高建民

（遼寧省朝陽市疾病預(yù)防控制中心微生物檢測(cè)所，遼寧 朝陽 122000）

手足口病是一種常見于兒童的傳染性疾病，患兒的主要癥狀為發(fā)熱、口腔及四肢皰疹等，具有自限性且患兒的預(yù)后較少，但也有部分患兒并發(fā)腦炎、肺水腫等并發(fā)癥，進(jìn)展速度快且病死率高，對(duì)患兒的生命安全造成了較大的威脅[1]。該病一年四季均可發(fā)生，且在學(xué)校、托兒所等場(chǎng)所容易爆發(fā)。該病的病原體為腸道病毒，具有較高的傳染性，其主要是通過糞口傳播，傳播速度快且控制難度大，容易在短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)大范圍流行的情況[2]。盡早治療對(duì)于改善手足口病患兒的預(yù)后情況具有重要的現(xiàn)實(shí)意義，但是從目前現(xiàn)狀來看，由于多數(shù)手足口病患兒的癥狀較輕且癥狀不典型，臨床診斷中存在較大的困難，因此通過實(shí)驗(yàn)室檢查鑒別診斷手足口病具有重要的現(xiàn)實(shí)意義[3]。目前對(duì)于該病臨床實(shí)驗(yàn)室診斷主要是通過腸道病毒核酸檢查以及抗體檢查實(shí)現(xiàn)，文章主要通過比較單獨(dú)腸道病毒核酸檢查以及單獨(dú)抗體檢查與這兩種方法的聯(lián)合檢查的結(jié)果，分析不同檢查方法的診斷價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月至2020年6月我院收治的200例手足口病患兒，入選患兒均符合衛(wèi)生部門發(fā)布的《手足口病診療指南》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。200例患兒中，男性109例，女性91例，平均年齡（5.62±1.10）歲，臨床癥狀有發(fā)熱、皰疹、食欲缺乏。

1.2 方法 所有患兒均行腸道病毒核酸檢測(cè)以及抗體檢測(cè)。腸道病毒核酸檢測(cè)的具體方法：入院時(shí)采集患兒的糞便樣本，采集后放置于4 ℃冰箱中，并在48 h內(nèi)送檢。本次研究使用北京中海生物科技有限公司生產(chǎn)的EV71-RNA檢測(cè)試劑盒以及CA16-RNA檢測(cè)試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作?？贵w檢測(cè)的具體方法：清晨空腹采集3 mL肘靜脈血，以2500 r/min速率離心10 min，采集血清樣本并放置于-20 ℃冰箱中待檢。使用上海生物制品研究所生產(chǎn)的EV71-IgM抗體試劑盒以及CA16-IgM抗體試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.3 觀察指標(biāo) 比較單獨(dú)腸道病毒核酸檢測(cè)、抗體檢測(cè)以及腸道病毒核酸聯(lián)合抗體檢測(cè)的結(jié)果。并對(duì)兩種檢測(cè)方法的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行一致性分析，觀察腸道病毒核酸檢測(cè)與抗體檢測(cè)的吻合程度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)本文數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，檢測(cè)陽性率等計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，組間比較行χ2檢驗(yàn)；腸道病毒核酸與抗體檢測(cè)的一致性采用Kappa檢驗(yàn)。以P＜0.05時(shí)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三種檢測(cè)方法的檢測(cè)結(jié)果比較 200例患兒行腸道病毒核酸檢測(cè)的陽性率為73.0%，行抗體檢測(cè)的陽性率為72.0%，兩種檢測(cè)方法檢測(cè)陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；腸道病毒核酸聯(lián)合抗體檢測(cè)的陽性率為93.0%，明顯高于單獨(dú)腸道病毒核酸檢測(cè)以及單獨(dú)抗體檢測(cè)（P＜0.05）。見表1。

表1 三種方法的檢測(cè)結(jié)果比較

2.2 腸道病毒核酸與抗體檢測(cè)的一致性分析 通過腸道病毒核酸與抗體檢測(cè)的一致性分析，Kappa=0.935，P＜0.05，提示腸道病毒核酸與抗體檢測(cè)具有較高的吻合性。

3 討 論

手足口病是兒科常見的傳染病，臨床最常見的病原體為EV71、CA16，常見于5歲以下兒童，主要癥狀為手、足、口等部位出現(xiàn)丘疹，多數(shù)患兒的癥狀較輕，1周內(nèi)可痊愈，但也有部分患兒并發(fā)腦炎、肺水腫等并發(fā)癥，導(dǎo)致患兒死亡，尤其是嬰幼兒，因此需要盡早給予診斷和治療，改善重癥手足口病患兒的預(yù)后情況[4]。

臨床研究指出重型手足口病常見于3歲以下兒童，本次研究中200例患兒中僅有22例重癥患兒，年齡為6個(gè)月～4歲，平均年齡為（2.01±0.42）歲，所占比例為11.00%，由此可見重型手足口病患兒常見于嬰幼兒，可能是由于嬰幼兒免疫功能發(fā)育不成熟，是手足口病的高風(fēng)險(xiǎn)人群，因此需要加強(qiáng)嬰幼兒的衛(wèi)生管理，尤其是托兒所、幼兒園的衛(wèi)生管理[5]。本次研究中200例患兒均出現(xiàn)不同程度的皮疹，由此可見皮疹是該病的常見癥狀。在臨床診斷過程中，需要仔細(xì)查看患兒的臨床癥狀，做好其他疾病引起皮疹的鑒別診斷。臨床有研究指出，部分手足口病患兒無皮疹或皮疹在疾病中后期階段發(fā)生，因此容易出現(xiàn)誤診漏診的情況[6]。因此，在臨床診斷中需要仔細(xì)分析患兒的病情狀況，盡早進(jìn)行病原體檢測(cè)，從而診斷患兒的疾病，盡早治療。

引起手足口病的腸道病毒有很多，其中以EV71與CA16型在臨床中的檢出率最高，兩種病原體均為腸道病毒屬成員，其中EV71型感染容易引起重癥手足口病，也是造成患兒死亡的重要原因[7]。腸道病毒可通過多種途徑傳播，且具有較高的傳染性。但是臨床診斷中需要注意的是，雖然手足口病的臨床癥狀相似，但是引發(fā)手足口病的病原體不同，治療方法也存在著一定的差異，因此通過實(shí)驗(yàn)室檢查確定病原體對(duì)于臨床診斷與治療具有重要的現(xiàn)實(shí)意義[8]。

傳統(tǒng)病原學(xué)檢查采用的是病毒培養(yǎng)分離鑒定的方法，也是臨床診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但是該方法耗時(shí)長且對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及檢測(cè)技術(shù)要求較高，無法在基層推廣使用。目前臨床診斷手足口病常用的實(shí)驗(yàn)室方法為腸道病毒核酸檢測(cè)、抗體檢測(cè)、免疫組化檢測(cè)等方法，其中以腸道病毒核酸檢測(cè)、抗體檢測(cè)在臨床中的應(yīng)用范圍較廣，具有操作簡單、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的優(yōu)勢(shì)。

腸道病毒核酸檢測(cè)是一種通過檢測(cè)采集樣本中是否存在外來病毒核酸從而確定是否存在病毒感染的檢測(cè)方法。若檢測(cè)結(jié)果為陽性，則可以證明患者存在病毒感染[9]。本次研究中病毒核酸檢測(cè)使用的是逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法，樣本的采集、保存及轉(zhuǎn)運(yùn)、樣本核酸的提取和檢測(cè)、結(jié)果的判讀均須嚴(yán)格按照試劑盒說明書要求進(jìn)行，能夠獲得比較合理的檢測(cè)結(jié)果?？贵w檢測(cè)主要是觀察人體免疫應(yīng)答狀況，也是臨床診斷的常用方法，如一些自體免疫性疾病，其發(fā)生與自身免疫相關(guān)，可以檢測(cè)到自身抗體的升高；同時(shí)，在免疫缺陷病、免疫增生病以及病毒感染等疾病診斷中具有較好的應(yīng)用效果。雷錦輝和況群芳[10]通過研究發(fā)現(xiàn)，腸道病毒核酸檢測(cè)與抗體檢測(cè)的診斷符合率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但聯(lián)合檢測(cè)的診斷符合率明顯高于腸道病毒核酸檢測(cè)與抗體檢測(cè)（P＜0.05），由此可見腸道病毒核酸檢測(cè)與抗體檢測(cè)聯(lián)合檢測(cè)在手足口病患者病原學(xué)快速診斷方法中的應(yīng)用效果優(yōu)于腸道病毒核酸檢測(cè)與抗體檢測(cè)，這與本次研究結(jié)果存在一致性。本次研究中200例患兒行腸道病毒核酸檢測(cè)的陽性率為73.00%，行抗體檢測(cè)的陽性率為72.00%，兩種檢測(cè)方法的陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），這說明腸道病毒核酸與抗體檢測(cè)在手足口病臨床診斷中的檢出率相當(dāng)，均有相似的診斷價(jià)值；而本次研究中的腸道病毒核酸與抗體檢測(cè)聯(lián)合檢測(cè)的陽性率為93.00%，明顯高于單獨(dú)腸道病毒核酸檢測(cè)以及單獨(dú)抗體檢測(cè)（P＜0.05），由此可見腸道病毒核酸與抗體檢測(cè)的聯(lián)合檢測(cè)相比于單獨(dú)腸道病毒核酸與單獨(dú)抗體檢測(cè)來說，能夠進(jìn)一步提升手足口病的臨床檢出率，從而盡早發(fā)現(xiàn)和治療。本次研究通過腸道病毒核酸與抗體檢測(cè)的一致性分析，Kappa=0.935，P＜0.05，提示腸道病毒核酸與抗體檢測(cè)具有較高的吻合性，由此可見腸道病毒核酸與抗體檢測(cè)能夠聯(lián)合檢測(cè)，不會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述，手足口病是一種常見的傳染病，多發(fā)于兒童，傳播途徑復(fù)雜，傳播性較強(qiáng)，屬于丙類傳染病，若出現(xiàn)大范圍流行可導(dǎo)致患兒的身體健康受到影響，為了進(jìn)一步降低該病的發(fā)生率和病死率，需要盡早診斷和治療。病原學(xué)檢查在該病臨床診斷中具有重要的作用，本次研究通過觀察發(fā)現(xiàn)，腸道病毒核酸與抗體檢測(cè)在手足口病臨床診斷中均有著較好的應(yīng)用效果，通過聯(lián)合檢測(cè)的方式能夠進(jìn)一步提高手足口病的檢出率，從而減少漏診情況。