呂軍 丁茂昌

[摘 要] 在同等生物量下，蛋白核小球藻培養(yǎng)的褶皺臂尾輪蟲最先抱卵，平均帶卵量最高，輪蟲增長量也最多，其次是單體角毛藻、多體角毛藻。試驗前后小球藻密度減少1/2，單體角毛藻密度幾乎不變，多體角毛藻密度略有增長，說明小球藻培養(yǎng)輪蟲效果最理想，其次是單體角毛藻、群體角毛藻。

[關(guān)鍵詞] 輪蟲;小球藻;角毛藻;繁殖速率

[中圖分類號] S963 [文獻標識碼] B [文章編號] 1674-7909（2020）26-103-3

輪蟲（Rotifera）是輪形動物門的一群小型多細胞動物，一般體長0.1～0.5 mm，最長不超過1.0 mm，輪蟲生活時纖毛帶和纖毛環(huán)上的纖毛不斷協(xié)調(diào)旋轉(zhuǎn)擺動，似轉(zhuǎn)動著的輪子，故名為輪蟲[1]。輪蟲對水質(zhì)的適應(yīng)性較強，廣泛分布于江河湖海、溝渠塘堰等各類水體中[2]。輪蟲因營養(yǎng)價值高、繁殖速率快、幾乎能被所有魚類的幼體吞食而成為大多數(shù)經(jīng)濟水生動物幼體的優(yōu)質(zhì)餌料。山東省日照市水產(chǎn)研究所開展的試驗表明，利用混合植物（藻類）、混合動物、動植物混合、鹵蟲幼體和輪蟲5種餌料飼養(yǎng)對蝦幼體時，輪蟲飼養(yǎng)效果最佳[3]。

從20世紀二三十年代開始，日本等國就開始進行輪蟲工廠化培養(yǎng)技術(shù)研究，近年來該技術(shù)日趨成熟，輪蟲產(chǎn)量逐漸提高，室內(nèi)水泥池培養(yǎng)密度在1 000個/mL以上。我國從20世紀50年代開始引進日本工廠化輪蟲培養(yǎng)技術(shù)，但由于其投資大、費用高，在我國廣泛推廣尚存在困難。20世紀80年代，李永函等利用水體沉積物中輪蟲休眠卵，采取人工措施促其萌發(fā)，繁衍成種群，為淡水魚苗培養(yǎng)開辟了一個新的餌料途徑[4]。但輪蟲培養(yǎng)的高峰期持續(xù)較短，產(chǎn)量較低，而且餌料停留在池中發(fā)生什么藻就用什么藻、發(fā)生多少就喂多少的雜藻培養(yǎng)狀態(tài)，輪蟲培養(yǎng)數(shù)量隨意性較大、質(zhì)量不可控。同時，何種藻類能使輪蟲數(shù)量與質(zhì)量都保持在一個較高的水平，不得而知。為了尋找輪蟲最適餌料，更好地服務(wù)于公司生態(tài)苗的培養(yǎng)，筆者就地取材，選用小球藻、單體角毛藻、群體角毛藻3種個體差異明顯的藻類作為輪蟲培養(yǎng)餌料，為公司生態(tài)苗輪蟲專池培養(yǎng)提供理論參考。

1 試驗材料

1.1 試驗地點和輪蟲來源

2019年5月，在河南省固始縣海昌蝦苗標粗場開展輪蟲培育試驗。褶皺臂尾輪蟲（Brachionus plicatilis），由海南海昌對蝦繁育有限公司提供的褶皺臂尾輪蟲冬卵孵化所得。

1.2 餌料藻類

蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidesa）、單體角毛藻、群體角毛藻，均由海昌蝦苗場提供。

1.3 主要器材

顯微鏡（奧林巴斯CX21），實驗室pH計（PHS-25型），實驗室用鹽度計，48 μm生物網(wǎng)、25 μm生物網(wǎng)、鐵架臺、堿性滴定管、血球計數(shù)板、10 mL移液管、120 mL溶氧瓶和青霉素瓶等。

2 試驗條件與方法

2.1 輪蟲冬卵孵化

取一勺輪蟲冬卵放入鹽度24‰的海水中，充分攪勻后置于室溫孵化72 h。

2.2 餌料藻類采樣

將采樣所需器皿經(jīng)碘液消毒后進行采樣，具體操作見表1。

2.3 餌料藻類密度調(diào)配與理性指標測定

運用顯微鏡目微尺量出餌料藻類長度，根據(jù)生物量近似相等，兼顧鹽度、pH值相近的原則，計算出試驗用餌料藻類密度，參照所采餌料藻類密度，稀釋或濃縮餌料藻類，用血球計數(shù)法[5]測定餌料藻類試驗密度，并測定基本理性指標，包括pH值、鹽度、DO值（見表2）。

2.4 移取藻液與添加輪蟲

取15個青霉素瓶，用移液管移取5 mL藻液至瓶中，之后在顯微鏡下挑選5個無明顯差異的輪蟲，用細口吸管移入相應(yīng)青霉素瓶中，并做好標記（見表3），每種餌料藻液做5個平行組。

2.5 結(jié)果觀察與數(shù)據(jù)記錄

每間隔24 h取一個平行組用魯氏試液固定，在顯微鏡下計數(shù)輪蟲數(shù)量、最大帶卵量和平均帶卵量，試驗結(jié)束后測定最后一個平行組中各餌料藻類密度。

3 結(jié)果與分析

3.1 輪蟲增長量

試驗48 h時各組輪蟲量均未見增長，72 h時小球藻組輪蟲量開始急劇增長，直至96 h時輪蟲已經(jīng)從試驗開始時的5個增加至26個;單體角毛藻組在72 h時輪蟲量開始有所增長，至96 h時輪蟲量已有10個，增長速率明顯低于小球藻組;而群體角毛藻組在整個試驗區(qū)間輪蟲量未見增長（見圖1）。

3.2 輪蟲帶卵情況

3.2.1 最大帶卵量。比較試驗區(qū)間各餌料藻類中輪蟲的帶卵情況，可發(fā)現(xiàn)試驗開始后48 h內(nèi)各餌料藻類組輪蟲均未抱卵，48 h時鏡檢發(fā)現(xiàn)小球藻組和單體角毛藻組輪蟲開始抱卵，且小球藻組輪蟲抱卵量明顯高于單體角毛藻組;而群體角毛藻組72 h時輪蟲才開始抱卵，抱卵時間晚于小球藻組和單體角毛藻組，而且整個試驗區(qū)間其最大帶卵量僅為1個，明顯低于其他兩組（見圖2）。

3.2.2 平均帶卵量。對比整個試驗區(qū)間，可發(fā)現(xiàn)小球藻組輪蟲的平均帶卵量明顯高于其他兩組，其平均帶卵量最高時達到平均一個輪蟲帶2個卵，最低時平均一個輪蟲帶0.47個卵，而其他兩組整個試驗區(qū)間平均一個輪蟲帶卵量均小于0.47（見圖3）。

3.3 藻密度對比

觀察試驗前后餌料藻類密度變化情況可發(fā)現(xiàn)，小球藻組試驗后藻密度為170萬個/mL，僅為試驗前藻密度的1/3;單體角毛藻密度試驗后為150萬個/mL，與試驗前實驗密度154萬個/mL差異不大;群體角毛藻試驗前密度58萬個/mL，試驗后密度71萬個/mL，密度略有上漲（見表4）。

4 討論

試驗結(jié)果表明，小球藻組輪蟲增長量明顯高于單體角毛藻組和群體角毛藻組，同時小球藻組輪蟲帶卵情況也明顯優(yōu)于其他兩組，并且對比試驗前后餌料藻類密度發(fā)現(xiàn)，僅有小球藻密度急劇減少，說明在這3種餌料中輪蟲最喜食小球藻。同時，由于單體角毛藻組輪蟲數(shù)量有所增長，而群體角毛藻輪蟲量幾乎無變化，可得出小球藻是輪蟲培養(yǎng)最理想的餌料，其次是單體角毛藻、群體角毛藻，與Caric等的浮游植物的單體培養(yǎng)物是褶皺臂尾輪蟲最適餌料[6]這一研究結(jié)果基本吻合。分析其原因，筆者認為主要是在于以下4個方面。

一是營養(yǎng)價值高。小球藻細胞含有豐富的蛋白質(zhì)（約占為細胞干質(zhì)量的50%）[1]，蛋白質(zhì)中含有的8種必需氨基酸可達23.35%，接近優(yōu)質(zhì)魚粉、啤酒酵母，高于絕大多數(shù)植物性蛋白，是優(yōu)良的單細胞蛋白源[7]。此外，小球藻碳水化合物含量為5.7%～38.0%，一般不少于20.0%[8]。同時，小球藻細胞中脂類含量4.5%～86.0%，不飽和脂肪酸含量明顯高于許多植物[9]，且含有二十二碳六烯酸（DHA）。

二是適口性好。輪蟲一般體長0.1～0.5 mm，最大不超過1.0 mm，濾食最適直徑10 μm左右[1]。本試驗中所用小球藻直徑經(jīng)測量為2.86 μm，符合輪蟲最適濾食范圍，適口性較好。而單體角毛藻細胞直徑雖為4.60 μm，但其含角毛直徑15～30 μm不等，明顯超過輪蟲最適濾食范圍，適口性不好。單體角毛藻組輪蟲量仍有所增加，筆者推測是由于單體角毛藻在分裂時部分角毛脫落或未長出而被輪蟲濾食，而群體角毛藻組個別輪蟲帶卵則是輪蟲濾食脫落單體角毛藻的緣故。

三是可獲得性大。輪蟲一般在水層中分布比較均勻[3]，活動比較緩慢，運動速度小于0.02 cm/s。而小球藻無鞭毛，不會運動，水中均勻分布[10]，因而小球藻相對于其他同等大小的鞭毛藻類更易被輪蟲濾食。

四是水質(zhì)環(huán)境改良。小球藻葉綠素含量4%～6%，是自然界中葉綠素含量最高的植物，高于已商業(yè)化的脫水紫苜蒿葉綠素含量（0.2%）[11]。小球藻能通過光合作用提取細菌分解有機物產(chǎn)生的CO2，釋放部分O2，有利于細菌對有機物的進一步分解，有改良水環(huán)境的作用[12]。同時，在大型水體中，小球藻能通同顫藻屬、席藻屬、柵藻屬等藻類以某些菌類在自然水體組成生物薄膜，可以吸附水體中有機物并可以直接利用有機物作為碳源和氮源，分解一部分有機物[13]。

參考文獻

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