(江蘇九旭藥業(yè)有限公司,徐州 221200)

口服補液鹽散(Ⅲ)為復(fù)方散劑[1],主要治療腹瀉引起的輕、中度脫水,并可用于補充鈉、鉀、氯,且對急性腹瀉脫水有優(yōu)異療效,是世界衛(wèi)生組織推薦的治療急性腹瀉的藥物[2]。

根據(jù)ICH Q3D 元素雜質(zhì)指導(dǎo)原則,口服制劑在非有意加入的情況下,風(fēng)險評估中應(yīng)考慮的元素包括鎘、鉛、砷、汞、鈷、釩和鎳等7種元素雜質(zhì),這些元素可能為原料引入,也可能為生產(chǎn)設(shè)備和內(nèi)包裝引入,同時因為口服補液鹽散(Ⅲ)原料中含有鋁鹽和鋇鹽的檢查項目,因此擬對上述鎘、鉛、砷、汞、鈷、釩、鎳、鋁和鋇等9種元素進行測定。

根據(jù)ICH Q3D 元素雜質(zhì)指導(dǎo)原則中各元素的每日允許暴露量(PDE)及口服補液鹽散(Ⅲ)日服用最大劑量(按100 g計),計算各元素的限度值。各元素的PDE和限度值見表1。

表1 各元素的PDE和限度值Tab.1 PDE and limit value of each element

目前,用于測定金屬元素的方法有很多,主要有原子吸收光譜法[3-5]、原子發(fā)射光譜法[6-8]、電化學(xué)測定法[9]等,但這些方法只能測定單個元素,操作繁瑣。電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)的靈敏度較高,具有多元素同時快速測定,干擾較少等[10-13]優(yōu)點。本工作采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法測定口服補液鹽散(Ⅲ)中鎘、鉛、砷、汞、鈷、釩、鎳、鋁和鋇等9種金屬元素的含量。

1 試驗部分

1.1 儀器與試劑

Agilent 7800型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀。

鎘、鉛、砷、汞、鈷、釩、鎳、鋁、鋇標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:100 mg·L－1。

鎘、砷、汞、鈷、釩、鎳、鋁、鋇標(biāo)準(zhǔn)溶液:移取適量的100 mg·L－1的鎘、砷、汞、鈷、釩、鎳、鋁、鋇標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液,用含0.5%(體積分?jǐn)?shù),下同)鹽酸的2%(體積分?jǐn)?shù),下同)硝酸溶液稀釋至所需質(zhì)量濃度。

鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液:移取適量的100 mg·L－1鉛標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液,用4%硝酸溶液稀釋至所需質(zhì)量濃度。鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液采用含0.5%鹽酸的2%硝酸溶液作為溶劑時,標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性不好,鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液采用4%硝酸溶液作為溶劑。

9種元素標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的組成見表2。

混合內(nèi)標(biāo)儲備溶液:含100 mg·L－1的In、Bi、Ge、Sc、Tb。

混合內(nèi)標(biāo)溶液:100 μg·L－1,移取適量的100 mg·L－1混合內(nèi)標(biāo)儲備溶液,用含0.5%鹽酸的2%硝酸溶液(測定鉛時用4%硝酸溶液)逐級稀釋。

硝酸為分析純,鹽酸為優(yōu)級純,試驗用水為超純水。

1.2 儀器工作條件

射頻功率1 550 W;等離子體氣流量15.0 L·min－1,載氣流量1.03 L·min－1;霧化室溫度2 ℃;蠕動泵轉(zhuǎn)速0.1 r·s－1;采樣深度8.0 mm;調(diào)諧模式:鎘、砷、汞、鈷、釩、鎳、鋇為氦氣模式,鉛、鋁為無氣體模式。

表2 9種元素標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的組成Tab.2 Composition of standard solution series of 9 elementsμg·L－1

1.3 試驗方法

測定鎘、砷、汞、鈷、釩、鎳、鋁、鋇的樣品溶液:稱取某藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的口服補液鹽散(Ⅲ)樣品約0.2 g,用含0.5%鹽酸的2%硝酸溶液溶解并稀釋至50.0 mL。

測定鉛的樣品溶液:稱取某藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的口服補液鹽散(Ⅲ)樣品約0.4 g,用4%硝酸溶液溶解并稀釋至50.0 mL。

在儀器工作條件下,在線加入內(nèi)標(biāo),混合內(nèi)標(biāo)溶液與樣品溶液分別經(jīng)由2條管道引入進樣系統(tǒng),經(jīng)三通混合后,進入儀器后進行測定。依次測定空白溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液,分析信號經(jīng)儀器轉(zhuǎn)化計算后,直接輸出測定結(jié)果。

2 結(jié)果與討論

2.1 同位素及內(nèi)標(biāo)的選擇

按豐度大、干擾小、靈敏度高的原則,選擇111Cd、208Pb、75As、202Hg、59Co、51V、60Ni、27Al 和137Ba作為待測元素的測定同位素。

測定過程中由于存在基體效應(yīng)、儀器信號漂移等問題,選用內(nèi)標(biāo)進行監(jiān)控,可以有效地減小基體、空間電荷帶來的干擾,大大提高測定的精密度[14]。按照質(zhì)量數(shù)相近的原則,選擇115In為鎘的內(nèi)標(biāo)、209Bi為鉛和汞的內(nèi)標(biāo)、72Ge為砷、鈷和鎳的內(nèi)標(biāo)、45Sc為釩和鋁的內(nèi)標(biāo)、159Tb 為鋇的內(nèi)標(biāo),質(zhì)量濃度均為100μg·L－1。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線、檢出限和測定下限

按儀器工作條件對9種元素標(biāo)準(zhǔn)溶液系列進行測定,以各元素的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),對應(yīng)的元素響應(yīng)值與內(nèi)標(biāo)元素響應(yīng)值的比值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,9種元素的線性范圍、線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)見表3。

根據(jù)響應(yīng)值標(biāo)準(zhǔn)偏差和標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率,計算各元素的檢出限和測定下限。空白溶液連續(xù)進樣11次,以3.3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差除以標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率計算方法的檢出限(3.3s/k),10倍標(biāo)準(zhǔn)偏差除以標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率計算方法的測定下限(10s/k),結(jié)果見表3。

表3 線性范圍、線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限和測定下限Tab.3 Linearity ranges,linear regression equations,correlation coefficients,detection limits and lower limits of determination

由表3可知:各元素的檢出限和測定下限均能滿足靈敏度的要求。

2.3 精密度

因測得樣品中鎘、砷、汞、鈷、釩、鎳、鋁、鋇含量極低,采用100%加標(biāo)樣品溶液進行分析;取樣品溶液直接測定鉛含量。結(jié)果表明:6 份樣品溶液中各元素測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于8.0%。

在不同時間,由不同人員按試驗方法對同一批口服補液鹽散(Ⅲ)樣品進行分析,精密度試驗結(jié)果見表4,其中鉛測定值的單位為μg·g－1,其余8種元素測定值的單位為μg·L－1。

表4 精密度試驗結(jié)果(n＝6)Tab.4 Results of test for precision(n＝6)

12份樣品溶液中鎘、鉛、砷、汞、鈷、釩、鎳、鋁和鋇的RSD(n＝12)分別為4.6%,12%,5.4%,4.6%,5.0%,0.90%,4.7%,3.6%,0.80%。各元素測定值的RSD 均小于15%,表明本方法中間精密度較好。

2.4 準(zhǔn)確度

按照各元素含量的50%,100%,150%對口服補液鹽散(Ⅲ)樣品進行加標(biāo),按試驗方法進行分析,平行測定3次,回收試驗結(jié)果見表5。

表5 回收試驗結(jié)果Tab.5 Results of test for recovery

由表5可知:回收率為85.6%～115%。本方法準(zhǔn)確度較好。

2.5 樣品分析

按試驗方法對3批口服補液鹽散(Ⅲ)樣品進行分析,砷、汞、鈷、釩、鎳、鋁均為未檢出,樣品分析結(jié)果見表6。

本工作建立的ICP-MS測定口服補液鹽散(Ⅲ)中9種金屬含量的方法靈敏度高、分析速率快,滿足藥物分析的要求。

表6 樣品分析結(jié)果Tab.6 Analytical results of the samples μg·g－1