楊曉菲 ，段永華 ，吳興龍 ，彭進(jìn)喬 ，董蓉嬌 ，董文漢 ，梁 泉 *

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院，云南昆明 650201；2.云南省玉溪市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，云南玉溪 653199；3.云南玉溪市江川區(qū)齊興花卉種植基地，云南玉溪 652600；4.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)科技處，云南昆明 650201）

大花蕙蘭（Cymbidium hybridum）是人工培育的蘭科蘭屬種間優(yōu)良品種群，其花期較長(zhǎng)、花色艷、花朵大，是重要的蘭花商品盆花和鮮切花之一，具有很高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值[1-6]。蘭科植物的育種方法有很多，雜交育種是蘭花育種的重要方法，種內(nèi)或種間等遠(yuǎn)緣雜交都可以獲得優(yōu)良的雜交后代[7-8]，許多蘭屬植物的原生種被用于培育商品化的大花蕙蘭新品種。徐曉薇等[9]以寒蘭與春蘭雜交、寒蘭與墨蘭雜交比較容易成功，坐果率達(dá)100%。姚婧等[10]在冬鳳蘭與“黃金小神童”大花蕙蘭雜交后代群體獲得一些優(yōu)良品系。韓菊蘭等[11]應(yīng)用雜交育種方法培育大花蕙蘭新品種。該研究以“財(cái)神”、“楊貴妃”、“民謠”、“世界和平”、“紅梅”、“紅霞”等6 個(gè)品種為基本材料，采用雜交育種方法，并結(jié)合組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖種苗，在雜交后代中選擇花朵大、花瓣厚、花色艷、持花期長(zhǎng)等優(yōu)良品系。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 親本材料。親本材料有6 個(gè)，分別是民謠、世界和平、財(cái)神、楊貴妃、紅梅和紅霞（表1）。

1.1.2 親本特征。①民謠：株型偏小，株高70 cm，株型披散，地生，葉長(zhǎng)60 cm，寬3 cm，花葶直立，花朵小，唇瓣尖唇型，綠色花，有香，花葶直立，58 cm，每花葶著生18 朵花，花瓣尖，花期早。②世界和平：株型高大挺拔，株高90 cm，株型披散，地生，葉長(zhǎng)80 cm，寬3.5 cm，花梗直立，花大色艷，有香，綠色，唇瓣尖唇型，花期11 月，花葶直立，每花葶著生70 朵花，但花朵開放后期花瓣反卷過(guò)度，花瓣邊緣背部上色過(guò)度，栽培過(guò)程中死苗率較高。③財(cái)神：株型披散，葉片下垂，花色艷，花朵中型，瓣薄，味香，抽梗率高，花期略早，褪色快，花梗不夠高。④楊貴妃：株型高大，葉形下垂，花大色艷，有香味，抽梗率低。⑤紅梅：株型披散，花色艷，黃色，花朵中型，花期略早，唇瓣圓唇形、一抹紅色，花邊緣黃色，但葉片柔軟，花瓣不大，花梗不夠高。⑥紅霞：株型高大，株型披散，地生，葉形挺拔，花葶直立，花大色艷，紅色花，無(wú)香，花梗不齊，栽培過(guò)程中死亡率高。

表1 大花蕙蘭雜交后代及親本組合

1.2 方法

1.2.1 育種方法。首先收集品種資源觀察，進(jìn)行人工授粉，獲得F1代蒴果，經(jīng)組培快繁，獲得種苗，種植于基地至開花，從開花植株中選株自交得F2代蒴果，重復(fù)進(jìn)行蒴果組培育苗—種植—開花自交，至F4代，與雙親為對(duì)照進(jìn)行單株決選，最后獲得株型好、花色艷、性狀穩(wěn)定雜交后代。

1.2.2 育種進(jìn)程。2002—2004 年收集品種資源觀察，2005年分別以“紅梅/紅霞”、“民謠/世界和平”、“財(cái)神/楊貴妃”為組合進(jìn)行人工授粉，獲得 F1代雜交蒴果；2006 年雜交種子經(jīng)組培快繁，獲得F1代種苗，種植至2008 年開花，從開花植株中選株自交得F2代蒴果；然后重復(fù)蒴果組培育苗—種植—開花自交—選株自交過(guò)程，至 2014—2015 年進(jìn)代至F5代，與雙親為對(duì)照進(jìn)行單株決選；2018年獲得穩(wěn)定雜交后代，分別命名為“紫云”、“碧云春”和“黃金甲”。

1.2.3 雜交后代的表型分析方法。在每個(gè)品種的盛花期，對(duì)大花蕙蘭株高、株型、葉長(zhǎng)、葉寬、著生花數(shù)、花色和唇瓣形狀顏色等性狀進(jìn)行觀察、測(cè)量和記錄，并進(jìn)行親本與雜交種的比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 “黃金甲”與親本性狀比較

（1）花瓣、萼片顏色不同：“黃金甲”的花瓣、萼片顏色為蛋黃色；母本“財(cái)神”的為鴨黃色，顏色較淺；父本“楊貴妃”的則為杏黃色，顏色較深，雜交種的顏色介于兩者之間，如表2 所示。

（2）唇瓣顏色不同：“黃金甲”唇瓣呈紅唇形，邊緣約2.4 mm 杏黃色鑲邊，鮮紅色斑塊呈扇狀分布，其上有少量鮮紅斑點(diǎn)散布，顏色顯得更清晰與干凈；母本“財(cái)神”呈紅V 型，邊緣約5.0 mm 杏黃色鑲邊，暗紅色斑點(diǎn)連成片；父本“楊貴妃”呈紅V 型，邊緣約5.1 mm 杏黃色鑲邊，有暗紅色斑塊連成呈小扇狀分布，還有較多暗紅斑點(diǎn)散布，如圖1 所示。

表2 “黃金甲”與親本性狀比較

（3）蕊柱顏色不同：“黃金甲”乳白色底紋上散布紅色小斑點(diǎn)；母本“財(cái)神”蕊柱基部黃色底紋上散布紅色小斑點(diǎn)；父本“楊貴妃”杏黃色底紋上散布紅色小斑點(diǎn)，如圖2所示。

（4）花部性狀差異：“黃金甲”花萼、花瓣較長(zhǎng)，花直徑收縮（直徑33.42 mm），唇瓣較長(zhǎng)（38.25 mm），花柄長(zhǎng)而細(xì)（長(zhǎng)45.24 mm，直徑4.45 mm）；而雙親“財(cái)神”和“楊貴妃”花萼、花瓣較短，花直徑較大（分別為55.26 mm、52.32 mm）、唇瓣較短（分別為34.34 mm 和34.16 mm），花柄較短而粗（分別為36.77 mm、36.12 mm）。

（5）植株比較：“黃金甲”株型緊湊，著生朵花增多，花瓣圓，花色凈，花邊緣黃色，抽梗率高，適合造型；母本“財(cái)神”株型披散，葉片下垂，花朵中型，抽梗率高，花期略早，褪色快，花梗不夠高；父本“楊貴妃”株型高大，葉形下垂，花大色艷，抽梗率低，如圖3 所示。

2.2 “碧云春”與親本性狀比較

（1）唇瓣顏色差異：“碧云春”唇瓣為深紅色、紅唇形，唇瓣邊緣有寬約5 mm 的杏黃色鑲邊，中后部和中心均為白色，褶片白色；母本“民謠”唇瓣白色、大斑點(diǎn)型，其上分布蛋黃色的斑點(diǎn)和斑塊，褶片黃色，如圖4 所示。

（2）蕊柱顏色差異：“碧云春”蕊柱外側(cè)粉紅色，基部黃色，內(nèi)側(cè)靠基部有清晰的圓形紅色斑點(diǎn)；母本“民謠”蕊柱外側(cè)、內(nèi)側(cè)均為淡黃綠色，內(nèi)側(cè)靠基部有邊緣模糊的土黃色斑點(diǎn)。

（3）花部性狀差異：“碧云春”花萼、花瓣、花直徑、唇瓣等性狀均介于母本“民謠”和父本“世界和平”之間，花萼長(zhǎng)48.52 mm、寬 28.83 mm，花瓣長(zhǎng) 51.50 mm、寬 26.75 mm，唇瓣長(zhǎng)36.71 mm、厚2.12 mm，花直徑64.54 mm；對(duì)照母本“民謠”花萼長(zhǎng)44.70 mm、寬22.67 mm，花瓣長(zhǎng)44.05 mm、寬17.04 mm，唇瓣長(zhǎng)22.12 mm、寬24.04 mm，花直徑54.91 mm，如表 3 所示。

（4）植株比較：“碧云春”株型緊湊，著生花朵增多，花大色艷，花瓣反卷不明顯；母本“民謠”株型偏小，花朵量多而小，花瓣尖，花期早；父本“世界和平”高大挺拔，花大色艷，但花朵開放后期花瓣反卷過(guò)度，花瓣邊緣背部上色過(guò)度，栽培過(guò)程中死苗率較高，如圖5 所示。

表3 “碧云春”與親本性狀比較

2.3 “紫云”與親本性狀比較

（1）花瓣、萼片顏色不同：雜交種“紫云”花瓣、萼片均為深紅色，而母本“紅梅”和父本“紅霞”則均為桃紅色，如表4 所示。

（2）唇瓣顏色不同：雜交種“紫云”的唇瓣為深紅色，而母本“紅梅”唇瓣帶紅色斑點(diǎn)，父本“紅霞”唇瓣則帶紅色條紋。

（3）花部性狀差異：“紫云”花萼、花瓣、唇瓣、花直徑、花柄長(zhǎng)均介于父母本之間，但唇瓣更厚（4.14 mm）；而母本“紅梅”萼片長(zhǎng)（61.62 mm）、花瓣長(zhǎng)度較短（59.03 mm）、唇瓣最?。?.12 mm）、花直徑最?。?1.04 mm）；父本“紅霞”花萼（66.31 mm）、花瓣（64.53 mm）、花柄（56.46 mm）最長(zhǎng)，唇瓣較短，花直徑較大（57.50 mm），如圖6 所示。

（4）植株的比較：“紫云”株型適中，著生朵花較多，抽梗率高；母本“紅梅”株型披散，花朵中型，花期略早，在11月，花邊緣黃色，但葉片柔軟，花瓣不大，花梗不夠高；父本“紅霞”株型高大、披散，花葶直立，花大色艷、紅色花，無(wú)香，花梗不齊，栽培過(guò)程中死亡率高，如圖7 所示。

表4 “紫云”與親本性狀比較

2.4 栽培技術(shù)要點(diǎn)

選擇適宜松散、通風(fēng)和易排水的土壤基質(zhì)，使用松針和山基土混合，或者腐殖質(zhì)土壤混合的泥炭土，或者蕨根、泥炭、苔蘚、樹皮、木炭塊、碎磚塊等作栽培基質(zhì)。深盆栽培，最好是紫砂盆。春天、秋天和冬天都可以享受全日的光照。夏天需要覆蓋60%的遮陽(yáng)，同時(shí)做好通風(fēng)。根據(jù)土壤基質(zhì)的干濕度調(diào)節(jié)澆水，夏季需向葉面噴水，以降溫和提高濕度。開花期間應(yīng)減少澆水。2—3 月再施以磷為主的薄肥1～2 次。在生長(zhǎng)旺盛期，應(yīng)每10 d 左右追1 次稀薄肥水；在幼苗期和低溫季節(jié)，應(yīng)少施或不施有機(jī)肥，可用比例為7∶6∶19 的氮磷鉀復(fù)合肥進(jìn)行葉面噴肥。春夏季每5～7 d 施肥 1 次，秋季每 10～15 d 施肥 1 次，冬季可停止施肥。春夏季生長(zhǎng)期，以氮、磷、鉀相等的標(biāo)準(zhǔn)肥料稀釋1 000倍液追施；秋季應(yīng)多用鉀肥，可用800～1 000 倍的磷酸二氫鉀葉面噴施。注意防治葉枯病、炭疽病、軟腐病、葉斑病。

3 討論

蘭科植物的主要育種方法，一直以來(lái)都還是采用常規(guī)的雜交育種方式，劉玉珊[12]利用多個(gè)大花蕙蘭品種作為親本進(jìn)行雜交，發(fā)現(xiàn)以大花蕙蘭“紅顏”作為親本時(shí)可以使雜交后代的株型更加挺拔，以“馬州利卡”作為親本時(shí)可以使雜交后代的花朵數(shù)增加。曾瑞珍[13]等利用墨蘭“企劍白墨”為母本，大花蕙蘭“金作家”為父本雜交育成新品種“玉女蘭”，其株形優(yōu)美，平均著花10 朵，花黃綠色，有香氣，花期1～2 個(gè)月。也有利用引種馴化[14]、誘變、生物技術(shù)等方式獲得新品種。誘變育種主要是運(yùn)用物理或化學(xué)方法，對(duì)植株進(jìn)行處理，使其產(chǎn)生突變，從而選擇性狀較好的新品種，張永柏等[15]采用60Co 射線輻射源對(duì)蝴蝶蘭花粉進(jìn)行輻射誘變?cè)囼?yàn)，研究了蝴蝶蘭花粉對(duì)不同輻射劑量的反應(yīng)，最終得到了一個(gè)優(yōu)良變異株系。利用基因工程育種的研究也有一些報(bào)道[16-17]。大花蕙蘭種子多但細(xì)小，自然條件下很難萌發(fā)，利用無(wú)菌播種[18-20]等技術(shù)，簡(jiǎn)化了育苗技術(shù)，為大花蕙蘭的雜交育種提供了技術(shù)支持。在大花蕙蘭雜交育種中，挑選合適的親本，可以豐富其遺傳多樣性，雜交后代都繼承了親本的優(yōu)勢(shì)，在新品種選育中具有實(shí)際指導(dǎo)意義。研究共挑選了6 個(gè)親本進(jìn)行雜交育種，選育出3 個(gè)性狀優(yōu)良的新品種，同時(shí)在選育過(guò)程中也采用了無(wú)菌播種的方法進(jìn)行育苗，效果較好。

4 結(jié)論

通過(guò)雜交選育的“黃金甲”、“碧云春”和“紫云”等3個(gè)新品種在株型、長(zhǎng)勢(shì)、花色、唇瓣形狀、唇瓣花紋等與其對(duì)應(yīng)的親本都表現(xiàn)出了顯著的差異，雙親優(yōu)良基因通過(guò)人工雜交得到有效遺傳，而且基因重組后還表現(xiàn)出超越雙親的優(yōu)良性狀。這3 個(gè)品種都有較高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，市場(chǎng)開發(fā)前景廣闊。