丁嬌，倪建強，李寅旻△

糖尿病周圍神經(jīng)病變（DPN）是糖尿病患者致殘的常見原因，給患者生活和身心健康均造成巨大影響［1］。DPN是一個隱匿、漸進的過程，通常在癥狀尚未出現(xiàn)時已出現(xiàn)病理性改變，部分患者在疾病進展至一定階段時才會出現(xiàn)周圍神經(jīng)功能障礙，臨床上DPN診斷延遲的現(xiàn)象較為普遍，因此尋找有效的生物標志物用于輔助臨床篩查、診斷DPN具有重要的意義［2］。纖維凝膠蛋白-3（Ficolin-3）是機體天然免疫防御中的重要分子，可介導(dǎo)補體系統(tǒng)的激活。有研究顯示，F(xiàn)icolin-3在糖尿病患者血清中異常表達，且對疾病有較高的輔助診斷價值［3］。S100B是一種鈣結(jié)合蛋白，在神經(jīng)組織中含量豐富，常作為神經(jīng)損傷的生物標志物，其可通過介導(dǎo)炎癥反應(yīng)、調(diào)節(jié)胰島素敏感性等參與糖尿病的發(fā)生、發(fā)展［4］。目前關(guān)于Ficolin-3、S100B在DPN患者中的研究較少，本研究旨在探討2種指標在DPN患者血清中的表達情況及其對疾病的輔助診斷價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象選取2019年1月—2020年2月在蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院接受治療的2型糖尿病患者126例。納入標準：（1）符合中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)分會《中國2型糖尿病防治指南（2017年版）》2型糖尿病以及DPN的診斷標準。（2）臨床資料完整，均完成本研究需要的相關(guān)檢測。排除標準：（1）伴有其他原因誘發(fā)的周圍神經(jīng)病變。（2）嚴重感染者。（3）患有惡性腫瘤。（4）近期有糖皮質(zhì)激素用藥史。（5）心絞痛、急性冠狀動脈綜合征、心力衰竭者。（6）肝腎功能異常者。（7）腦卒中病史者。（8）患有自身免疫性疾病。126例患者中68例單純2型糖尿病患者納入糖尿病組，58例2型糖尿病合并DPN患者納入神經(jīng)病變組。另選取同期在我院體檢的健康人群40例作為對照組。患者及其家屬對本研究均知情同意。

1.2 臨床資料收集及生化指標檢測收集所有研究對象的性別、年齡、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）、病程等資料。所有2型糖尿病患者在入院時抽取空腹靜脈血，對照組在體檢時抽取空腹靜脈血，采用全自動生化分析儀（日立，7600）檢測腎功能指標［肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）］、肝功能指標［天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）］、血脂指標［總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）］。采用免疫透射比濁法檢測超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）水平。采用氧化酶法測量空腹血糖（FBG），化學(xué)發(fā)光法測量空腹胰島素水平，并計算穩(wěn)態(tài)模型評估胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測血清Ficolin-3與S100B水平，試劑盒購自上海信裕生物科技有限公司。采用肌電誘發(fā)電位儀（Nicollet公司，VikingⅣ）檢測糖尿病患者正中神經(jīng)的運動神經(jīng)傳導(dǎo)速度（MNCV）和感覺神經(jīng)傳導(dǎo)速度（SNCV）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 22.0分析數(shù)據(jù)，符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，2組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，多重比較采用LSD-t檢驗。計數(shù)資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。采用多因素Logistic回歸方程分析2型糖尿病患者并發(fā)DPN的危險因素，回歸過程采用逐步后退法，設(shè)定α剔除=0.10，α入選=0.05，Pearson法進行相關(guān)性分析，采用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清Ficolin-3與S100B對DPN的輔助診斷價值。檢驗水準α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 3組研究對象臨床指標比較3組性別、年齡、DBP、BMI、HDL-C、Scr、BUN、AST、ALT比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；神經(jīng)病變組SBP、FBG、HOMA-IR、hs-CRP、S100B水平高于糖尿病組和對照組，F(xiàn)icolin-3水平低于糖尿病組和對照組（P＜0.05），神經(jīng)病變組的病程長于糖尿病組，MNCV、SNCV慢于糖尿病組（P＜0.05），見表1。

2.2 2型糖尿病患者并發(fā)DPN的危險因素以糖尿病組和神經(jīng)病變組資料為樣本建立非條件Logistic回歸模型，以2型糖尿病患者是否并發(fā)DPN為因變量（是=1，否=0）。結(jié)合本研究目的及臨床實際，納入FBG、hs-CRP、MNCV、SNCV、Ficolin-3、S100B等6個指標為自變量（均以各自中位數(shù)為界進行賦值）。最終結(jié)果顯示，hs-CRP≥2.1 mg/L、MNCV≤50 m/s、SNCV≤47 m/s、S100B≥200 ng/L是2型糖尿病患者并發(fā)DPN的危險因素（P＜0.05），而Ficolin-3≥22μg/L則是DPN的保護因素（P＜0.05）。見表2。

2.3 DPN患者血清Ficolin-3、S100B、MNCV和SNCV的相關(guān)性血清Ficolin-3與MNCV、SNCV呈正相關(guān)，與S100B呈負相關(guān)；血清S100B與hs-CRP呈正相關(guān)，與MNCV、SNCV均呈負相關(guān)，見表3。

Tab.1 Comparison of clinical indexes between three groups表1 3組研究對象臨床指標比較

Tab.2 The Logistic regression results of influencing factors of DPN in patients with type 2 diabetes mellitus表2 2型糖尿病患者并發(fā)DPN的影響因素的Logistic回歸結(jié)果

Tab.4 The clinical values of Ficolin-3 and S100B in auxiliary diagnosis of DPN表4 Ficolin-3與S100B輔助診斷DPN的臨床價值

Fig.1 ROC curves of diagnostic values of serum S100B and Ficolin-3 for DPN圖1血清S100B和Ficolin-3對DPN的診斷價值分析的ROC曲線

Tab.3 Correlation analysis of serum Ficolin-3,S100B and clinical indexes in patients with DPN表3 DPN患者血清Ficolin-3、S100B與臨床指標的相關(guān)性分析

2.4 血清Ficolin-3與S100B對DPN的診斷價值以神經(jīng)病變組為陽性樣本，糖尿病組為陰性樣本，建立ROC診斷分析模型。結(jié)果顯示，F(xiàn)icolin-3與S100B診斷DPN的ROC曲線下面積（AUC）分別為0.747、0.734。Ficolin-3與S100B聯(lián)合應(yīng)用時進一

3 討論

步提高了對DPN的診斷價值，AUC為0.819。見表4、圖1。

糖尿病患者存在明顯的糖代謝紊亂，自從胰島素問世之后患者的高血糖癥狀已得到較好控制，糖尿病急性并發(fā)癥已較少發(fā)生，但DPN、糖尿病腎病、糖尿病視網(wǎng)膜病變等慢性并發(fā)癥依然有較高的發(fā)生率［5］。約有60%的2型糖尿病患者會并發(fā)DPN，且高達10%～20%的患者在診斷糖尿病時就存在DPN［6］。目前臨床主要通過臨床癥狀以及神經(jīng)肌電圖診斷DPN，但部分患者無明顯的臨床癥狀，而神經(jīng)肌電圖檢查通常只能選擇大的有髓纖維檢測，具有一定的局限性，因此探究客觀、有效的輔助診斷方法具有一定的臨床意義。

Ficolin-3是纖維凝膠蛋白家族的一員，又被稱為H-ficolin，其主要表達在肝臟和肺臟，參與機體補體系統(tǒng)的激活［7］。補體系統(tǒng)在體內(nèi)參與抗微生物防御反應(yīng)，是重要的天然免疫防線，其可通過經(jīng)典途徑、凝集素途徑和旁路途徑進行激活，其中凝集素途徑可由甘露糖結(jié)合凝集素和纖維凝膠蛋白所激活［8］。雖然補體系統(tǒng)可以保護機體免受外來物質(zhì)的侵害，但過度激活又會在一定程度損傷機體，從而引發(fā)各類疾病［9］。Ghosh等［10］發(fā)現(xiàn)，糖尿病患者的補體調(diào)節(jié)蛋白CD55、CD59易失活，在此基礎(chǔ)上高血糖誘導(dǎo)的補體信號激活可導(dǎo)致膜攻擊復(fù)合物在組織中沉積，進而促進糖尿病微血管并發(fā)癥的發(fā)生。本研究結(jié)果顯示，F(xiàn)icolin-3在DPN患者血清中表達降低，這與Zhang等［11］的研究結(jié)果一致，提示Ficolin-3可能參與了DPN的發(fā)生、發(fā)展。目前Ficolin-3調(diào)節(jié)DPN進展的具體作用機制尚不明確，一般在高糖環(huán)境下，機體可通過其他途徑促進補體激活，DPN患者的Ficolin-3表達過高易導(dǎo)致疾病加重。然而，實際檢測時發(fā)現(xiàn)DPN患者的Ficolin-3表達反而更低，筆者分析這可能是機體的一種代償機制，即通過某種途徑降低了Ficolin-3的表達，以拮抗Ficolin-3介導(dǎo)的補體激活對疾病發(fā)展的促進作用，但這還有待基礎(chǔ)研究進行驗證。

S100蛋白超家族是終末糖基化產(chǎn)物（RAGE）受體的配體，而S100B是S100蛋白家族中最具有活性的成員，可形成四聚體、六聚體及高階低聚體［12］。體外實驗證實，S100B可與RAGE結(jié)合，并通過RAGE介導(dǎo)下游信號通路發(fā)揮生物學(xué)作用［13］。S100B可以活化RAGE調(diào)節(jié)的核轉(zhuǎn)錄因子（NF）-κB等炎癥通路，促進炎癥因子分泌，加重機體的炎癥反應(yīng)［14］。另一方面，RAGE可活化NAD（P）H氧化酶，進而產(chǎn)生大量的活性氧，促進機體的氧化應(yīng)激反應(yīng)［15］。本研究結(jié)果顯示，S100B在DPN患者血清中表達升高，這與Afarideh等［16］研究結(jié)果一致。此外S100B與hs-CRP呈正相關(guān)，與MNCV、SNCV、Ficolin-3均呈負相關(guān)，多因素分析還顯示，S100B升高是2型糖尿病患者并發(fā)DPN的危險因素，這提示S100B可能通過與RAGE結(jié)合促進機體的炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)，進而參與DPN的發(fā)生、發(fā)展。本研究還發(fā)現(xiàn)，血清Ficolin-3與S100B對DPN的診斷價值較高，尤其是聯(lián)合應(yīng)用時診斷價值進一步提升，提示兩者可用于輔助臨床診斷DPN。

綜上所述，血清Ficolin-3與S100B均在DPN中呈異常表達，較高水平的S100B是2型糖尿病患者并發(fā)DPN的危險因素，而較高水平的Ficolin-3則是保護因素，兩指標對DPN均有一定的輔助診斷價值。然而本研究僅為小樣本量的單中心研究，也未分析兩指標在治療前后的動態(tài)變化情況，因此還有待后續(xù)的研究進行完善；除DPN外，F(xiàn)icolin-3、S100B與糖尿病腎病、糖尿病視網(wǎng)膜病變等微血管病變的關(guān)系也有待探究。