何子順，張虎平

（1 湖北省老河口市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，湖北 老河口441800；2 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，南京210095）

杜梨（Pyrus betulifolia Bunge）為薔薇科梨屬落葉喬木，通常作栽培品種梨的砧木。杜梨育苗主要采用種子繁殖，目前制取杜梨種子的主要方法是堆漚水選法[1]。但這種方法存在多項缺點：所需時間長，一般需7～10 d；堆積期間因發(fā)酵溫度升高，如翻動不及時，溫度可達(dá)到50 ℃以上，造成種子失去生活力，嚴(yán)重影響杜梨種子的質(zhì)量； 由于杜梨果實中含有較多的糖類和果膠物質(zhì)，不易清除干凈而常混入種子中，影響種子純度。有關(guān)利用酵母對杜梨果肉進(jìn)行酵解的研究較少，本試驗利用釀酒酵母對杜梨果肉進(jìn)行發(fā)酵，同時加入適量的水，以期縮短杜梨制種時間，降低高溫對種子傷害的風(fēng)險，得到較純凈的優(yōu)質(zhì)杜梨種子。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

2016年11月至2017年2月開展本試驗，試驗用杜梨果實采自新疆庫爾勒市哈拉玉宮鄉(xiāng)巴格吉格代村的杜梨防風(fēng)林，樹齡10年生，果實充分成熟。發(fā)酵材料為釀酒酵母（安琪酵母股份有限公司生產(chǎn)）及生活用白糖，試驗用器械包括透明塑料桶（5 L）、燒杯、電子天平、溫度計、20 目篩子、水桶、冰箱等。

1.2 試驗方法

釀酒酵母的活化和接種 用電子天平準(zhǔn)確稱取釀酒酵母4.0 g，倒入燒杯中，再向燒杯內(nèi)加入8%白砂糖溶液80.0 mL，攪拌均勻，放置30 min 后即得釀酒酵母活化液[2]。稱取杜梨果實4 kg，裝入5 L 塑料桶內(nèi)，向塑料桶內(nèi)加入自來水0.67 kg，再將酵母活化液倒入桶內(nèi)，充分?jǐn)嚢韬笙鄬γ芊?，要求外面空氣不能進(jìn)入桶中，但桶內(nèi)的氣壓高于外界氣壓時桶內(nèi)氣體能夠緩慢逸出。設(shè)2個對照：一是用等量的杜梨和水混合后裝入5 L塑料桶內(nèi)，不加釀酒酵母；二是用等量的杜梨堆放漚制，堆放在瓷盤內(nèi)，厚度10 cm，不加釀酒酵母和水。釀酒酵母處理和對照均放在30 ℃的環(huán)境下。以1 桶（盤）為小區(qū)，3 次重復(fù)。

制取杜梨種子 處理和對照的杜梨果肉失去粘性后，倒入水桶充分?jǐn)嚢?，用自來水沖洗，用20 目篩子將杜梨種子過濾出來，再用清水沖洗3 次，清除漂浮的秕種子和雜質(zhì)。杜梨種子經(jīng)3 d 晾干后稱重，計算出種率。從酵母處理和對照中隨機選取飽滿種子各100 粒，按沙藏層積技術(shù)[3]在冰箱內(nèi)4 ℃條件下進(jìn)行沙藏層積處理，有10 粒種子的芽長到1 cm 時結(jié)束，統(tǒng)計發(fā)芽率。以100 粒為小區(qū)，3 次重復(fù)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

利用Excel 和DPS 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（v7.05 版）對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 釀酒酵母對發(fā)酵進(jìn)程的影響

釀酒酵母處理和對照1 桶內(nèi)的杜梨果實沒有升溫的現(xiàn)象，對照2 有升溫現(xiàn)象。釀酒酵母處理的桶內(nèi)冒氣泡劇烈，對照1 的桶內(nèi)冒氣泡緩慢，對照2 未觀察到冒氣泡現(xiàn)象。釀酒酵母處理的經(jīng)3 d 時間停止冒氣泡，果肉已失去粘性；而對照1 達(dá)到上述特征需8 d（表1）；對照2 的果肉失去粘性同樣需8 d。釀酒酵母處理能使杜梨果肉發(fā)酵時間縮短5 d。杜梨果肉發(fā)酵的過程是產(chǎn)生氣體的有機化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生氣體的速度能夠反映發(fā)酵的速度?？慷爬婀麑嵶陨頂y帶的菌進(jìn)行發(fā)酵較緩慢，加入釀酒酵母能加速杜梨果實發(fā)酵。

表1 不同處理對制取杜梨種子的影響

2.2 釀酒酵母對出種率及種子發(fā)芽率的影響

由表1可知，釀酒酵母處理的出種率雖略高于對照，但差異不顯著。直觀認(rèn)為，釀酒酵母處理制取的杜梨種子比對照的純度高； 釀酒酵母處理制取杜梨種子的發(fā)芽率也略高于對照，但差異不顯著。

3 討論

當(dāng)前生產(chǎn)上制取杜梨種子常用的方法是堆漚水洗法，是利用杜梨果實自身攜帶的菌和空氣中的菌進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵過程緩慢，整個過程中還要多次翻堆，以防止發(fā)酵產(chǎn)生高溫傷害杜梨種子。釀酒酵母對杜梨果肉的發(fā)酵有加速的作用，這種加速作用直接表現(xiàn)在產(chǎn)生氣體迅速。適量水有介質(zhì)作用，使釀酒酵母和杜梨果肉充分接觸，還能夠阻止發(fā)酵過程中溫度升高。用水量的標(biāo)準(zhǔn)是剛好將杜梨果實浸沒，杜梨果實和水的重量比6∶1。適量水作介質(zhì)，釀酒酵母對杜梨果肉發(fā)酵制取種子有多項優(yōu)點：時間短、不升溫、省去翻堆的勞動、提高種子的純度，且不影響出種率和發(fā)芽率，有望能在生產(chǎn)中應(yīng)用。利用酵母發(fā)酵制取杜梨種子，在酵母菌株的篩選、用量、用法、氣溫等方面，還需進(jìn)一步研究。