金銘鑫, 張鐳, 申琪

1開封市中心醫(yī)院耳鼻喉科(河南開封 475000)； 2河南中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院耳鼻喉科(河南鄭州 450000)

膽脂瘤型中耳炎即中耳膽脂瘤，發(fā)病部位為中耳，可侵蝕中耳及內耳結構，隨著病情發(fā)展，可導致聽力下降、耳鳴等癥狀，若不及時干預，甚至引起嚴重的顱內外并發(fā)癥，對患者生命安全構成一定威脅[1-2]，因此，對于膽脂瘤型中耳炎患者早期發(fā)現(xiàn)與治療具有重要意義。然而其病因在臨床中存在分歧，其形成的確切機制尚未完全明了[3-4]。對氧磷酯酶1(paraoxonase-1，PON1)是一種鈣離子依賴性血清酯酶，作為體內重要的抗氧化酶，能夠降低體內高氧化應激狀態(tài)和脂質過氧化，與機體自身免疫性疾病和腫瘤等密切相關[5-6]。脂氫過氧化物(lipid hydroperoxides，LOOH)是一種有效抗氧化劑，由低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)中的多不飽和脂肪酸發(fā)生脂質過氧化形成，主要存在于血清中，其作為疾病血清檢測指標具有優(yōu)越性[7-8]。目前，關于PON-1、LOOH在膽脂瘤型中耳炎中的研究較少，故本研究通過測定膽脂瘤型中耳炎患者血清PON-1、LOOH水平，并探討兩者的臨床意義，以期為臨床防治膽脂瘤型中耳炎提供新的方向。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年5月至2019年10月于本院確診的140例膽脂瘤型中耳炎患者為觀察組，其中，男76例，女64例，平均年齡(36.25±9.41)歲，平均病程(14.63±2.12)年，根據(jù)患者臨床表現(xiàn)分為：聽力減弱者51例，外耳道流膿者47例，頭痛者36例，伴有類腦膜炎表現(xiàn)者6例。另選擇同期于本院體檢的健康體檢者140例為對照組，男72例，女68例，平均年齡為(35.82±8.75)歲。

納入標準：(1)符合膽脂瘤型中耳炎臨床診斷標準;(2)均經病理檢查確診為膽脂瘤型中耳炎；(3)患者意識清晰，溝通無障礙；(4)患者及其家屬知情同意，并簽署同意書。

排除標準：(1)具有心腎功能障礙者；(2)具有精神疾病史者；(3)具有認知功能障礙者；(4)患有其他嚴重的合并癥或神經性疾病者。

本研究經本院道德倫理委員會批準通過，符合《世界醫(yī)學協(xié)會赫爾辛基宣言》。

1.2 檢測指標及方法

1.2.1 標本采集 收集入選研究對象的臨床資料，所有患者均于清晨抽取空腹靜脈血3～5 mL，常溫下靜置，待血液凝固后2 500 r/min離心15 min，離心后分離上層血清并于-20℃儲存待用。

1.2.2 血清PON-1水平測定 采用日立7060全自動生化分析儀，以對硝基苯酚為底物的速率法分批測定血清PON-1水平。

1.2.3 血清LOOH水平測定 采用鐵-二甲苯酚橙色復合物(ferric-xylenol orange complex，F(xiàn)OX)法測定血清中LOOH水平。

1.2.4 超敏C反應蛋白(high-sensitivity C-reactive protein，hs-CRP)水平測定 采用乳膠增強免疫透射比濁法檢測血清中hs-CRP水平。

1.2.5 低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein chesterol，LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein cholesterol，HDL-C)水平測定 于C8000全自動生化檢測儀檢測血清LDL-C和HDL-C水平。

1.2.6 丙二醛(malondialdehyde，MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)含量測定 采用硫代巴比妥酸法測定血清MDA含量，采用黃嘌呤氧化酶法測定血清SOD含量，試劑盒均由南京建成生物工程公司提供。

1.3 統(tǒng)計學方法 運用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行處理，計數(shù)資料以例(%)表示，采用2檢驗；計量資料以表示，采用t檢驗；影響脂瘤型中耳炎發(fā)生的危險因素分析，采用logistic回歸分析；血清PON-1、LOOH對膽脂瘤型中耳炎的診斷價值采用受試者工作特征(ROC)曲線分析；P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 一般資料比較 觀察組與對照組年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，觀察組血清hs-CRP、MDA及LDL-C水平顯著高于對照組，血清SOD、HDL-C水平顯著低于對照組(P<0.05)，見表1。

2.2 兩組血清PON-1、LOOH表達水平比較 觀察組血清PON-1表達水平明顯低于對照組，血清LOOH表達水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表2。

表1 一般資料比較

表2 兩組血清PON-1、LOOH表達水平比較

2.3 患者血清PON-1、LOOH表達水平及其與氧化應激指標的相關性分析 Pearson法分析結果顯示，膽脂瘤型中耳炎患者血清PON-1水平與hs-CRP、MDA水平均呈負相關，與SOD水平呈正相關；血清LOOH表達水平與hs-CRP、MDA水平均呈正相關，與SOD水平呈負相關；血清PON-1與LOOH水平呈負相關，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見圖1～7。

注：r=-0.512，P<0.05

注：r=-0.424，P<0.05

2.4 logistic回歸分析影響膽脂瘤型中耳炎發(fā)生的危險因素 以血清hs-CRP、MDA、SOD、HDL-C、LDL-C、PON-1及LOOH表達為自變量，以是否發(fā)生膽脂瘤型中耳炎為因變量，進行l(wèi)ogistic回歸分析，結果顯示，血清hs-CRP、MDA及LOOH水平高均是影響膽脂瘤型中耳炎發(fā)生的獨立危險因素，SOD、PON-1水平高是影響膽脂瘤型中耳炎發(fā)生的獨立保護因素(P<0.05)，見表3。

注：r=0.512，P<0.05

注：r=0.473，P<0.05

注：r=-0.494，P<0.05

3 討論

膽脂瘤型中耳炎是臨床常見的一種耳鼻咽喉科疾病，好發(fā)于中青年人群，且發(fā)病率較高，早期癥狀不顯著，缺乏特異性，病情易反復發(fā)作、病史長，主要特征為上皮細胞增生、角化上皮脫屑堆積和骨質破壞，主要臨床表現(xiàn)為耳溢液、耳痛、聽力下降等，隨著病情發(fā)展，可造成面神經麻痹，嚴重者還將出現(xiàn)腦膜炎、腦膿腫等并發(fā)癥，可直接對患者生命造成威脅，嚴重影響人類健康，因此，臨床以早期確診、及時進行手術為治療原則，以清除病灶，解除膽脂瘤對患者機體的破壞[9-11]。

注：r=0.508，P<0.05

注：r=-0.530，P<0.05

表3 logistic回歸分析影響膽脂瘤型中耳炎發(fā)生的危險因素

研究表明，炎癥遞質和氧化應激反應在中耳炎的發(fā)病中具有重要作用，當機體對抗外來抗原時，中性粒細胞、單核細胞和巨噬細胞產生氧自由基，參與膽脂瘤型中耳炎的慢性感染及組織損傷過程，由于氧自由基產生增多，而抗氧化物質不足以消除過多的氧自由基，其動態(tài)平衡被打破，體內氧化應激指標表現(xiàn)異常[12-13]。本研究結果顯示，觀察組血清hs-CRP、MDA、HDL-C及LDL-C水平顯著高于對照組，血清SOD水平顯著低于對照組，表明膽脂瘤型中耳炎患者氧化應激指標MDA含量升高，炎癥指標hs-CRP也明顯升高，抗氧化物質SOD水平降低，提示氧化應激反應和炎癥反應可能參與膽脂瘤型中耳炎發(fā)生發(fā)展。

PON-1屬于鈣依賴酯酶，由肝臟合成和分泌，作為一種重要的抗氧化酶可清除脂質過氧化物，保護生物膜免受自由基的損傷，可有效降低LDL的氧化率。另外，PON-1還可作為抗炎癥因子，對機體的抗炎癥起著至關重要的作用，其水平可反映機體抗氧化損傷及抗炎癥的能力[14-15]。相關研究表明，氧化應激損傷與中耳炎的發(fā)生發(fā)展有關，而PON-1水平降低會造成機體抗氧化能力減弱，當活性氧自由基超出機體的代償清除能力時，會導致氧化抗氧化平衡失調[16-17]。本研究結果顯示，觀察組血清PON-1表達水平顯著低于對照組，Pearson法分析結果顯示，膽脂瘤型中耳炎患者血清PON-1水平與hs-CRP、MDA水平均呈負相關，與SOD水平呈正相關，進一步logistic回歸分析結果顯示，血清PON-1水平高是影響膽脂瘤型中耳炎發(fā)生的保護因素，表明PON-1可能參與脂瘤型中耳炎的發(fā)生發(fā)展。

自由基引發(fā)的脂質過氧化反應與許多疾病的發(fā)生發(fā)展有關。LOOH是一種主要存在于血液中的水解酯酶，是一種有效抗氧化劑，能夠水解脂質過氧化物，降低體內的氧化應激狀態(tài)和脂質過氧化[18-20]。相關研究表明，LOOH是評估HDL抗氧化功能的重要指標之一，其水平的升高，與中耳炎的發(fā)生具有一定關聯(lián)[12-13,21-22]。本研究結果顯示，觀察組血清LOOH表達水平顯著高于對照組，Pearson法分析結果顯示，膽脂瘤型中耳炎患者血清LOOH表達水平與hs-CRP、MDA水平均呈正相關，與SOD水平呈負相關，進一步logistic回歸分析結果顯示，血清LOOH水平高是影響膽脂瘤型中耳炎發(fā)生的獨立危險因素，表明脂質過氧化損傷可能參與膽脂瘤型中耳炎的發(fā)生發(fā)展，LOOH在膽脂瘤型中耳炎中起著重要作用。此外，本研究顯示，血清PON-1與LOOH水平呈負相關，表明兩者存在一定聯(lián)系，其均具有抗氧化功能，可能在機體抗炎和抗氧化過程中發(fā)揮重要作用，共同參與膽脂瘤型中耳炎的發(fā)生發(fā)展，但兩者的共同作用機制仍需進一步的研究和探討。

綜上所述，膽脂瘤型中耳炎患者血清PON-1表達水平降低，血清LOOH表達水平升高，是膽脂瘤型中耳炎發(fā)生的影響因素。但由于本研究是局限性，樣本數(shù)量偏少，后期應加大樣本進一步探討血清PON-1、LOOH在膽脂瘤型中耳炎中的具體作用機制。