朱姝美
(常州市溧陽市中醫(yī)醫(yī)院病理科 江蘇 常州 213300)
近年來全球惡性腫瘤發(fā)病率以每年4%的速度快速增長,常見腫瘤類型包括肺癌、乳腺癌、前列腺癌等[1]。隨著國民生活方式的轉(zhuǎn)變和生活節(jié)奏的加快,國內(nèi)腫瘤病死率較高,嚴(yán)重威脅國民的身體健康[2]。臨床中早期檢出、及時治療是改善腫瘤患者預(yù)后的關(guān)鍵[3]。常規(guī)X 線、CT 等影像學(xué)檢查手段盡管能夠為醫(yī)師判斷腫瘤病例提供參考依據(jù),但容易出現(xiàn)漏診、誤診情況。為了探討更加高效、準(zhǔn)確的檢查方法,本文現(xiàn)就微波-標(biāo)記葡聚糖聚合法(LDP)免疫組化技術(shù)在腫瘤病理快速診斷中的應(yīng)用價值進(jìn)行了探索。
選取醫(yī)院2017 年7 月—2019 年7 月收治的腫瘤患者84 例?;颊吣?5 例,女39 例;年齡37 ~75 歲,平均(46.49±1.37)歲?;颊呔@知情權(quán)。使用材料包括德國Zeiss Libra 120透射電鏡;廣州萬孚生物有限公司提供的單(多)克隆抗體;DAKO 公司提供的第二抗體EnVision;上海佑科XSP-1CA 顯微鏡;浙江臨安電子器材廠提供的YWY78IA 型醫(yī)用微波爐。
全部患者均行微波-LDP 免疫組化技術(shù)檢驗:①冰凍切片,經(jīng)PBS 洗30s×2 次;②視一抗?fàn)顟B(tài)對于消化處理切片,應(yīng)置入濕盒內(nèi)使用胰蛋白酶,經(jīng)微波爐低檔作用60s;對于需進(jìn)行抗原修復(fù)的切片使用微波高檔煮沸后,再調(diào)整為低檔,作用10min,均使用蒸餾水洗、PBS 洗30s×2 次;③在3%雙氧水濕盒中微波低檔作用60s,消除其中的內(nèi)源性過氧化物酶,再PBS 洗30s×2次;④滴入一抗,置入濕盒中,微波低檔60s,PBS 洗30s×2 次;⑤滴入二抗,置入濕盒中微波低檔60s,PBS 洗30s×2 次;⑥常規(guī)顯色、水洗,使用HE 染色,脫水、封片。免疫組化陽性標(biāo)準(zhǔn):根據(jù)染色強度(光鏡分析結(jié)果)和陽性細(xì)胞數(shù)目(切片中顯色腫瘤細(xì)胞在全部腫瘤細(xì)胞中的占比評分)結(jié)果判定陽性:①陽性細(xì)胞數(shù)目:>75%記3 分,30 ~75%記2 分,30%以下記1 分;②染色強度:細(xì)胞無色記0 分,淺黃色記1 分,棕黃色記2 分,棕褐色記3 分,積分=①×②,按照積分高低評價:陰性(-)(積分0 分);弱陽性(+)(積分1 ~2 分);中度陽性(++)(積分3 ~4 分),強陽性(+++)(積分>4 分),陰性包括(-)、(+),陽性包括(++)、(+++)[5]。
以病理電鏡觀察、組織學(xué)觀察結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn),分析微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷腫瘤患者的結(jié)果,評價該種檢驗技術(shù)診斷惡性腫瘤患者的效能。
采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS23.0 處理數(shù)據(jù),以χ2檢驗計數(shù)資料(%,n),P<0.05,表示有統(tǒng)計學(xué)意義。
由金標(biāo)準(zhǔn)可知,84 例腫瘤患者中良性31 例,惡性53 例,以此為參照,采用微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷惡性腫瘤的結(jié)果詳見表1。
表1 微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷腫瘤的結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)對比(n)
由2.1 的結(jié)果可知,微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷惡性腫瘤的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、漏診率和誤診率,詳見表2,其中診斷準(zhǔn)確度與金標(biāo)準(zhǔn)比較(χ2=2.304,P=0.128)無顯著差異。
表2 微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷惡性腫瘤的效能評價
病理技術(shù)作為診斷腫瘤的有效手段,在基層醫(yī)院得到了廣泛應(yīng)用。但一般免疫組化技術(shù)存在耗時長、步驟多、靈敏度低等缺陷,影響了診斷結(jié)果的可靠性[4]。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,微波-LDP 免疫組化技術(shù)成為了臨床常用的病理檢查手段[5]。本次研究結(jié)果顯示,微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷惡性腫瘤漏診率(5.66%)、誤診率(3.23%)較低,特異度(96.77%)、靈敏度(94.34%)和準(zhǔn)確度(95.24%)較高,說明該種檢驗方法在腫瘤病理診斷中具有較高的診斷效能,可為醫(yī)師鑒別惡性腫瘤患者提供重要的參考依據(jù)。分析后可知,一般免免疫組化技術(shù)操作環(huán)節(jié)繁瑣,無法及時獲取檢測結(jié)果。而微波-LDP 免疫組化技術(shù)中的二抗可將特異性抗體與辣根過氧化物酶在葡聚糖聚合物上相結(jié)合,且葡聚糖分子較大,各骨架能夠與100 個酶分子、20 個抗體分子進(jìn)行結(jié)合,提高顯色效果,改善漏診情況,有效提高了腫瘤病理檢驗的靈敏度。且在實際操作中無需阻斷其中的內(nèi)源性生物素,省略了血清封閉環(huán)節(jié),從而縮短了切片染色時間,提升了檢驗效率。同時將微波技術(shù)應(yīng)用于LDP 免疫組化檢驗中,能夠在高頻電磁場中提高抗原抗體的作用面積,加快反應(yīng)速度,促進(jìn)快速孵育,將反應(yīng)時間由原本的75min 壓縮至20min 以內(nèi),并能夠減少非特異性染色反應(yīng),改善了誤診情況,實現(xiàn)了快速、準(zhǔn)確診斷的檢驗效果。
綜上所述,采用微波-LDP 免疫組化技術(shù)診斷腫瘤能夠為醫(yī)師判斷良惡性病例提供有力參照,準(zhǔn)確檢出惡性腫瘤患者,診斷效能較高,具有重要的應(yīng)用價值。