王會(huì)生，王文會(huì)，杜逢艷，韓慶彥

（1.禮縣畜牧獸醫(yī)站 甘肅隴南 742200；2.甘肅省禮縣上坪鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站甘肅隴南 742200；3.甘肅省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心蘭州 730046）

隴南某縣是傳統(tǒng)的養(yǎng)雞大縣，近年來隨著精準(zhǔn)扶貧養(yǎng)雞和林下養(yǎng)雞的發(fā)展，養(yǎng)殖規(guī)模越來越大，由于飼養(yǎng)管理和雞病防治上的偏差，在飼料添加及疾病防治中過多使用了抗生素。減少抗生素的使用，可以減少飼養(yǎng)戶的負(fù)擔(dān)，還能生產(chǎn)出健康的畜產(chǎn)品。如果能使高致病性禽流感和新城疫等疫苗的免疫效果更好，也能在生產(chǎn)中促進(jìn)減少抗生素的使用。

在飼料中添加中草藥，可防病治病，毒副作用小，不會(huì)在食用畜禽產(chǎn)品中產(chǎn)生有害殘留，還可避免過多使用化學(xué)藥物造成病原微生物產(chǎn)生抗藥性、畜產(chǎn)品藥物殘留和環(huán)境污染等問題。一些中草藥還具有提高免疫功能的作用，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)天然中草藥中的多糖類、有機(jī)酸類、生物堿類、甙類和揮發(fā)油類等均有增強(qiáng)免疫力的作用，這類中草藥有黃芪、刺五加、黨參、商陸、馬兜鈴、甜瓜蒂、當(dāng)歸、淫羊藿、穿心蓮、大蒜、茯苓、水牛角、豬苓等[1]。研究表明，長期使用抗生素將抑制雞免疫器官發(fā)育，免疫功能下降，容易感染疾病[2]，干擾免疫球蛋白合成，降低細(xì)胞吞噬作用，降低體內(nèi)淋巴細(xì)胞有絲分裂活性[3]。

本試驗(yàn)通過對(duì)相同日齡相同飼養(yǎng)條件下散養(yǎng)肉雞飼料中添加抗生素和中草藥，來了解兩種添加物對(duì)重組禽流感三價(jià)滅活疫苗（H5N1Re-11 株+Re12 株，H7N9H7-Re2 株）免疫抗體的影響。

1 試驗(yàn)雞及方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)及雞群

選擇一個(gè)散養(yǎng)肉雞場(chǎng)，該場(chǎng)主要飼養(yǎng)青腳麻雞，從蘭州某大型商品肉雞場(chǎng)購進(jìn)7 日齡雛雞苗，本試驗(yàn)選擇的120 只雛雞，自2019年12 月31 日引進(jìn)，2020 年4 月2 日出售，飼養(yǎng)期92d，日齡99d。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 雞群的飼養(yǎng)管理 將120 只雛雞分成三組，三組雞分群籠養(yǎng)，除飼料外，其余飼養(yǎng)管理?xiàng)l件完全相同。其中第一組（A 組）35只，飼喂以補(bǔ)中益氣湯為主的中藥方劑，飼料按照每10kg 飼料添加黃芪、黨參、炙甘草各15g、白術(shù)、當(dāng)歸各10g、陳皮5g、柴胡12g、生姜8g、大棗適量，以上中藥研磨成粉后添加到飼料中。第二組（B組）35 只，飼喂含土霉素的飼料，飼料中土霉素含量150mg/kg。第三組（C 組）50 只，飼喂對(duì)照飼料，飼料中不含抗生素及免疫增效劑。

第一組和第二組雞群飼養(yǎng)至15 日齡時(shí)，飼喂相應(yīng)的飼料，直至采血次日，換成對(duì)照飼料。

1.2.2 疫苗注射 在雞群養(yǎng)殖到21 日齡時(shí)，注射重組禽流感三價(jià)滅活疫苗（H5N1Re-11 株+Re12 株，H7N9H7-Re2 株）,由肇慶大華農(nóng)生物藥品有限公司生產(chǎn)，批號(hào)1924198，該疫苗由上級(jí)動(dòng)物防疫機(jī)構(gòu)配發(fā)。

1.2.3 血清采集 疫苗注射后21d 時(shí)，每組隨機(jī)采集20 份血樣，采血部位在雞的翅靜脈，每組雞的最低采血數(shù)量不少于20 只，用一次性真空采血管每只雞采血在2mL 以上，采完后斜面放置，待全部凝固后放置于4℃冰箱過夜，第二天用移液器吸取析出的血清進(jìn)行禽流感H5 亞型（Re-11)抗體效價(jià)測(cè)定。

2 檢測(cè)方法

2.1 檢測(cè)方法及抗體合格標(biāo)準(zhǔn)

采用血凝（HA）和血凝抑制(HI)試驗(yàn)法，參照高致病性禽流感診斷技術(shù)GB/T18936—2003[4]?？贵w滴度≥4log2 為合格，＜4log2為不合格。

2.2 試劑和材料

禽流感病毒H5 亞型（Re11 株）血凝抑制試驗(yàn)檢測(cè)試劑，哈爾濱維科生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)2019004。

被檢血清從歷年筆者檢測(cè)的抗體結(jié)果來看，禽流感滅活苗免疫后的抗體效價(jià)不會(huì)在14d 左右達(dá)到峰值，一般都在19d 左右達(dá)到峰值，因此選擇接種疫苗后21d，而不是常見的15d，采集血樣60份，其中每個(gè)試驗(yàn)組（中藥組、抗生素組和對(duì)照組）各20 份血清試驗(yàn)材料90°和110°V 型8*12 孔反應(yīng)板若干，10-300μL 單道、8道和12 道移液器各一把，無菌移液槍頭若干。

2.3 試驗(yàn)結(jié)果

抗體檢測(cè)結(jié)果見表1。每組檢測(cè)20 份血清，其中A 組為中藥組，B 組為抗生素組，C 組為普通飼料（對(duì)照）組。

表1 三種不同的飼養(yǎng)組禽流感抗體的效價(jià)(單位bg2)

3 數(shù)據(jù)分析及結(jié)論

3.1 數(shù)據(jù)分析

中藥組、抗生素組和對(duì)照組禽流感抗體（≥4log2）合格率分別為60%、45%和45%，平均抗體效價(jià)分別為4.5Log2、3.75log2、3.85log2。從檢測(cè)結(jié)果可以看出，中藥組的抗體合格率明顯高于抗生素組和對(duì)照組，而抗生素組的抗體合格率和對(duì)照組雖然相同，但相對(duì)來說效價(jià)較高。

3.2 結(jié)論

中草藥對(duì)于機(jī)體的免疫系統(tǒng)有促進(jìn)作用，它可以促使雞接種疫苗產(chǎn)生較大的應(yīng)答反應(yīng)?？股貙?duì)于雞的免疫系統(tǒng)有一定的抑制作用，會(huì)造成機(jī)體對(duì)外來抗原刺激不敏感。因此建議，在養(yǎng)雞生產(chǎn)中使用以補(bǔ)中益氣湯為基礎(chǔ)的加減中藥制劑代替抗生素添加，有利于減少抗生素殘留、減少細(xì)菌耐藥性、有利于提高雞的抵抗力。█