曾研章

（陽江市婦幼保健院檢驗科，廣東 陽江 529500）

地中海貧血（MA）又稱海洋性貧血，是臨床較為常見的遺傳性溶血性貧血疾病，其致病機(jī)制是由于患兒遺傳性的基因缺陷，從而導(dǎo)致組成血紅蛋白的珠蛋白鏈合成缺失引起， 好發(fā)于中南亞沿海地區(qū)，可導(dǎo)致患兒發(fā)育不良，畸形等癥狀，甚至造成成活率低[1，2]。 其中 αβ 復(fù)合型 MA 是其常見的貧血類型，主要發(fā)生在父母α 與βMA 雜合婚配而出生的兒童中，其臨床可能無表現(xiàn)，尤其是輕型復(fù)合型的個體結(jié)合，易導(dǎo)致出現(xiàn)MA 后代，故進(jìn)行αβ 復(fù)合型MA 檢測，降低MA 患兒的出生具有重要的臨床意義[3，4]。 對此，本研究通過給予陽江市 β-MA 患兒α-MA 基因檢測，探討該地區(qū)的兒童αβ 復(fù)合-MA的基因檢測分析結(jié)果， 并為后續(xù)臨床治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取 2016 年 6 月至 2018 年 6 月本院β-MA 患兒375 例并進(jìn)行α-MA 基因檢測，納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴經(jīng)臨床癥狀、實驗室、影像學(xué)等檢查證實為β-MA[5]，⑵年齡≤7 歲，⑶無溝通障礙或精神病病史者，⑷患者或其家屬簽署知情同意書；排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴就診前經(jīng)過貧血治療，⑵有心、肝、腎等嚴(yán)重性疾病，⑶拒絕或終止本次研究者;其中男180例，女 195 例，年齡 1～6 歲，平均 3.29±1.25 歲，體質(zhì)量指數(shù) 19.31～21.25kg/m2，平均 24.62±2.05kg/m2，本次研究已經(jīng)我院倫理委員會審批且通過， 所有數(shù)據(jù)來源均真實可靠。

1.2 基因檢測方法 對納入的所有患兒進(jìn)行α-MA基因檢測，即利用PCR-導(dǎo)流雜交技術(shù)檢測 3 種常見的缺失型 α－MA 基因 (－－SEA、－α3.7和－α4.2);及 3 種常見的突變型 α－MA 基因(QSM、CSM 和 WSM)，試劑盒均購自廣州凱普生物技術(shù)有限公司。

1.3 常規(guī)指標(biāo)檢測 抽取所有兒童上臂靜脈血3ml置入ED-TA-K2 抗凝試管中， 血細(xì)胞參數(shù)采用希森美康1000i 血細(xì)胞分析儀， 血紅蛋白分析采用Sebia 毛細(xì)管電泳儀， 檢測記錄所有患兒的平均紅細(xì)胞體積（MCV）、血紅蛋白濃度（HGB）、平均紅細(xì)胞血紅蛋量（MCH）、血紅蛋白 A2（HbA2）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 22.0 軟件處理，計量資料均符合正態(tài)分布，以（±s）表示，多組計量資料的比較采用方差分析并通過SNK-q 檢驗進(jìn)行進(jìn)一步的組間比較，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 β-MA 患兒中 αβ 復(fù)合-MA 發(fā)生率 375 例β-MA 患兒中，αβ 復(fù)合-MA 者有 122 例（32.53%），其中輕型 70 例（15.73%），分別為－α3.7/αα20 例，－α4.2/αα11 例，－－SEA/αα5 例，αWSα/αα17 例，－α3.7/－α4.26 例 ，－－SEA/－α3.7、 －α3.7/αWSα、 －α4.2/αWSα、αWSα/αWSα 各 2 例，－α3.7/－α3.7、－α4.2/－α4.2、αQSα/αα 各 1例，共檢出 24 種基因型組合，輕型 αβ 復(fù)合-MA 者以－α3.7/αα 突變頻率最高。 重型 52 例（16.80%），分別為分別為-α3.7/αα20 例，-α3.7/αWSα18 例，-α4.2/αα、αWSα/αα 各 4 例，--SEA/αα、-α4.2/ αWSα 各 2 例，-α3.7/-α4.2、αWSα/αWSα 各 1 例，共檢出 15 種基因型組合，重型 αβ 復(fù)合-MA 者以-α3.7/αα 突變頻率最高，見表1，表2。

2.2 不同基因型αβ 復(fù)合-MA 者的血液分析 不同基因型 αβ 復(fù)合-MA 者平均 MCV、HGB、MCH、HbA2 間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

3 討論

MA 是臨床較為常見的血液系統(tǒng)遺傳病，好發(fā)區(qū)域為我國廣東、海南、廣西等地區(qū)中，其中α-地貧的發(fā)病率為3.9%～14.9%；β-地貧則為0.9%～5.9%[5]。 而根據(jù)地貧遺傳規(guī)律，如果是相同類型的MA基因攜帶者進(jìn)行婚配， 生育αβ 復(fù)合型MA 的概率為25.0%。 且隨著我國幾年來二胎政策的開放，其發(fā)病率有明顯上升的趨勢，故臨床如何針對性的對αβ 復(fù)合型MA 進(jìn)行基因檢測， 有利于確保后代的健康出生[6-8]。

表1 70 例輕型αβ 復(fù)合型MA 基因突變類型(n)

表2 52 例重型αβ 復(fù)合型MA 基因突變類型(n)

表3 不同基因型αβ 復(fù)合-MA 者的血液分析

對此，本研究通過給予所有β-MA 患兒α-MA基因檢測， 結(jié)果發(fā)現(xiàn) 375 例 β-MA 患兒中，αβ 復(fù)合-MA 者有 122 例(32.53%)，其中輕型 70 例（15.73%），以-α3.7/αα（CD41-42(- TCTT)）突變頻率最高，重型 52 例（16.80%），以-α3.7/αα 突變頻率最高，而夏威夷等[9]人的研究結(jié)果也證實了β-MA 患兒可能攜帶 αβ 復(fù)合基因， 表明該地區(qū)患兒 αβ 復(fù)合-MA 基因攜帶的發(fā)生率較高。 這可能由于MA 是最早在分子水平上闡述其病理學(xué)機(jī)制的人類遺傳病之一，引起β-MA 的分子機(jī)制主要是β 珠蛋白基因點突變，α-MA 發(fā)生的分子機(jī)制則以α 珠蛋白基因缺失為主，亦有少數(shù)因α 珠蛋白基因的點突變導(dǎo)致其功能障礙，缺失數(shù)目和范圍有種族和地區(qū)差異，且在已知的300 多種突變類型，中國以CD41-42(-TCTT)最為常見，這與本研究的結(jié)果基本一致[10，11]。

同時，本研究還發(fā)現(xiàn)不同基因型αβ 復(fù)合-MA者的平均 MCV、HGB、MCH、HbA2 間比較(P＞0.05)，表明不同基因型αβ 復(fù)合-MA 者的血液學(xué)特征存在差異，而鄭琳、梁志洪等[12，13]人的研究也提示血細(xì)胞和血紅蛋白在αβ 復(fù)合-MA 中具有診斷價值。這可能由于在αβ 復(fù)合-MA 患者中，隨著有功能的α－珠蛋白基因拷貝數(shù)減少，MCV、MCH 甚至有所升高， 并且 α、β 的復(fù)合突變也導(dǎo)致 α、β 鏈的合成都有所降低，繼而使HbA2 相對較高，同時α－地中海貧血基因中和β－地中海貧血表現(xiàn)的程度依賴于失活的α 珠蛋白基因個數(shù)， 通常失活1 個α 基因?qū)Ζ拢刂泻Ｘ氀憩F(xiàn)沒有明顯影響，而失活 3 個α 基因?qū)Ζ拢?地中海貧血的臨床表現(xiàn)影響就會很明顯，表現(xiàn)為HGB 指標(biāo)明顯下降。 此外，隨著α、β鏈的合成降低，也會一定程度上影響兩類肽鏈的平衡狀態(tài)，可能有進(jìn)一步加重αβ 復(fù)合-MA，但本研究中基于不同基因型αβ 復(fù)合-MA 者的血液學(xué)分析比較，雖然部分指標(biāo)差異有統(tǒng)計學(xué)意義，但也有部分指標(biāo)難以區(qū)分，故不能準(zhǔn)確鑒別復(fù)合型個體與單純β-MA 雜合子個體。

由于輕型αβ 復(fù)合-MA 難以引起疾病的表型加重，故在婚檢、產(chǎn)檢中應(yīng)重視父母雙方是否是α－MA、β－MA 雜合子個體或是 αβ 復(fù)合型－MA 基因攜帶者，如若父母是以上基因攜帶者，則可能增加重型-MA 后代的風(fēng)險。 為了能夠使αβ 復(fù)合型地中海貧血基因攜帶者得到及時、準(zhǔn)確的遺傳，臨床應(yīng)重視父母是否是上述基因的攜帶者[14，15]。

綜上所述，αβ 復(fù)合-MA 的發(fā)生率高， 輕型者以－α3.7/αα 突變?yōu)橹鳎?重型者以以－α3.7/αα 突變?yōu)橹?，不同基因型α?復(fù)合-MA 者血液學(xué)特征存在差異但不能準(zhǔn)確鑒別復(fù)合型個體與單純β-MA 雜合子個體，應(yīng)行αβ-MA 基因檢測診斷，以及時發(fā)現(xiàn)并采取有效的干預(yù)措施。