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        結(jié)核分枝桿菌的病原學(xué)檢測及耐藥性分析

        2020-11-16 08:00:00駐馬店市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗科河南駐馬店463000
        罕少疾病雜志 2020年6期
        關(guān)鍵詞:耐藥檢測方法

        駐馬店市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗科 (河南 駐馬店 463000)李 松

        結(jié)核病是由一種結(jié)核分枝桿菌引起、可累及多種器官并嚴重危害人類健康的慢性傳染性疾病。我國是全球結(jié)核病疫情嚴重且高耐藥國家之一。耐藥性結(jié)核桿菌的出現(xiàn),可影響結(jié)核患者的預(yù)后并增加其病死率,使抗結(jié)核治療及結(jié)核病防控工作面臨極大挑戰(zhàn)[1]。為加強結(jié)核病控制工作,本文對我院550例結(jié)核患者的臨床資料進行回顧性分析。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料收集我院2017年1月至2018年6月確診的肺結(jié)核患者550例,其中男380例,女170例,年齡19~85歲,平均(39.4±10.6)歲;收集同期我院排除肺結(jié)核的肺部疾病患者600例,其中男415例,女185例,年齡21~85歲,平均(40.2±9.4)歲。兩組患者一般資料差異無顯著性(P<0.05)。

        1.2 方法

        1.2.1 痰涂片檢查:采用無菌器皿收集患者清晨漱口后咳痰,行痰涂片抗酸染色鏡檢,嚴格按照《痰涂片鏡檢質(zhì)量保證手冊》[2]要求收集痰標本、制作涂片、染色鏡檢、保存等。根據(jù)《結(jié)核病診斷細菌學(xué)檢驗規(guī)程》出具報告。

        1.2.2 結(jié)核菌素試驗:于患者前臂屈側(cè)皮內(nèi)注射0.1mL含5IU的結(jié)核菌素(成都生物制品研究所有限責(zé)任公司),72h后觀察反應(yīng)結(jié)果。

        1.2.3 結(jié)核抗體檢測:抽取患者空腹靜脈血,采用結(jié)核分枝桿菌多種抗原IgG抗體蛋白芯片進行結(jié)核抗體檢測,嚴格按照芯片說明書進行操作。

        1.2.4 藥敏試驗:對鑒定并分離的結(jié)核分枝桿菌的菌株進行4種臨床常用抗結(jié)核藥物的藥敏試驗。采用改良羅氏培養(yǎng)基,各培養(yǎng)基中藥物臨界濃度分別為鏈霉素(SM)4μg/mL,異煙脛(INH)0.2μg/mL,利福平(RFP)40μg/mL,乙胺丁醇(EMB)2μg/mL,計算耐藥百分比,耐藥百分比大于1% 判斷該菌為耐藥菌。

        統(tǒng)計三種方法檢測肺結(jié)核患者和肺部疾病患者結(jié)核分枝桿菌的陽性例數(shù),計算三種方法檢測結(jié)核分枝桿菌的敏感度、特異性。

        1.3 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS22.0軟件,采用χ2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié) 果

        2.1 不同方法檢測結(jié)核分枝桿菌結(jié)果比較痰涂片抗酸染色法檢測結(jié)核分枝桿菌的靈敏度、特異度分別為28.2%、100%,結(jié)核菌素試驗檢測結(jié)核分枝桿菌的靈敏度、特異度分別為79.5%、47.8%,結(jié)核抗體檢測結(jié)核分枝桿菌的靈敏度、特異度分別為76.9%、83.3%。痰涂片抗酸染色法特異性高于結(jié)核菌素試驗和結(jié)核抗體檢測(P<0.05);而靈敏度低于這兩種檢測方法(P<0.05),結(jié)核抗體檢測的特異性高于結(jié)核菌素試驗(P<0.05),但這方法檢測結(jié)核分枝桿菌的靈敏度差異無顯著性(P>0.05)。詳情見表1。

        2.2 結(jié)核分枝桿菌的耐藥情況對分離的340株結(jié)核分枝桿菌做藥敏試驗,耐1藥45株(13.2%),耐SM、INH、RFP、EMB分別為4株(8.8%)、28株(62.2%)、10株(22.2%)、3株(6.7%);耐多藥株295株(86.8%),其中耐HR、HRS、HRE、HRSE分別為101株(34.2%)、63株(21.3%)、35株(11.9%)、96株(32.5%)。

        表1 不同方法檢測結(jié)核分枝桿菌結(jié)果比較

        3 討 論

        早期診斷是早期治療和有效控制結(jié)核病的關(guān)鍵。其中病原學(xué)診斷是明確診斷的重要手段。目前,臨床常用的結(jié)核桿菌實驗室檢測方法有抗酸染色鏡檢法、結(jié)核抗體檢測法、直接培養(yǎng)法等[3]。

        痰涂片抗酸染色鏡檢法是臨床上廣泛應(yīng)用的一種肺結(jié)核診斷方法,具有簡便、快捷、低廉的優(yōu)點,特異性強。但抗酸染色受痰中細菌數(shù)量限制,一般每毫升標本中需5000~10000個細菌才會呈陽性結(jié)果,與疾病的病變程度、傳染性強弱及痰標本質(zhì)量均有關(guān)[4],且結(jié)核病人是間斷性排菌,可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。此外,檢查時干擾因素多,系統(tǒng)及人為引起的誤差大。因此,該方法敏感性較差。

        結(jié)核分枝桿菌具有特異性抗原,此為血清抗體檢測診斷的基礎(chǔ)。血清結(jié)核抗體檢測方法操作簡單,重復(fù)性好,結(jié)果判斷清楚,避免人為因素的干擾及主觀判斷對結(jié)果的影響,對于涂片陰性、無痰患者、兒童及肺外結(jié)核的臨床診斷有重要參考價值[5]。

        結(jié)核菌素試驗操作簡單,但既往感染過結(jié)核分枝桿菌而治愈的人群也會出現(xiàn)陽性結(jié)果。由于我國結(jié)核分枝桿菌感染率高,因此,該試驗在人群中有著極高的假陽性率。而感染結(jié)核分枝桿菌15個月后,體內(nèi)結(jié)核抗體也已消失[6]。因此,人群結(jié)核分枝桿菌高感染率對血清結(jié)核抗體檢查的影響較結(jié)核菌素試驗小。此外,結(jié)核菌素試驗結(jié)果會受到接種卡介苗的影響。

        本研究結(jié)果顯示,痰涂片抗酸染色法檢測結(jié)核分枝桿菌的特異性為100%,但其敏感性較差,檢出率不高。結(jié)核抗體檢測的特異性高于結(jié)核菌素試驗(P<0.05),兩種方法檢測結(jié)核分枝桿菌的靈敏度差異無顯著性(P>0.05),可見結(jié)核抗體檢測方法優(yōu)于結(jié)核菌素試驗。聯(lián)合痰涂片抗酸染色法和血清抗體檢測兩種方法,可以提高診斷的準確性。

        近年來,隨著全球結(jié)核病疫情的回升,加上抗結(jié)核治療的特殊性,耐藥和耐多藥菌株日益增多,嚴重影響了治療效果,并加大了治療難度。本研究結(jié)果顯示,耐1藥45株(13.2%),耐多藥株295株(86.8%),其中耐HR、HRS、HRE、HRSE分別為34.2%、21.3%、11.9%、32.5%。

        綜上可知,耐藥率和多耐藥率較高,需常規(guī)、定期進行耐藥性監(jiān)測,根據(jù)藥敏結(jié)果及時合理用藥。

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