張 蕾，田 梅

（石家莊市畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)中心，河北石家莊 050041）

氨基酸不僅是合成蛋白質(zhì)和含氮化合物的重要底物，同時(shí)也是調(diào)節(jié)機(jī)體關(guān)鍵物質(zhì)的主要代謝途徑。在生豬生長(zhǎng)過(guò)程中，賴氨酸是第一限制氨基酸，賴氨酸在代謝中起重要作用。此外，賴氨酸被腸道直接吸收用于蛋白質(zhì)合成和其他代謝過(guò)程，如NO合成的調(diào)節(jié)、抗病毒活性、蛋白質(zhì)甲基化、乙酰化、泛素化和糖基化（于青云等，2018）。賴氨酸的缺乏或過(guò)量可以減少或增加氮的沉積和全身蛋白的周轉(zhuǎn)。因此，豬的生長(zhǎng)性能、胴體特征血清參數(shù)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率都會(huì)受到日糧賴氨酸水平的影響（金成龍等，2017；方桂友等，2017）。內(nèi)氨基酸代謝涉及多個(gè)過(guò)程，包括蛋白質(zhì)合成和降解、氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)、動(dòng)脈-門(mén)靜脈的差異和氨基酸代謝。門(mén)靜脈對(duì)保護(hù)被腸外組織利用的外源性氮非常重要，日糧中攝入的氨基酸大部分在門(mén)脈血液中以游離氨基酸形式出現(xiàn)的比例不到100%，部分氨基酸在門(mén)脈血液中以游離氨基酸形式出現(xiàn)的比例超過(guò)100%（Stoll等，1998）。關(guān)于日糧賴氨酸水平對(duì)生長(zhǎng)豬血清中氨基酸和生化參數(shù)的動(dòng)態(tài)變化的信息有限。因此，本研究旨在評(píng)估不同賴氨酸水平對(duì)豬營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化和血清氨基酸濃度動(dòng)態(tài)變化的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)1，將96頭平均體重為（20.23±1.05）kg的豬分為3組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8頭，分別飼喂賴氨酸水平為0.6%、0.9%和1.2%的日糧（表1），試驗(yàn)共開(kāi)展14 d。試驗(yàn)2，在試驗(yàn)1結(jié)束的豬中選擇36頭[每個(gè)重復(fù) 3頭，平均體重為（37.68±2.13）kg]，飼喂試驗(yàn)1對(duì)應(yīng)的日糧，通過(guò)手術(shù)在門(mén)靜脈安裝導(dǎo)管進(jìn)行消化試驗(yàn)（Stoll等，1998）。

1.2 消化試驗(yàn) 在試驗(yàn)1開(kāi)始后，經(jīng)過(guò)7 d的適應(yīng)期，糞便樣品從第8～13天連續(xù)收集5 d并在-20℃保存，然后進(jìn)行常規(guī)養(yǎng)分分析。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇3頭豬禁食12 h后用注射器從腦室腔靜脈區(qū)域采集血液，用3000×g/min的離心機(jī)離心20 min，收集血清，保存待測(cè)。試驗(yàn)2中糞便樣品收集同試驗(yàn)1，在經(jīng)過(guò)為期2周的適應(yīng)期后，分別在在飼喂前 0.5 h和飼喂 1、2、3、4、5、6、8 h從門(mén)靜脈導(dǎo)管中同時(shí)采集每只豬的血液樣本。

表1 不同賴氨酸水平日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 養(yǎng)分分析 采用南京建成研究所的商品試劑盒分析血清生化指標(biāo)，參考Kong等（2009）的方法分析血清游離氨基酸水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)采用SAS軟件多因素方差分析模型，同時(shí)研究賴氨酸水平和采血時(shí)間的交互效應(yīng)，采用Tukey法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)養(yǎng)分消化及血清氨基酸和生化指標(biāo)的影響 由表2可知，在試驗(yàn)1中，0.9%較0.6%賴氨酸日糧組顯著提高了干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和磷表觀消化率（P＜0.05），同時(shí)0.9%和1.2%較0.6%賴氨酸日糧組顯著提高了總能表觀消化率（P＜0.05）。0.9%較1.2%賴氨酸日糧組顯著提高了血清賴氨酸濃度（P＜0.05），較0.6%賴氨酸日糧組顯著提高了血清谷氨酸濃度（P＜0.05）。0.9%賴氨酸日糧組血清絲氨酸和蘇氨酸濃度最低（P＜0.05），而1.2%賴氨酸日糧組血清絡(luò)氨酸濃度最低（P＜0.05）。0.9%和1.2%較0.6%賴氨酸日糧組血清總蛋白濃度分別顯著提高了8.37%和10.09%（P＜0.05）。

表2 不同賴氨酸水平日糧對(duì)生長(zhǎng)豬養(yǎng)分消化及血清氨基酸和生化指標(biāo)的影響（試驗(yàn)1）

2.2 對(duì)血清氨基酸水平的影響 由表3可知，在試驗(yàn)1中，1.2%較0.6%和0.9%賴氨酸日糧組顯著提高了血清賴氨酸濃度（P＜0.05），但血清組氨酸、苯丙氨酸和纈氨酸濃度表現(xiàn)最低（P＜ 0.05）。

2.3 采食時(shí)間對(duì)氨基酸水平的影響 由表4可知，除了甘氨酸外，生長(zhǎng)豬采食時(shí)間（0.5～8 h）對(duì)血清其他氨基酸濃度均具有顯著影響（P＜0.05）。同時(shí)除了丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸和甘氨酸外，采食后的時(shí)間和日糧賴氨酸水平對(duì)血清其他氨基酸濃度的影響具有顯著交互作用（P ＜ 0.05）。

2.4 采食時(shí)間對(duì)生化指標(biāo)的影響 由表5可知，1.2%賴氨酸組血清甘油三酯濃度較0.6%賴氨酸組顯著提高了（P＜0.05）。除了血清尿素氮外，采食0.5 h血清總蛋白濃度最高（P＜0.05），采食后5和8 h，血清甘油三酯濃度最高（P＜0.05），而采食后1 h，血清葡萄糖濃度最高（P＜0.05）。日糧賴氨酸水平和采食后的時(shí)間對(duì)血清血清甘油三酯濃度的影響具有顯著交互作用（P＜0.05）。

表3 不同賴氨酸水平日糧對(duì)生長(zhǎng)豬血清氨基酸水平的影響（試驗(yàn)1） μmol

表4 采食時(shí)間對(duì)豬血清氨基酸水平的影響（試驗(yàn)2）μmol

表5 采食時(shí)間對(duì)豬血清生化指標(biāo)的影響（試驗(yàn)2）

3 討論

試驗(yàn)1結(jié)果顯示，當(dāng)日糧賴氨酸含量為0.9%時(shí)，所研究的營(yíng)養(yǎng)素（粗灰分除外）的表觀消化率普遍高于其他處理，但0.6%和1.2%組無(wú)顯著差異。Jin等（2010）報(bào)道，隨著日糧賴氨酸的限制，蛋白值消化率降低，表明日糧賴氨酸水平對(duì)豬的表觀營(yíng)養(yǎng)消化率有影響。賴氨酸雖然不被認(rèn)為是一種功能性氨基酸，但它可能通過(guò)調(diào)節(jié)某些功能性氨基酸的吸收或調(diào)節(jié)內(nèi)分泌激素的釋放來(lái)影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝。

生長(zhǎng)豬飼喂高水平賴氨酸日糧（1.2%），血清中氨基酸的濃度迅速而近似線性地增加。但在某些情況下，一種氨基酸的高水平與其他氨基酸的下降有關(guān)（Barea等，2009）。Roy等（2000）報(bào)道，血清游離賴氨酸濃度隨日糧賴氨酸水平的升高而升高，異亮氨酸、蘇氨酸和纈氨酸的濃度降低。日糧賴氨酸水平的升高也會(huì)導(dǎo)致血清賴氨酸濃度的升高。日糧賴氨酸的升高導(dǎo)致血清游離賴氨酸濃度升高，蘇氨酸、酪氨酸和一些非必需氨基酸的濃度降低，這與Henry等（1992）的研究結(jié)果一致。

血清代謝物可以反映日糧引起的代謝和生理活動(dòng)的變化，這些變化可能通過(guò)調(diào)節(jié)與氮和脂質(zhì)代謝相關(guān)的酶來(lái)影響代謝物濃度（McNeel和Mersmann，2000）。日糧中賴氨酸水平的降低導(dǎo)致試驗(yàn)1中血清總蛋白濃度的降低，而賴氨酸水平的降低沒(méi)有導(dǎo)致試驗(yàn)2中總蛋白濃度的降低。但兩組試驗(yàn)中總蛋白的濃度在數(shù)值上都較高，這些結(jié)果與Yang等（2008）的報(bào)道一致。相反，血清尿素氮是評(píng)估日糧中氨基酸需求的指標(biāo)，因此，低血清尿素氮濃度表明體內(nèi)蛋白質(zhì)沉積處于高水平。本研究所開(kāi)展的兩個(gè)試驗(yàn)均顯示，隨著日糧賴氨酸水平的增加，血清尿素氮濃度降低，這與Jin等（2010）的研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

綜上所述，氨基酸的吸收率在采食2 h后達(dá)到高峰，血清氨基酸濃度的動(dòng)態(tài)變化受日糧賴氨酸水平的影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧賴氨酸水平為0.9%時(shí)可使生長(zhǎng)豬營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和血清代謝物濃度達(dá)到最佳。