陳緒林 趙 艷 韓駿飛

潰瘍性結(jié)腸炎(UC)是一種以腸黏膜受損為特點的慢性非特異性疾病，好發(fā)于直腸，嚴重時可累及全結(jié)腸[1-2]。UC臨床表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作的腹瀉、腹痛、黏液膿血便等[3]。UC病情易反復(fù)發(fā)作，可加重腸黏膜損傷，嚴重者甚至可引起腸梗阻或穿孔等腸道結(jié)構(gòu)性損傷[4-5]。了解UC患者疾病嚴重程度及預(yù)后情況，對于制定合理的治療方案，從而控制病情、改善預(yù)后具有重要意義。UC的發(fā)病機制尚未完全明確，多項研究表明腸內(nèi)免疫系統(tǒng)失衡后，腸道內(nèi)分泌的溶菌酶及黏液基因蛋白等物質(zhì)減少，增高腸道黏膜對炎性遞質(zhì)及細菌產(chǎn)物等的敏感度，導(dǎo)致腸道自發(fā)性炎性反應(yīng)，破壞腸黏膜屏障，促進UC的發(fā)生、發(fā)展[6-7]。CC趨化因子配體11(CCL11)是一種選擇性趨化因子，主要表達于胃腸道固有層，是胃腸道主要的嗜酸性粒細胞趨化劑，可激活嗜酸性粒細胞并誘導(dǎo)其在腸道積聚、浸潤，破壞腸道免疫平衡[8]，而腸道免疫失衡與UC的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切。Coburn等[9]應(yīng)用高通量篩選技術(shù)證實CCL11水平在UC中表達升高，但未探究CCL11與UC的病情及預(yù)后的關(guān)系。本研究選取105例UC患者為研究對象，初步分析CCL11與UC患者疾病嚴重程度及預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

前瞻性納入2016年11月至2018年11月在秭歸縣人民醫(yī)院接受治療的105例UC患者作為研究對象，設(shè)為UC組。納入標準：(1)符合《中國炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的共識意見》[10]中關(guān)于UC的診斷標準；(2)未接受免疫抑制劑及抗感染治療。排除標準：(1)合并嚴重心、肝、腎功能障礙；(2)合并全身感染性疾??；(3)入組前1個月未接受外科手術(shù)治療；(4)絕經(jīng)期婦女；(5)妊娠期及哺乳期婦女；(6)隨訪失聯(lián)者。另選取本院同期100例行單發(fā)結(jié)腸息肉切除術(shù)的患者作為對照組。UC組中男性74例，女性31例，年齡為20～42歲，平均年齡為(27.91±4.20)歲，體質(zhì)指數(shù)(BMI)為(21.87±3.29)kg/m2。對照組中男性58例，女性42例，年齡為22～38歲，平均年齡為(26.88±4.05)歲，BMI為(22.13±3.18)kg/m2。兩組在性別(χ2=3.477，P=0.062)、年齡(t=1.786，P=0.076)、BMI(t=0.575，P=0.566)方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。所有受試者均簽署知情同意書。本研究獲得本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(秭醫(yī)辦【2019】22號)。

1.2 方法

收集患者的年齡、性別、BMI、飲酒、腸切除術(shù)史、白細胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-15、C反應(yīng)蛋白(CRP)、吸煙、肛周病變、基底漿細胞增多、紅細胞沉降率、改良Mayo評分等資料。改良Mayo評分系統(tǒng)從排便次數(shù)、便血、內(nèi)鏡檢查及醫(yī)師總體評價4個方面進行評估，Mayo評分≤2分且無單項評分>1分為臨床緩解期(n=8)，3～5分為輕度活動期(n=36)，6～10分為中度活動期(n=30)，11～12分為重度活動期(n=31)[9]。

采集受試者空腹外周靜脈血5 mL，4 ℃下4 000 r/min離心15 min，分離上層清液，置于-20 ℃冰箱，待測。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清CCL11的水平，試劑盒購自挪威Lysaker公司。

1.3 隨訪

采用電話及復(fù)診的方式對患者進行為期1年的隨訪，了解患者的預(yù)后情況。隨訪起始時間為2016年11月23日，截止時間為2019年11月17日。本研究將復(fù)發(fā)、急性穿孔、大出血、黏膜異常增生定義為預(yù)后不良。復(fù)發(fā)指UC癥狀(便血、腹瀉等)再次發(fā)生，經(jīng)結(jié)腸鏡檢查證實。急性穿孔者可伴有惡心、嘔吐等臨床表現(xiàn)，查體時有全腹壓痛和反跳痛，腸鳴音消失，腹部X線檢查可發(fā)現(xiàn)膈下存在游離氣體。大出血患者可伴有嘔血或便血癥狀，通過內(nèi)鏡檢查確診。在胃鏡下對病變部位行活組織檢查，取標本進行病理學(xué)檢查，確診黏膜異常增生。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組受試者血清CCL11水平

結(jié)果顯示，UC組患者血清CCL11水平為(1.17±0.27)ng/mL，高于對照組[(0.49±0.14)ng/mL]，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=22.470，P<0.001)。

2.2 UC患者血清CCL11與疾病嚴重程度的相關(guān)性分析

UC緩解期、輕度活動期、中度活動期、重度活動期患者的CCL11水平分別為(0.51±0.15)ng/mL、(0.82±0.16)ng/mL、(1.23±0.23)ng/mL、(1.69±0.31)ng/mL，各組相比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=100.84，P<0.001)。緩解期CCL11水平低于輕度、中度、重度活動期(q=4.819、10.995、18.082，P<0.05)；輕度活動期CCL11水平低于中度活動期及重度活動期(q=10.078、21.576，P<0.05)；中度活動期CCL11水平低于重度活動期(q=10.914，P<0.05)。血清CCL11水平與Mayo評分呈正相關(guān)(r=0.658，P<0.001)。見圖1。

圖1 血清CCL11與Mayo評分的相關(guān)性散點圖

2.3 血清CCL11預(yù)測UC患者預(yù)后的價值分析

105例UC患者隨訪期間的預(yù)后不良發(fā)生率為42.86%(45/105)，其中復(fù)發(fā)36例(80.00%)、急性穿孔3例(6.67%)、大出血2例(4.44%)、黏膜異常增生4例(8.89%)。預(yù)后不良組CCL11水平為(1.28±0.31)ng/mL，高于預(yù)后良好組[(1.09±0.24)ng/mL]，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.541，P=0.001)。血清CCL11預(yù)測UC患者預(yù)后的ROC曲線下面積(AUC)、最佳截斷點、敏感度、特異度分別為0.816(95%CI: 0.719～0.885)、1.20 ng/mL、75.56%、80.00%。見圖2。

圖2 血清CCL11預(yù)測UC患者預(yù)后的ROC曲線

2.4 預(yù)后不良組及預(yù)后良好組的基本資料比較

預(yù)后不良組及預(yù)后良好組在年齡、性別、BMI、飲酒、腸切除術(shù)史、病變位置、IL-1β、IL-6、IL-15、CRP方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；預(yù)后不良組中吸煙、肛周病變、基底漿細胞增多的占比及紅細胞沉降率水平均高于預(yù)后良好組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.5 影響UC患者預(yù)后的因素

將吸煙(否=0，是=1)、肛周病變(無=0，有=1)、基底漿細胞增多(否=0，是=1)、紅細胞沉降率(<13.28 mm/h=0，≥13.28 mm/h=1)、CCL11(<1.20 ng/mL=0，≥1.20 ng/mL=1)作為自變量，α入=0.05，α出=0.10，將UC患者預(yù)后情況作為因變量納入Logistic回歸分析，結(jié)果顯示肛周病變、基底漿細胞增多、CCL11與UC患者預(yù)后密切相關(guān)。

表1 兩組的基本資料比較

表2 影響UC患者預(yù)后的多因素Logistic回歸分析

3 討論

機體在生理狀態(tài)下，腸道的弱炎性狀態(tài)是維持腸道生理屏障及保證腸道免疫平衡的重要因素[11]。腸道固有免疫失衡及過度炎性反應(yīng)是造成UC發(fā)生、發(fā)展的重要原因[12]。腸黏膜的免疫系統(tǒng)主要由樹突狀細胞、巨噬細胞、Treg細胞等組成，正常情況下腸黏膜呈低免疫應(yīng)答狀態(tài)[13]，受到外界刺激后，Th1、Th2及Th17等細胞在腸道大量合成、分泌，腸道低免疫應(yīng)答狀態(tài)被打破，導(dǎo)致炎性介質(zhì)如IL-1、腫瘤壞死因子及核因子-κB在腸道積聚，進而造成黏膜液化、片段化，通透性增高，腸黏膜屏障被破壞，誘發(fā)UC的發(fā)生[14]。CCL11屬于嗜酸性粒細胞趨化因子家族，主要由腸上皮細胞、巨噬細胞、嗜酸性粒細胞等炎性細胞分泌，可與趨化因子受體3相結(jié)合，誘發(fā)一系列的腸道炎性反應(yīng)[15]。此外，Th17細胞的分化可升高CCL11的表達水平[16]。由此推測，CCL11可能通過激發(fā)炎性反應(yīng)，破壞腸道免疫平衡，參與UC的疾病進展，其具體病理生理機制需進一步驗證。

本研究結(jié)果顯示，UC組患者血清CCL11水平高于對照組，表明CCL11可能與UC的發(fā)生有關(guān)。改良Mayo評分為評估UC疾病嚴重程度的指標，其分值越高表明患者病情越嚴重。本研究采用Pearson卡方檢驗分析CCL11與改良Mayo評分的相關(guān)性，結(jié)果顯示兩者呈正相關(guān)，表明CCL11可能參與了UC的疾病進展。UC病情易反復(fù)發(fā)作，可引起多種并發(fā)癥，導(dǎo)致患者的預(yù)后較差。本研究通過隨訪發(fā)現(xiàn)，約42.86%的UC患者預(yù)后不良，且預(yù)后不良組患者血清CCL11水平高于預(yù)后良好組，提示檢測血清CCL11可能有助于評估UC患者的預(yù)后情況。本研究進一步構(gòu)建了血清CCL11預(yù)測UC患者預(yù)后的ROC曲線，結(jié)果顯示CCL11預(yù)測UC患者預(yù)后的AUC為0.816，大于0.800，表明CCL11預(yù)測UC患者預(yù)后的效能較高。為明確CCL11與UC患者預(yù)后的關(guān)系，本研究采用多因素Logistic回歸方法分析影響UC患者預(yù)后的因素，結(jié)果顯示肛周病變、基底漿細胞增多、CCL11與UC患者預(yù)后密切相關(guān)，與既往研究結(jié)果相符[17]。雖然目前對于影響UC患者預(yù)后的因素仍無統(tǒng)一見解，但對UC患者進行更加密切的隨訪，及時調(diào)整治療方案，可能有效改善患者的預(yù)后。

綜上所述，血清CCL11與UC疾病嚴重程度及預(yù)后有關(guān)，檢測血清CCL11水平有助于評估患者預(yù)后情況。本研究下一步將動態(tài)監(jiān)測UC患者血清CCL11水平，并進行基礎(chǔ)研究，分析CCL11影響UC患者預(yù)后的病理生理機制。