóng)業(yè)部動植物衛(wèi)生檢驗局獸醫(yī)服務(wù)機構(gòu)（VS）提出針對高風(fēng)險群體（病豬和死亡事件）的ASF和CSF監(jiān)測計劃，目的是增強對這兩種疫病的預(yù)警和應(yīng)急儲備。這個文件是基于當(dāng)前兩種疫病的診斷和監(jiān)測方法的一個監(jiān)測計劃。

三、監(jiān)測目標(biāo)

1.目標(biāo)1：加強ASF和CSF監(jiān)測預(yù)警能力和應(yīng)急儲備。當(dāng)前ASF的監(jiān)測預(yù)警依賴于基于可疑病例的被動報告系統(tǒng)。隨著國家動物衛(wèi)生實驗室網(wǎng)絡(luò)提供診斷樣品（即扁桃體和脾臟組織）用于實時熒光PCR（rPCR），對ASF的監(jiān)測可以與目前的CSF監(jiān)測工作相結(jié)合，實施主動監(jiān)測計劃。這種整合計劃加強了在國家一級監(jiān)測ASF和CSF傳入風(fēng)險的能力，提高應(yīng)急儲備。境外動物疫病暴發(fā)（包括ASF和CSF）可能會嚴(yán)重考驗大批量樣品采集、實驗室檢測容量和數(shù)據(jù)管理的能力。通過開展有針對性的主動監(jiān)測項目，建立監(jiān)測系統(tǒng)可以以較低的樣本量提供有效的數(shù)據(jù)支撐。及時持續(xù)的監(jiān)測也可以提供沒有疫病時的數(shù)據(jù)基線，在疫情暴發(fā)開始時協(xié)助進行情景評估。最近的陰性檢測結(jié)果至少可以提供短期無疫的證據(jù)。有這些數(shù)據(jù)也可以減少在疫情暴發(fā)初始，為評估疫情影響范圍而開展的監(jiān)測量。

2.目標(biāo)2：證明無ASF和CSF。除了提高監(jiān)測預(yù)警能力外，該監(jiān)測計劃旨在提供繼續(xù)支持美國無ASF和CSF的證據(jù)。這個可以從下面的介紹的各種監(jiān)測方式中獲得支持，無須額外從其他非目標(biāo)監(jiān)測中獲得樣本。

四、預(yù)期成果

預(yù)期成果包括產(chǎn)品、決策和行動。

1.產(chǎn)品。監(jiān)測報告將每季度和每年匯總一次。

表1 利益相關(guān)者及其責(zé)任和利益

2.評估。監(jiān)測系統(tǒng)將在第一年后評估，此后每3年一次。

3.決策和行動。評估和報告將用于支持本國無疫聲明，并用于調(diào)整防控疫病傳入的準(zhǔn)備。發(fā)生任何重大變化，如ASF或CSF對美國威脅的變化、疫病診斷水平的變化或者養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)的變化，均應(yīng)該對該監(jiān)測計劃進行審查和修改。

五、利益相關(guān)者和責(zé)任

該計劃的利益相關(guān)者和責(zé)任見表1。

六、監(jiān)測群體

該計劃重點關(guān)注美國三類豬群的監(jiān)測，包括大型商品豬群、高風(fēng)險（生物安全較弱）的豬群和野豬。所有豬群均要通過觀察進行監(jiān)測，如果臨床癥狀與ASF或CSF病例定義一致，應(yīng)立即啟動境外動物疫病調(diào)查。

1.商品豬。商品豬將通過以下方式進行監(jiān)測：獸醫(yī)診斷實驗室提交的與病例定義相符的病豬；與病例定義相符的屠宰樣本；在聚集點發(fā)現(xiàn)的病豬或死豬的組織樣本；高風(fēng)險（生物安全較低）農(nóng)場的豬；提交的垃圾（泔水）飼料；服務(wù)于高風(fēng)險豬場的市場樣本；具有潛在或已知野豬暴露的豬群。

2.野豬：野生動物服務(wù)機構(gòu)收集的樣本。由于對ASF的檢查是通過實時熒光PCR（rPCR）進行檢測抗原，檢測那些沒有臨床癥狀的健康豬將沒有診斷價值，因為健康動物體內(nèi)難以檢出ASF病原。因此，對病豬進行采樣可以提高發(fā)現(xiàn)疫病的可能性。

雖然對ASF和CSF的rPCR檢測僅限于有臨床癥狀的動物，但是豬群仍要做CSF血清學(xué)監(jiān)測。因為有些CSFV毒株可能無法使動物產(chǎn)生明顯的臨床癥狀，但仍然需要監(jiān)測CSF抗體水平。

七、病例定義

注意：如果暴發(fā)ASF或CSF疫情，可以在指示病例后修改病例定義。病例定義也會根據(jù)其他信息的增加或者根除的需要進行修改。

1.非洲豬瘟案例定義和報告標(biāo)準(zhǔn)。疑似病例：具有與ASF臨床癥狀和流行病學(xué)特點一致的動物。

推定陽性病例：國家獸醫(yī)服務(wù)機構(gòu)實驗室（NVSL）的境外動物疫病診斷實驗室（FADDL）或國家動物衛(wèi)生實驗室網(wǎng)絡(luò)實驗室對疑似病例通過非陰性篩查PCR檢測為陽性，或NVSL的FADDL對疑似病例的檢測，通過兩種不同的抗體檢測方法，結(jié)果都為陽性。

確診陽性病例：NVSL的FADDL或農(nóng)業(yè)部指定的實驗室分離出ASF病毒，或推定陽性病例，NVSL和FADDL對推定陽性的動物進行抗原檢測為陽性。

2.經(jīng)典豬瘟病例定義和報告標(biāo)準(zhǔn)。疑似病例：豬或豬群臨床表現(xiàn)、發(fā)病史或流行病學(xué)特征符合經(jīng)典豬瘟；或在常規(guī)監(jiān)測期間采集的樣本，PCR陽性或者不確定，同時實驗室診斷（測序信息或驗證實驗）或流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果待定；或在常規(guī)監(jiān)測期間采集的樣本抗體酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）為陽性，以及隨后的免疫過氧化物酶（IP）和病毒中和（VN）實驗陽性，但沒有CSF流行病學(xué)信息或臨床癥狀。

推定陽性病例：FADDL對rPCR/RT-PCR陽性的可疑病例（有或沒有臨床癥狀和/或流行病學(xué)特點）重復(fù)rPCR/RT-PCR結(jié)果為陽性或基因組測序為CSF；豬或豬群的流行病學(xué)信息和/或臨床表現(xiàn)符合CSF特點，并且同時滿足rPCR或RT-PCR陽性，或組織樣本ABC檢測陽性，或IP-VN檢測陽性。

確診陽性病例：由NVSL的FADDL或農(nóng)業(yè)部指定實驗室分離出CSF病毒并測序驗證。

八、數(shù)據(jù)來源和采樣方法

在任何情況下采集死豬樣品時，應(yīng)收集全套組織，包括扁桃體、淋巴結(jié)、肺、腎、脾、肝、心臟、血清和全血。目前，只有扁桃體、脾臟、淋巴結(jié)和全血樣本被批準(zhǔn)在國家動物衛(wèi)生實驗室網(wǎng)絡(luò)實驗室用于ASF檢測；同樣對于CSF，只有扁桃體、脾臟和淋巴結(jié)樣本可以用來檢測。如果在國家動物衛(wèi)生實驗室網(wǎng)絡(luò)實驗室中出現(xiàn)非陰性結(jié)果，那么收集者將提交其他組織樣品給FADDL用于檢測。

1.境外動物疫病被動監(jiān)測。任何符合病例定義的動物或群體都應(yīng)作為可疑病例報告給當(dāng)?shù)刂莺吐?lián)邦動物衛(wèi)生官員，報告者包括那些與豬相關(guān)的人（包括美國農(nóng)業(yè)部食品安全檢驗局內(nèi)部人員、生產(chǎn)者和私人獸醫(yī)）。該報告將啟動境外動物疫病診斷學(xué)家（FADD）的境外動物疫病調(diào)查。有關(guān)其他信息請參閱獸醫(yī)服務(wù)指南12001。至少，從活豬收集的標(biāo)本是血清、扁桃體刮樣和全血（乙二胺四乙酸和肝素）。如果可以，至少應(yīng)對一頭豬（最好是10頭豬）進行尸檢，并收集以下組織：扁桃體、脾臟、淋巴結(jié)和腎臟。為了最大化的發(fā)現(xiàn)侵入美國的ASF，對外來病調(diào)查中發(fā)現(xiàn)的野豬非創(chuàng)傷性發(fā)病和死亡事件，需要采集野豬樣品。

2.主動監(jiān)測。

（1）提交給VDL的病豬。向VDL提交的大部分豬組織來自有臨床病癥美國商品豬，ASF和CSF應(yīng)該被視為鑒別診斷的病例。因為標(biāo)本肯定來自臨床病豬，這些樣本有最高的監(jiān)測價值，可以提高ASF和CSF的監(jiān)測預(yù)警能力。

在VS監(jiān)測合作國家動物衛(wèi)生實驗室網(wǎng)絡(luò)實驗室，以下選擇標(biāo)準(zhǔn)將用于確定ASF和ASF的合格病例。如果符合以下條件，提交的任何豬只均有資格進行檢測，提交的病料有以下任何組織樣品之一（按優(yōu)先順序排列）：扁桃體；脾臟；淋巴結(jié)。同時，觀察到和/或報告過以下一種或多種病變或群體發(fā)病史：超急性敗血癥；皮膚變色；出血或淋巴結(jié)腫大；脾臟腫大；腎臟瘀點；鼻出血；流產(chǎn)；結(jié)腸紐扣樣潰瘍；扁桃體病變（扁桃體炎、出血性病變和壞死病灶等）；未確診的中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）病例（尤其是先天性神經(jīng)系統(tǒng)震顫和非膿性腦炎）；畜群死亡率高于既定基線且至少有1種ASF或CSF臨床癥狀；病理學(xué)家因懷疑ASF或CSF而提交其他臨床嚴(yán)重或組織病理學(xué)相符的病例。

（2）屠宰場和聚集點監(jiān)測。屠宰場（包括屠宰場、烘烤場所）和豬聚集點采集的病豬或死豬的樣本是ASF和CSF屠宰監(jiān)測的主要目標(biāo)。聚集點包括市場上生豬采購點，不合格的商品豬和公豬。在聚集點和終端牲畜市場或屠宰場發(fā)病、垂死或死亡動物應(yīng)通過VS現(xiàn)場操作或州動物衛(wèi)生部門取樣；收集的樣本包括扁桃體、脾臟和淋巴結(jié)。以下是屠宰場的選擇標(biāo)準(zhǔn)，所有樣本應(yīng)提交給ASF和CSF認(rèn)可的國家動物衛(wèi)生實驗室網(wǎng)絡(luò)實驗室。

對于CSF，屠宰監(jiān)測的目標(biāo)還包括豬只較多或傳入CSF風(fēng)險較大的烤肉市場和屠宰場。烘焙市場可能包括不合格的豬只或較小的豬只。全國烤肉市場應(yīng)進行抽樣調(diào)查，尤其要注意佛羅里達州和得克薩斯州的烘焙市場。由于這兩個地區(qū)靠近當(dāng)前CSF流行的地區(qū)（加勒比海和中美洲），疫病傳播的可能性較高。血清、扁桃體、脾臟和淋巴結(jié)樣本應(yīng)進行采集；血清樣本應(yīng)提交FADDL進行CSF血清學(xué)檢測。

選擇標(biāo)準(zhǔn)。出于以下原因而宰殺的豬只應(yīng)提交給指定的VS監(jiān)測合作國家動物衛(wèi)生實驗室網(wǎng)絡(luò)實驗室，由國家相關(guān)人員進行指導(dǎo)：皮膚和耳朵變色（類似于豬丹毒感染）；敗血癥；出血性淋巴結(jié)；脾臟腫大；腎病；鼻出血；彎腰；瀕死狀態(tài)；高熱（豬只可能擠成一團）；扁桃體病理變化（扁桃體炎、出血性病變和壞死灶等）；中樞神經(jīng)系統(tǒng)體征（動作不協(xié)調(diào)、劃動、盤旋、頭部傾斜、精神錯亂）。

3.對風(fēng)險高的豬群進行監(jiān)測。此類監(jiān)測包括較高風(fēng)險的農(nóng)場，無論是疑似或已知的風(fēng)險，例如已知和野豬接觸的豬群、私人屠宰場和泔水喂養(yǎng)的豬場。

從飼喂泔水豬中收集到的組織具有較高的樣本價值，例如豬只養(yǎng)殖過程中被喂食處理過的垃圾，包括肉類。喂肉和感染動物的其他產(chǎn)品是已知的造成ASF和CSF傳播的風(fēng)險因素。在美國，登記在案的飼喂泔水的豬場要定期進行檢查并由各州和聯(lián)邦動物衛(wèi)生局進行檢測。在這些檢查中，病豬或死豬應(yīng)由VS現(xiàn)場操作人員或州立動物取樣衛(wèi)生官員進行ASF和CSF檢測（至少全血、扁桃體、扁桃體刮樣、脾臟和淋巴結(jié)）。如果發(fā)現(xiàn)陽性，那些未登記的飼喂泔水的豬場也要進行檢測。這些來自飼喂泔水的樣品應(yīng)通過FADI流程發(fā)送到FADDL進行檢測。

上述場點還可能包含高風(fēng)險的豬群。生病、垂死或死亡的動物應(yīng)由VS現(xiàn)場操作人員或國家動物衛(wèi)生官員進行現(xiàn)場采樣；收集的樣品包括全血和扁桃體刮片（如果活著），脾臟、扁桃體和淋巴結(jié)。這些樣品應(yīng)送到ASF和CSF認(rèn)可的國家動物衛(wèi)生實驗室網(wǎng)絡(luò)實驗室進行檢測。

已知或疑似野豬接觸的豬群可以作為野豬傳播疫病的前哨。因此，如果已知或疑似野豬接觸的豬群出現(xiàn)發(fā)病或者死亡的，至少要采集全血、脾臟、扁桃體、扁桃體刮樣以及淋巴結(jié)樣本。這些樣品應(yīng)通過FADI流程發(fā)送到FADDL進行檢測。

佛羅里達州、得克薩斯州和波多黎各的豬群被疫病傳入的風(fēng)險更高，因為這些州靠近目前有CSF流行的地區(qū)（加勒比和中美洲）。這些動物可能會以很小規(guī)模的方式飼養(yǎng)，如臨時飼養(yǎng)的豬或通過非法船只偷渡到達的人或動物。對于波多黎各，在接到非法船只著落通知后28天的第四次訪問中，非法船只登陸3千米以內(nèi)的豬場應(yīng)進行常規(guī)CSF監(jiān)測。應(yīng)對活體動物進行血清樣本采集、對死亡動物進行扁桃體樣本采集。所有樣本都應(yīng)寄到FADDL進行檢測。

除了針對ASF和CSF的抽樣建議外，應(yīng)向高危動物所有者提供聯(lián)系方式和教育材料，強調(diào)出現(xiàn)任何疫病暴發(fā)應(yīng)及時報告給檢查人員以進行快速跟進。

選擇標(biāo)準(zhǔn)。以下臨床體征應(yīng)作為對病豬采樣的指南：發(fā)燒；增加脈搏和呼吸頻率；嗜睡/精神萎靡；厭食癥；臥式；嘔吐；腹瀉；眼藥水；流產(chǎn)；通常表現(xiàn)出皮膚發(fā)紅的白豬；協(xié)調(diào)；未確診的中樞神經(jīng)系統(tǒng)病例（特別是先天性震顫和非化膿性腦炎）。

4.野豬監(jiān)測。野豬的主動監(jiān)測僅限于持續(xù)檢測血清樣本中的CSF，以排除可能發(fā)生的暴露。所有樣品均應(yīng)提交給FADDL用于檢測。

九、樣品數(shù)量

表2按來源列出了初始的年度建議樣本數(shù)。樣本數(shù)量基于CSF監(jiān)測系統(tǒng)中當(dāng)前的樣本收集數(shù)量，并基于來自VDL的反饋進行修改。請注意，對來VDL提交的病豬，應(yīng)對其組織樣品同時進行ASF和CSF的檢測。

表2 按來源列出的建議樣本數(shù)