吳爭(zhēng)，夏芝璐，雷達(dá)

（江西省疾病預(yù)防控制中心，江西 南昌 330029）

大豆油是日常飲食中一種常見(jiàn)的烹調(diào)用油，在提供人體能量和必需脂肪酸方面起著重要作用。 由于轉(zhuǎn)基因大豆成本低出油率高，轉(zhuǎn)基因大豆油已經(jīng)占據(jù)國(guó)內(nèi)主要食用油市場(chǎng)，轉(zhuǎn)基因大豆油也成為我國(guó)消費(fèi)者最易獲取的轉(zhuǎn)基因食品，對(duì)其進(jìn)行安全性的評(píng)估顯得尤為重要。 我國(guó)和亞洲大多數(shù)國(guó)家一樣，國(guó)民都選擇以碳水化合物（谷類(lèi)、豆類(lèi)）為主食[1]，雖然隨著經(jīng)濟(jì)和科技的發(fā)展，國(guó)民的膳食營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)得到持續(xù)不斷的改善，但低收入人群的日常飲食中仍然存在以素食為主、 碳水化合物比例高[2]、缺乏優(yōu)質(zhì)的動(dòng)物性蛋白等營(yíng)養(yǎng)不均衡的問(wèn)題[3]，飲食結(jié)構(gòu)不合理是造成機(jī)體患重大疾病的風(fēng)險(xiǎn)因素[4]。 由于低收入人群通常在選擇食用油時(shí)更傾向選擇價(jià)格低廉的轉(zhuǎn)基因大豆油，為了解轉(zhuǎn)基因大豆油是否會(huì)進(jìn)一步增加這一類(lèi)人群健康風(fēng)險(xiǎn)，本次研究通過(guò)建立動(dòng)物模型模擬特殊人群的健康狀況，并觀察了轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)動(dòng)物模型免疫功能的影響，報(bào)告如下。

1 儀器與材料

1.1 受試物 本次實(shí)驗(yàn)所用轉(zhuǎn)基因大豆油、非轉(zhuǎn)基因大豆油均從大型超市購(gòu)得。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 本實(shí)驗(yàn)室選用的SPF 級(jí)ICR 小鼠。由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供， 并由該公司提供全價(jià)標(biāo)準(zhǔn)小鼠生長(zhǎng)飼料和造模用低營(yíng)養(yǎng)小鼠飼料（蛋白質(zhì)含量9%、粗脂肪含量3%）。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(湘)2011-0003；

1.3 儀器和試劑 顯微鏡、生物安全柜、冷凍離心機(jī)、電子天平、721 分光光度計(jì)、酶標(biāo)儀、CO2培養(yǎng)箱、DNFB(二硝基氟苯)、1640 完全培養(yǎng)基、刀豆蛋白A（ConA）、無(wú)菌脫纖維綿羊紅細(xì)胞、無(wú)菌脫纖維雞紅細(xì)胞、印度墨汁。

2 方法

試驗(yàn)方法參照 《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范2003 年版》中功能學(xué)評(píng)價(jià)部分[5]進(jìn)行。

2.1 動(dòng)物模型和劑量分組 取體重范圍18～20g 的ICR 雌性小鼠，使用低營(yíng)養(yǎng)小鼠飼料喂養(yǎng)建立模型，7 天后，按體重隨機(jī)分組。 將模型動(dòng)物分為五個(gè)實(shí)驗(yàn)大組， 每實(shí)驗(yàn)大組設(shè)置轉(zhuǎn)基因大豆油低、 中、高三個(gè)劑量組，按人群可能日攝入量[6]的 5、10、20 倍即 3.6、7.2、14.4g/kgBW，給予轉(zhuǎn)基因大豆油;設(shè)置一個(gè)非轉(zhuǎn)基因大豆油組按14.4g /kgBW 給予非轉(zhuǎn)基因大豆油；設(shè)置一個(gè)模型對(duì)照組，給予蒸餾水；模型動(dòng)物分組后繼續(xù)使用低營(yíng)養(yǎng)飼料喂養(yǎng);另選用同批次購(gòu)買(mǎi)的使用全價(jià)標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)的小鼠設(shè)置一個(gè)正常對(duì)照組，給予蒸餾水；各劑量組動(dòng)物數(shù)均為10 只。 小鼠連續(xù)灌胃30 天后開(kāi)始試驗(yàn)。 免疫實(shí)驗(yàn)一組進(jìn)行遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)； 免疫實(shí)驗(yàn)二組進(jìn)行碳廓清實(shí)驗(yàn)； 免疫實(shí)驗(yàn)三組進(jìn)行淋巴器官/體重比值測(cè)定和ConA 誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)、NK 細(xì)胞活性測(cè)定; 免疫實(shí)驗(yàn)四組進(jìn)行血清溶血素的測(cè)定和抗體生成細(xì)胞檢測(cè);免疫實(shí)驗(yàn)五組進(jìn)行小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。

2.2 實(shí)驗(yàn)步驟

2.2.1 臟器/體重比值測(cè)定[5]試驗(yàn) 處死動(dòng)物，取小鼠胸腺、 脾臟， 稱(chēng)量后計(jì)算臟器/體重比即臟器指數(shù)，計(jì)算公式如下：

2.2.2 遲發(fā)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)[5]DNFB 致敏，攻擊，誘導(dǎo)小鼠DTH，測(cè)定鼠耳腫脹程度。

2.2.3 ConA 誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)[5]（MTT法） 處死動(dòng)物，取脾臟制成脾細(xì)胞懸液，經(jīng)過(guò)增殖后，按MTT 法，在570 nm 處比色測(cè)定，比較加與不加ConA 的光密度值之差，作統(tǒng)計(jì)處理。

2.2.4 血清溶血素試驗(yàn)[5]取全血分離血清，按血凝法觀察綿羊紅細(xì)胞凝集程度，計(jì)算抗體積數(shù)。

2.2.5 抗體生成細(xì)胞試驗(yàn)[5]用脫纖維綿羊紅細(xì)胞免疫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物4～5 天后，處死，取脾臟制成脾細(xì)胞懸液，Jerne 改良玻片法，計(jì)數(shù)溶血空斑數(shù)。

2.2.6 小鼠碳廓清試驗(yàn)[5]小鼠尾靜脈注射1∶4 稀釋的印度墨汁，注入后立即計(jì)時(shí)，分別于2、10 min時(shí)從眼靜脈叢中取血20μl 并將其加入Na2CO3溶液，用分光光度計(jì)在600 nm 波長(zhǎng)處測(cè)光密度值。以Na2CO3溶液作空白對(duì)照， 根據(jù)動(dòng)物體重和脾重計(jì)算吞噬指數(shù)。

2.2.7 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)[5]每鼠腹腔注射20%雞紅細(xì)胞懸液1ml，間隔30min 頸椎脫臼處死，固定于鼠板上，剪開(kāi)腹壁皮膚，注射生理鹽水2mL，轉(zhuǎn)動(dòng)鼠板1min，吸出腹腔洗液1ml，分滴于 2 片玻片上，37℃孵箱 30min， 用生理鹽水漂洗、晾干，以丙酮+甲醇(1+1)固定，4%Giemsa-磷酸緩沖液染色3min，再以蒸餾水漂洗晾干，用油鏡鏡檢，計(jì)算吞噬百分率和吞噬指數(shù)。

2.2.8 NK 細(xì)胞活性測(cè)定[5]取脾臟，制成細(xì)胞懸液，按乳酸脫氫酶(LDH)法，用酶標(biāo)儀在490 nm 處測(cè)定光密度值A(chǔ)。

2.3 統(tǒng)計(jì)方法 數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 建立數(shù)據(jù)庫(kù)， 計(jì)算均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差（以±s 表示），用 spss 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA），以 α=0.05，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 動(dòng)物模型一般狀況 動(dòng)物模型在給予低營(yíng)養(yǎng)飼料造模期間，體重增長(zhǎng)緩慢；實(shí)驗(yàn)初、中、末期及總體重增長(zhǎng)顯著低于正常對(duì)照組動(dòng)物； 同時(shí)個(gè)別動(dòng)物出現(xiàn)毛發(fā)枯槁、疏松、畏寒、反應(yīng)遲頓等表現(xiàn)。

3.2 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)模型動(dòng)物體重的影響 見(jiàn)表1，模型對(duì)照組各周體重及總體重增長(zhǎng)均低于正常對(duì)照組，差異有顯著性（P＜0.05）。 各劑量組動(dòng)物實(shí)驗(yàn)初期體重與模型對(duì)照組比較無(wú)差異（P＞0.05）；由圖1 和表1 可見(jiàn)轉(zhuǎn)基因高劑量組、非轉(zhuǎn)基因組在第三、四周的體重以及總體重增長(zhǎng)高于模型對(duì)照組，差異有顯著性（P＜0.05）；其他各劑量組各周體重及總體重增長(zhǎng)與模型對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 實(shí)驗(yàn)期間各劑量組動(dòng)物體重(±s，n=10)

注：△ 表示與正常對(duì)照組比較(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 * 表示與模型對(duì)照組比較(P＜0.05)， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

劑量分組 初重(g) 第一周(g) 第二周(g) 第三周(g) 第四周(g) 增重(g)轉(zhuǎn)基因高劑量轉(zhuǎn)基因中劑量轉(zhuǎn)基因低劑量模型對(duì)照組非轉(zhuǎn)基因組正常對(duì)照組20.3±0.7 20.3±1.0 20.6±0.8 20.7±1.2△20.6±1.1 25.2±0.8 21.9±0.8 21.7±1.2 21.9±0.6 21.6±0.9△22.2±0.8 26.6±0.6 23.5±1.0 23.3±1.7 23.1±1.1 23.2±1.2△23.5±1.1 28.0±1.0 26.4±0.7*25.2±1.1 25.0±1.1 25.0±1.3△26.6±0.5*32.1±1.3 29.6±0.9*28.4±1.8 28.1±1.3 28.2±1.7△30.0±1.6*34.7±1.3 9.32±1.0*8.11±1.4 7.45±1.6 7.54±1.7△9.38±1.8*9.49±1.5

圖1 實(shí)驗(yàn)期間受試物對(duì)各劑量組動(dòng)物體重的影響

3.3 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)模型動(dòng)物淋巴器官/體重比值的影響 模型對(duì)照組脾臟、胸腺重量、胸腺/體重比值和脾臟/體重比值均低于正常對(duì)照組， 差異有顯著性（P＜0.01）；轉(zhuǎn)基因高劑量組、非轉(zhuǎn)基因組胸腺重量、胸腺/體重比值高于模型對(duì)照組，差異有顯著性（P＜0.05）。其他各劑量組與模型對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見(jiàn)表2。

3.4 轉(zhuǎn)基因大豆油小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果各劑量組對(duì)DNFB 所致小鼠耳廓遲發(fā)變態(tài)反應(yīng)的影響， 模型對(duì)照組小鼠耳廓腫脹度低于正常對(duì)照組，差異有顯著性（P＜0.01）；轉(zhuǎn)基因高劑量組、非轉(zhuǎn)基因組小鼠耳廓腫脹度與模型對(duì)照組比較， 有顯著增加（P＜0.01）；其他劑量組與模型對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見(jiàn)表3。

表3 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)的影響(±s，n=10)

表3 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)的影響(±s，n=10)

注：△ 表示與正常對(duì)照組比較(P＜0.05)，△△表示與正常對(duì)照組比較(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 * 表示與模型對(duì)照組比較(P＜0.05)，** 表示與模型對(duì)照組比較(P＜0.01) 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

劑量分組 DNFB 誘導(dǎo)DTH 左右耳重量差(mg)轉(zhuǎn)基因高劑量轉(zhuǎn)基因中劑量轉(zhuǎn)基因低劑量模型對(duì)照組非轉(zhuǎn)基因組正常對(duì)照組7.70 ±1.16**4.90 ±0.99 4.60 ±1.26 4.40 ±1.07△△7.30 ±0.67**8.70 ±0.67

3.5 轉(zhuǎn)基因大豆油脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)結(jié)果 模型對(duì)照組淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力低于正常對(duì)照組，差異有顯著性（P＜0.01）；轉(zhuǎn)基因高劑量組、非轉(zhuǎn)基因組淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力與模型對(duì)照組比較， 有顯著提高（P＜0.01）；其他劑量組與模型對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見(jiàn)表4。

3.6 轉(zhuǎn)基因大豆油小鼠血清溶血素試驗(yàn)結(jié)果 模型對(duì)照組溶血素滴度水平低于正常對(duì)照組，差異有顯著性（P＜0.01）；其他劑量組與模型對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見(jiàn)表5。

3.7 轉(zhuǎn)基因大豆油抗體生成細(xì)胞試驗(yàn)結(jié)果 模型對(duì)照組抗體生成細(xì)胞數(shù)低于正常對(duì)照組， 差異有顯著性（P＜0.01）；其他劑量組與模型對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見(jiàn)表6。

表2 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)模型動(dòng)物淋巴器官/體重比值的影響(±s，n=10)

表2 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)模型動(dòng)物淋巴器官/體重比值的影響(±s，n=10)

注：△ 表示與正常對(duì)照組比較(P＜0.05)，△△表示與正常對(duì)照組比較(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 * 表示與模型對(duì)照組比較(P＜0.05)，** 表示與模型對(duì)照組比較(P＜0.01) 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

0.099 ±0.013 0.092 ±0.017 0.089 ±0.011 0.090 ±0.012△△0.100 ±0.015 0.169 ±0.046劑量分組 脾重(g)轉(zhuǎn)基因高劑量轉(zhuǎn)基因中劑量轉(zhuǎn)基因低劑量模型對(duì)照組非轉(zhuǎn)基因組正常對(duì)照組胸腺重(g) 脾體比%0.086 ±0.010*0.074 ±0.017 0.073 ±0.014 0.070 ±0.016△△0.088 ±0.010**0.109 ±0.013 3.32 ±0.41 3.20 ±0.41 3.15 ±0.29 3.16 ±0.29△△3.32 ±0.37 4.86 ±1.18胸體比%2.900 ±0.290*2.601 ±0.478 2.575 ±0.428 2.467 ±0.516△△2.934 ±0.256*3.140 ±0.283

表4 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)ConA 誘導(dǎo)脾淋巴細(xì)胞增殖的影響(±s，n=10)

表4 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)ConA 誘導(dǎo)脾淋巴細(xì)胞增殖的影響(±s，n=10)

注：△ 表示與正常對(duì)照組比較 (P＜0.05)，△△表示與正常對(duì)照組比較(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 * 表示與模型對(duì)照組比較(P＜0.05)，** 表示與模型對(duì)照組比較(P＜0.01) 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

劑量分組 ConA 誘導(dǎo)脾淋巴細(xì)胞增殖OD 差值轉(zhuǎn)基因高劑量轉(zhuǎn)基因中劑量轉(zhuǎn)基因低劑量模型對(duì)照組非轉(zhuǎn)基因組正常對(duì)照組0.186 ±0.054**0.130 ±0.080 0.126 ±0.076 0.119 ±0.045△△0.193 ±0.066**0.277 ±0.089

表5 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)小鼠溶血素滴度水平的影響(±s，n=10)

表5 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)小鼠溶血素滴度水平的影響(±s，n=10)

注：△ 表示與正常對(duì)照組比較 (P＜0.05)，△△表示與正常對(duì)照組比較(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

163.600 ±12.63 161.500 ±16.17 153.400 ±10.42 159.100 ±17.23△△165.800 ±9.68 224.700 ±24.98劑量分組 血清溶血素(抗體積數(shù))轉(zhuǎn)基因高劑量轉(zhuǎn)基因中劑量轉(zhuǎn)基因低劑量模型對(duì)照組非轉(zhuǎn)基因組正常對(duì)照組

表6 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)抗體生成細(xì)胞的影響(±s，n=10)

表6 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)抗體生成細(xì)胞的影響(±s，n=10)

注：△ 表示與正常對(duì)照組比較 (P＜0.05)，△△表示與正常對(duì)照組比較(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

927.5 ±300.2 952.5 ±393.2 935.0 ±300.5 925.5 ±335.3△△983.5 ±293.1 1951.0 ±648.8劑量分組 溶血空斑數(shù)(/106 脾細(xì)胞)轉(zhuǎn)基因高劑量轉(zhuǎn)基因中劑量轉(zhuǎn)基因低劑量模型對(duì)照組非轉(zhuǎn)基因組正常對(duì)照組

3.8 轉(zhuǎn)基因大豆油小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)結(jié)果 模型對(duì)照組巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力低于正常對(duì)照組，差異有顯著性（P＜0.01）；非轉(zhuǎn)基因組巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力高于模型對(duì)照組，差異有顯著性（P＜0.01）；其他劑量組與模型對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見(jiàn)表7。

3.9 轉(zhuǎn)基因大豆油小鼠碳廓清試驗(yàn)結(jié)果 模型對(duì)照組碳廓清能力低于正常對(duì)照組， 差異有顯著性（P＜0.01）； 非轉(zhuǎn)基因組碳廓清能力高于模型對(duì)照組，差異有顯著性（P＜0.01）；其他劑量組與模型對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見(jiàn)表8。

3.10 轉(zhuǎn)基因大豆油NK 細(xì)胞活性試驗(yàn)結(jié)果 模型對(duì)照組NK 細(xì)胞活性低于正常對(duì)照組，差異有顯著性（P＜0.01）；非轉(zhuǎn)基因組NK 細(xì)胞活性高于模型對(duì)照組，差異有顯著性（P＜0.01）；其他劑量組與模型對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見(jiàn)表9。

表7 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力的影響(±s，n=10)

表7 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力的影響(±s，n=10)

注：△表示與正常對(duì)照組比較(P＜0.05)，△△表示與正常對(duì)照組比較(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 * 表示與模型對(duì)照組比較(P＜0.05)，** 表示與模型對(duì)照組比較(P＜0.01) 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

劑量分組轉(zhuǎn)基因高劑量轉(zhuǎn)基因中劑量轉(zhuǎn)基因低劑量模型對(duì)照組非轉(zhuǎn)基因組正常對(duì)照組吞噬百分率（%）28.44 ±2.16 27.43 ±2.42 28.13 ±1.60 26.93 ±2.84△△32.64 ±1.46**50.76 ±2.77吞噬指數(shù)0.14 ±0.03 0.12 ±0.03 0.14 ±0.03 0.12 ±0.02△△0.18 ±0.03**0.31 ±0.03

表8 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)碳廓清的影響(±s，n=10)

表8 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)碳廓清的影響(±s，n=10)

注：△ 表示與正常對(duì)照組比較 (P＜0.05)，△△表示與正常對(duì)照組比較(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 * 表示與模型對(duì)照組比較(P＜0.05)，** 表示與模型對(duì)照組比較(P＜0.01) 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

5.61 ±0.56 5.23 ±0.65 5.37 ±0.41 5.29 ±0.46△△6.90 ±0.44**7.24 ±0.50劑量分組 碳廓清吞噬指數(shù)轉(zhuǎn)基因高劑量轉(zhuǎn)基因中劑量轉(zhuǎn)基因低劑量模型對(duì)照組非轉(zhuǎn)基因組正常對(duì)照組

表9 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)NK 細(xì)胞活性的影響(±s，n=10)

表9 轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)NK 細(xì)胞活性的影響(±s，n=10)

注：△ 表示與正常對(duì)照組比較 (P＜0.05)，△△表示與正常對(duì)照組比較(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 * 表示與模型對(duì)照組比較(P＜0.05)，** 表示與模型對(duì)照組比較(P＜0.01) 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

53.46 ±4.79 53.89 ±7.46 50.49 ±8.29 49.96 ±9.11△△63.51 ±9.03**73.93 ±7.07劑量分組 NK 細(xì)胞活性(%)轉(zhuǎn)基因高劑量轉(zhuǎn)基因中劑量轉(zhuǎn)基因低劑量模型對(duì)照組非轉(zhuǎn)基因組正常對(duì)照組

4 討論

目前國(guó)際上對(duì)轉(zhuǎn)基因食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，大多采納由歐洲經(jīng)濟(jì)發(fā)展組織（OECD）提出的“實(shí)質(zhì)等同”原則，即轉(zhuǎn)基因食品成分與現(xiàn)有的傳統(tǒng)食物成分大體等同，那么它們就被視為具有等同的安全性。 而該原則從其頒布之始，就因?qū)嶒?yàn)數(shù)據(jù)不足等科學(xué)方法缺陷備受爭(zhēng)論[7，8]。國(guó)內(nèi)有學(xué)者指出在傳統(tǒng)毒理學(xué)方法評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)基因食品的過(guò)程中，使用處在快速生長(zhǎng)期的健康實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，不能代表整體人群的健康狀況；喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的AIN-93 標(biāo)準(zhǔn)配方飼料，屬于高營(yíng)養(yǎng)飼料，其營(yíng)養(yǎng)水平（蛋白含量達(dá)20%）高于人類(lèi)普遍營(yíng)養(yǎng)水平； 高營(yíng)養(yǎng)水平一方面促進(jìn)了機(jī)體的解毒效應(yīng)，另一方面使受試物營(yíng)養(yǎng)缺陷等負(fù)面效應(yīng)也被掩蓋[9]。 龍偉等[10]將轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因大豆油分別給予使用純玉米飼養(yǎng)的小鼠，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)基因大豆油組小鼠免疫器官指數(shù)均低于非轉(zhuǎn)基因大豆油組，但該研究并未報(bào)道受試動(dòng)物具體免疫功能的改變。

為了評(píng)估轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)特殊人群免疫功能的影響，本次研究使用特定的低營(yíng)養(yǎng)配方飼料建立動(dòng)物模型，由表1～9 可見(jiàn)實(shí)驗(yàn)期間模型對(duì)照組體重增長(zhǎng)明顯低于正常對(duì)照組；除了一般表現(xiàn)外，模型對(duì)照組小鼠在實(shí)驗(yàn)?zāi)┢谂K器指數(shù)、細(xì)胞免疫功能、體液免疫功能、 巨噬細(xì)胞吞噬功能、NK 細(xì)胞活性均低于正常對(duì)照組（P＜0.01），符合因營(yíng)養(yǎng)不良[11]引起免疫力下降的特征，因此動(dòng)物模型成立。

本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)基因大豆油高劑量組末期體重、總體重增長(zhǎng)、胸腺指數(shù)均高于模型對(duì)照組（P＜0.05），因此提示高劑量組受試對(duì)動(dòng)物胸腺有營(yíng)養(yǎng)支持作用。 通過(guò)遲發(fā)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)檢測(cè)了各劑量組動(dòng)物的細(xì)胞免疫功能，由表3、4 可見(jiàn)轉(zhuǎn)基因大豆油高劑量組遲發(fā)變態(tài)反應(yīng)和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力均高于模型對(duì)照組 （P＜0.01）， 提示高劑量組受試物對(duì)細(xì)胞免疫功能有促進(jìn)作用。

由于在前期預(yù)實(shí)驗(yàn)中觀察到部分高劑量組受試動(dòng)物出現(xiàn)大便稀溏現(xiàn)象，而中、低劑量未出現(xiàn)此情況，所以我們?cè)谡綄?shí)驗(yàn)中設(shè)置了非轉(zhuǎn)基因大豆油組，灌胃容量參照轉(zhuǎn)基因大豆油高劑量組，將實(shí)驗(yàn)結(jié)果和模型對(duì)照組比較，以此排除大豆油本身對(duì)試驗(yàn)的不良影響;我們觀察到非轉(zhuǎn)基大豆油組同樣具有提高胸腺指數(shù)和促進(jìn)細(xì)胞免疫的作用(見(jiàn)表1-4），同時(shí)由表7～9 可見(jiàn)，非轉(zhuǎn)基大豆油組巨噬細(xì)胞吞噬功能[12]和NK 細(xì)胞活性[13]均高于模型對(duì)照組，差異有顯著性（P＜0.01）；NK 細(xì)胞活力和單核細(xì)胞的吞噬能力是衡量機(jī)體非特異性免疫功能的重要指標(biāo)，提示非轉(zhuǎn)基大豆油組動(dòng)物的非特異性免疫功能也有提升。

胸腺是T 淋巴細(xì)胞增殖和分化的場(chǎng)所[14]，胸腺微環(huán)境也是T 淋巴細(xì)胞選擇性發(fā)育的重要條件。 T淋巴細(xì)胞中的Th1、Th2 亞群都是遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的效應(yīng) T 細(xì)胞， 同時(shí) Th1 亞群還分泌 IFN-r、IL-2等細(xì)胞因子增強(qiáng)細(xì)胞介導(dǎo)的抗感染免疫，IFN-r 可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，IFN-r、IL-2 可增強(qiáng)NK細(xì)胞的活性。 綜合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們認(rèn)為轉(zhuǎn)基因大豆油和非轉(zhuǎn)基因大豆油都對(duì)受試動(dòng)物胸腺有營(yíng)養(yǎng)支持作用，對(duì)受試動(dòng)物的細(xì)胞免疫功能都能起到一定促進(jìn)作用，但非轉(zhuǎn)基因大豆油效果更好；本次研究未觀察到轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)受試動(dòng)物其它免疫功能產(chǎn)生不良影響。

近年來(lái)我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品加大監(jiān)管力度[15-17]，但消費(fèi)者的疑慮、反對(duì)聲一直不斷[18，19]，世界衛(wèi)生組織（WHO）也認(rèn)為，國(guó)際上生物安全方面的評(píng)估技術(shù)尚不成熟，研究更加嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)的評(píng)價(jià)方法是消除公眾疑慮及促進(jìn)轉(zhuǎn)基因事業(yè)健康發(fā)展的關(guān)鍵所在。 本次研究建立了低營(yíng)養(yǎng)水平動(dòng)物模型，該造模方法與傳統(tǒng)腹腔注射免疫抑制劑[20]建立動(dòng)物模型相比具有：操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性好、減少動(dòng)物機(jī)會(huì)感染等優(yōu)點(diǎn)，能更好地模擬現(xiàn)實(shí)生活中特殊人群的實(shí)際情況。 本次研究為評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)基因大豆油對(duì)免疫系統(tǒng)的營(yíng)養(yǎng)效應(yīng)以及指導(dǎo)人群合理食用提供了實(shí)驗(yàn)參考數(shù)據(jù);為科研人員更安全地開(kāi)發(fā)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品提供了新的思路。