汪善鋒,史 俊,楊劍波
(江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院,江蘇 句容 212400)
α-硫辛酸作為一種非常強(qiáng)的抗氧化劑,近年來在醫(yī)藥保健領(lǐng)域受到廣泛關(guān)注。我們之前的研究發(fā)現(xiàn),日糧中添加硫辛酸能改善育肥豬胴體性狀和肉質(zhì)[1],對(duì)育肥豬氧化應(yīng)激下的血清抗氧化酶活力降低和自由基含量升高有較好的干預(yù)作用。α-硫辛酸可增加年老大鼠IgM、IgA、IgG的含量[2],從而增強(qiáng)其機(jī)體免疫力。α-硫辛酸可顯著減弱小鼠慢性氧化應(yīng)激造成的免疫力下降[3]。但硫辛酸對(duì)豬的免疫功能影響的研究鮮有報(bào)道。本試驗(yàn)在育肥豬飼料中添加硫辛酸,研究其對(duì)育肥豬免疫功能的影響,為硫辛酸在育肥豬飼糧中的應(yīng)用及相關(guān)研究提供參考。
α-硫辛酸(LA),純度為99%以上,江蘇同禾藥業(yè)有限公司。
基礎(chǔ)日糧參考NRC(1998)豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和我國(guó)豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(2004)進(jìn)行配制,基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。
表1 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
采用單因子完全隨機(jī)化試驗(yàn)設(shè)計(jì),選擇96頭體況良好體重(79.55±4.62)kg的杜×長(zhǎng)×大三元雜交豬,隨機(jī)分為4個(gè)處理組(0、300、600、900 mg/kg α-硫辛酸),每組4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)6頭,預(yù)試期7 d,試驗(yàn)期28 d。
試驗(yàn)豬飼養(yǎng)在設(shè)備相同的同棟圈舍中,每個(gè)重復(fù)的豬飼養(yǎng)于同一欄內(nèi),自由采食和飲水,試驗(yàn)期間每日定時(shí)清掃豬舍,記錄每欄飼料消耗等。
試驗(yàn)結(jié)束時(shí)從每個(gè)重復(fù)中各隨機(jī)選取2頭,前腔靜脈采血10 ml,靜置冰盒中30 min后,在轉(zhuǎn)速4 000 r/min條件下離心10 min,制備血清,于-20℃冰箱中保存?zhèn)錅y(cè)。
放射免疫法測(cè)定IL-2、IL-6和TNF-α濃度,免疫比濁法測(cè)定免疫球蛋白A (IgA)、免疫球蛋白M ( IgM)、免疫球蛋白G(IgG)含量,測(cè)定試劑盒均由美國(guó)R&D公司提供,具體測(cè)定方法嚴(yán)格按試劑盒操作說明進(jìn)行。
數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS16.0軟件單因素方差分析方法(ANOVA)進(jìn)行,均值采用Duncan法進(jìn)行多重比較,P<0.05為差異顯著,P<0.01為差異極顯著,結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。
育肥豬日糧中添加α-硫辛酸對(duì)血清中IgA、IgM和IgG含量的影響見表2。
表2 α-硫辛酸對(duì)育肥豬血清中免疫球蛋白含量的影響
由表2可知,日糧中添加硫辛酸對(duì)血清中IgA和IgM無顯著影響(P>0.05)。硫辛酸添加組育肥豬血清中IgG均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),而硫辛酸添加組之間差異均不顯著(P>0.05)。
IgG在人和動(dòng)物血清免疫球蛋白中含量最高,占血清免疫球蛋白總量75%~80%,在體內(nèi)發(fā)揮抗菌、抗病毒、抗毒素、抗腫瘤等免疫學(xué)活性[4]。本試驗(yàn)中,α-硫辛酸添加組血清IgG含量顯著提高,表明α-硫辛酸增強(qiáng)了機(jī)體的免疫力。
α-硫辛酸對(duì)育肥豬血清中IL-2、IL-6和TNF-α含量的影響見表3。
表3 α-硫辛酸對(duì)育肥豬血清中炎性細(xì)胞因子含量的影響
由表3可知,α-硫辛酸添加組育肥豬血清中IL-2含量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),而硫辛酸添加組之間差異均不顯著(P>0.05)。血清中IL-6和TNF-α隨著α-硫辛酸添加水平增加而降低,其中600和900 mg/kg α-硫辛酸添加組的IL-6和TNF-α濃度與對(duì)照組相比下降顯著,900 mg/kg組的IL-6濃度與300 mg/kg組差異達(dá)到顯著水平。
IL-2是動(dòng)物體內(nèi)重要的廣譜免疫增強(qiáng)因子,能增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞的活性,誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生干擾素[5]。IL-6是一種重要的促炎因子,其可反映機(jī)體損傷的程度[6]。TNF-α是啟動(dòng)抗菌炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵細(xì)胞因子[7]。本試驗(yàn)中添加硫辛酸顯著升高育肥豬血清IL-2的濃度(P< 0.05),顯著降低IL-6和TNF-α濃度(P<0.05),表明硫辛酸可通過影響炎癥因子的表達(dá)進(jìn)而提高動(dòng)物的免疫功能。
本試驗(yàn)初步探討了α-硫辛酸對(duì)育肥豬免疫功能的影響,結(jié)果表明,日糧中添加α-硫辛酸,可顯著提高育肥豬血清中IgG和IL-2含量,降低IL-6和TNF-α濃度,提示硫辛酸可以調(diào)節(jié)免疫球蛋白和細(xì)胞因子水平,提高育肥豬體液免疫水平,進(jìn)而改善其免疫功能。α-硫辛酸在育肥豬日糧中的適宜添加量為600~900 mg/kg。