王嬌 ，胡娟 ，宋知楊 ，楊星

（1.貴州省血液中心，貴州 貴陽 550001；2.貴州醫(yī)科大學，貴州 貴陽 550025）

ABO 血型系是人類血型系中抗原免疫原性最強的一個血型系， 有著其他血型系沒用的獨特性質(zhì)，是輸血與器官移植中最重要的血型系[1]。 ABO血型檢測是各級采供血機構(gòu)血液檢測項目之一，其鑒定方法目前仍以免疫血清學檢測為主，需要同時進行紅細胞正定型和血清反定型綜合判斷，準確的ABO 血型可大大縮短了輸血前交叉配血的時間，確保為患者提供及時、準確、安全的臨床用血。

1 材料與方法

1.1 材料 2016 年 1 月至 2017 年 12 月本中心獻血者192053 人次中，微量板法復檢為ABO 血型正反定型不符樣本145 例，試管法檢出的48 例ABO血型正反定型不符血樣，其中獻血者男性29 人，女性 19 人，漢族 36 人，少數(shù)民族 12 人，18～55 周歲健康人群，排除重復獻血人員樣本計算。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 KA-2200 血型檢測專用離心機（日本久保田公司）、5420 離心機 （日本久保田公司）、電熱恒溫振蕩水槽（上海精宏實驗設備有限公司）。血型抗-A、抗-B、抗 A1、抗-H、ABO 反定型細胞、A2 細胞、紅細胞血型鑒定譜細胞等均購自上海血液生物醫(yī)藥公司；抗-AB 購自GIAGAST；人源抗-A、抗-B 血清為本實驗室自配，以上試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.2.2 血清學方法 采用經(jīng)典試管法檢測， 紅細胞正定型凝集強度＜4+為抗原減弱，血清反定型凝集強度＜2+為抗體減弱[1]，參照試劑相關說明書進行操作判斷。

2 結(jié)果

微量板法檢出ABO 血型正反定型不符樣本145 例中，用試管法檢測有48 例確為ABO 血型正反定型不一致，ABO 血型抗體減弱有 33 例，占68.75%，ABO 亞型10 例，占20.83%，不規(guī)則抗體5例，占10.42%，主要為抗-M 和冷抗體非特異性凝集，其中，不規(guī)則抗體中抗-M 抗體2 例，冷抗體非特異性凝集3 例。 其余的為正常ABO 血型。

ABO 血型中 A 型 24 例 、B 型 9 例、O 型 11例、AB 型 4 例。

3 討論

根據(jù)《血站技術操作規(guī)程》要求，ABO 血型是獻血者血液樣本血液檢測項目之一，正確鑒定ABO血型是保障用血安全的首要前提。 不論對于受血者還是供血者都是非常重要的， 準確無誤的ABO血型結(jié)果關系到用血者的生命與健康，為臨床輸血的及時性和準確性提供相關的保障措施。

目前ABO 血型檢測在多數(shù)實驗室廣泛采用的是免疫血清學方法，傳統(tǒng)的試管法有其不可替代的作用。 在采供血系統(tǒng)中，ABO 血型的檢測從初檢、復檢到最后的結(jié)果發(fā)布更是層層把關，確保發(fā)往臨床的每一血液產(chǎn)品血型的準確性，保證臨床用血安全。

表1 48 例ABO 血型正反定型不符原因分析

本次研究中，通過對2016 年和2017 年的無償獻血人群血樣中篩檢的48 例ABO 血型正反定型不符樣本的檢測， 在獻血人群樣本中所占比例為0.02%（48/192053），與杭州地區(qū)報道的無償獻血人群ABO 血型正反定型不符比例相近[2]。 考慮到研究對象為健康人群， 疾病狀態(tài)引起的ABO 血型正反定型不符的情況可予以排除。 分析ABO 血型正反定型不符的原因，血清抗A 和/或抗B 減弱為首要原因，實驗發(fā)現(xiàn)尤其以抗B 減弱多見，可能與人群機體的免疫抑制和不同的生活環(huán)境相關，不排除在判讀凝集強度上存在著一定的主觀差異。 抗體減弱多見于新生兒、 老年人或低丙種球蛋白血癥者，而健康成人很少出現(xiàn)，故對于研究中獻血員血樣抗-A、抗-B 的減弱原因有待于進一步探討。 在血清反定型實驗中，通過血清量的加倍或延長反應時間后凝集強度有所增強， 提示為ABO 血型抗體減弱[3]，同時其紅細胞直接抗人球蛋白試驗和血清抗體篩選均無異常的血樣， 該血液制品可供應臨床。

ABO 亞型的判定往往是根據(jù)與抗體反應強度、H 抗原強度、吸收放散能力等血清學試驗的反應格局[4]。 ABO 亞型也是造成正反不符的主要原因，其產(chǎn)生由基因突變所致，與疾病發(fā)生無關，血清學特點是獻血者紅細胞與試劑抗A 和/或抗B 反應減弱或無凝集，血清中有時含有不規(guī)則抗A1 或抗B1，鑒定時如只做正定型，易將亞型誤認為O 型[5]。 獻血者由于紅細胞上A 和/或B 抗原表達減少，這類ABO 亞型血液最好輸注給相同亞型患者的體內(nèi)，但由于其頻率極低，幾乎很難找到相同亞型的患者，為了避免誤輸給正常血型人群后，產(chǎn)生溶血反應或因同種免疫產(chǎn)生同種抗體的可能，ABO 亞型血液在各級血站多數(shù)情況下只能作報廢處理。因此， 在條件允許時可建立ABO 血型亞型的稀有血型庫，有的放矢，最大程度的尋求相同亞型的血液來源滿足臨床患者對亞型血液的需求，提高血液的利用率。

血清中不規(guī)則抗體的出現(xiàn)會干擾ABO 血型的反定型檢測[6]，容易把 A 或 B 型誤判為 O 型。 健康人群中不規(guī)則抗體的產(chǎn)生遠遠低于疾病人群，但一些天然抗體或非特異性抗體仍會造成ABO 血型判斷的干擾。 一般情況下，健康人血清中含少量冷凝集素，效價很低，當效價低于16，在4 度以下才有活性[7]。 本研究中冷抗體的處理，在提升反應孵育溫度，或用溫鹽水洗滌紅細胞后凝集強度減弱至消失，臨床使用時可給予保溫輸注或提升環(huán)境溫度的建議。 而大多數(shù)抗-M 為IgM 型的天然抗體，在25 度以上沒有活性，無臨床意義[8]。 但為了防止輸注后致敏病人紅細胞，再次輸血可能會產(chǎn)生溶血性輸血反應，如輸注過快，局部溫度過低，還可能造成急性溶血，所以對于存在不規(guī)則抗體的血清制品應予以報廢，減少臨床受血者發(fā)生輸血不良反應的風險。

對于獻血人群而言， 引起ABO 血型正反定型不符的原因除了以上情況外，還有紅細胞被人體內(nèi)不完全抗體致敏造成直接抗人球蛋白試驗（DAT）陽性的情況。 在獻血人群中有1:1000 至1:9000 的人被檢出DAT 陽性， 而沒有免疫性溶血的臨床癥狀[1]。引起DAT 陽性的因素很多，如藥物使用、病毒感染、自身免疫性疾病、溶血性貧血等。 有人報道，72%DAT 陽性的血源會縮短紅細胞壽命，臨床輸注后會影響患者的病情[9]。 在本次研究中尚未發(fā)現(xiàn)因DAT 陽性而造成ABO 血型正反定型不符的情況，考慮與其凝集強度與性質(zhì)有關，但是易造成臨床輸血科交叉配血次側(cè)配血不合，故對于這類紅細胞可予以報廢血處理。

ABO 血型正反定型不符為疑難血型鑒定范疇，不僅要靠傳統(tǒng)的血清學檢測，尤 其對于亞型確切型別的判斷還需結(jié)合分子生物學的檢測。 目前對這類血液產(chǎn)品的處理國家并沒有統(tǒng)一標準[10]，在遵循相容或相合性輸注的基礎上，需要我們每一位實驗人員強化理論知識，掌握更多的實驗技能，適應科學醫(yī)療事業(yè)不斷發(fā)展的趨勢，做好血型，保障臨床用血安全。