鐘家寶，張曉雪，鄧國平

上海健康醫(yī)學(xué)院附屬浦東新區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科1、呼吸內(nèi)科2，上海 201299

特發(fā)性肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)屬于臨床上較為常見的一種以肺功能漸進(jìn)性惡化為特征的慢性肺纖維化疾病，患者一經(jīng)確診，中位生存期往往不足5年[1]。由此可見，早期有效發(fā)現(xiàn)并診斷IPF是改善患者預(yù)后，延長(zhǎng)生命的關(guān)鍵。迄今為止，關(guān)于IPF 的具體病因以及發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，目前的研究認(rèn)為γ-干擾素以及白細(xì)胞介素-8 等多種免疫細(xì)胞因子導(dǎo)致的肺泡上皮損害和組織異常修復(fù)、重構(gòu)，可能在IPF的發(fā)生、發(fā)展過程中起著至關(guān)重要的作用。隨著近年來關(guān)于IPF 的研究日益深入，一系列相關(guān)生物標(biāo)志物開始進(jìn)入人們的視線，且逐漸成為基礎(chǔ)以及臨床研究的重點(diǎn)。研究者迫切希望發(fā)現(xiàn)一種或多種安全、可靠的IPF生物標(biāo)志物，從而有利于篩查高危人群，并為相關(guān)治療藥物的研發(fā)提供參考依據(jù)。趨化因子2(chemokine 2，CCL2)亦可稱為單核細(xì)胞趨化蛋白-1 (monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)，在單核細(xì)胞趨化過程中發(fā)揮著重要作用，屬于炎癥因子之一，可介導(dǎo)免疫反應(yīng)[2]。趨化因子13(chemokine 13，CXCL13)主要由基質(zhì)細(xì)胞合成、分泌，其在機(jī)體發(fā)生炎癥反應(yīng)時(shí)，影響B(tài)細(xì)胞朝炎癥病灶的歸巢過程[3]。Clara細(xì)胞分泌蛋白16(Clara cell secretory protein 16，CC16)主要由Clara細(xì)胞分泌，目前已被證實(shí)具有內(nèi)源性免疫以及炎癥調(diào)控等作用，在多種肺部疾病中均存在異常表達(dá)[4]。因此，筆者推測(cè) CCL2、CXCL13 及 CC16 可能在IPF 發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用，有望成為IPF 診治的新靶點(diǎn)。鑒于此，本文通過研究血清CCL2、CXCL13 及 CC16 與 IPF 患者肺功能的關(guān)系及其診斷價(jià)值，旨在為臨床診治IPF提供新的思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取浦東新區(qū)人民醫(yī)院2017 年4 月至 2019 年 12 月收治的 60 例 IPF 患者納入 IPF 組，其中男性34例，女性26例；年齡31～77歲，平均(59.32±4.12)歲；受教育時(shí)間6～16 年，平均(9.83±2.49)年。另取同期健康志愿者60例作為對(duì)照組，其中男性35例，女性25例；年齡32～79歲，平均(58.39±4.15)歲；受教育時(shí)間6～15年，平均(9.10±2.51)年。兩組受檢者的一般資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)所有IPF患者均符合2011年《特發(fā)性肺纖維化診治國家詢證指南》所制定的IPF相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；(2)病程均已超過90 d；(3)入院前未接受相關(guān)治療；(4)均為成年人。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)意識(shí)障礙或伴有精神疾病者；(2)依從性較差，無法完成相關(guān)調(diào)查者；(3)研究過程中因各種原因退出者。本研究獲醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者均在知情同意書上簽字。

1.2 觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法 (1)主要觀察指標(biāo)：血清CCL2、CXCL13及CC16水平。檢測(cè)方式：所有受試者入院后均進(jìn)行禁食處理，于翌日清晨狀態(tài)下抽取靜脈血5 mL，按照3 000 r/min，離心半徑為6 cm 的條件離心10 min，獲取血清開展酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)，相關(guān)操作遵循試劑盒說明書完成，相關(guān)試劑盒均購自上海生工生物工程股份有限公司。(2)次要觀察指標(biāo)：肺功能包括肺活量(vital capacity，VC)以及肺彌散量(diffusion capacity of lung，DLco)，通過 Sensormedics 6200型體描儀完成，相關(guān)操作遵從儀器說明書完成。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS22.0 軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料呈正態(tài)分布，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，各項(xiàng)指標(biāo)指標(biāo)間的相關(guān)性采用Pearson 相關(guān)性分析。采用受試者工作特征曲線(ROC)分析血清CCL2、CXCL13及 CC16 診斷 IPF 的價(jià)值，以 P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受檢者的血清CCL2、CXCL13 及CC16水平比較 60 例IPF 患者無一例退出研究。IPF 組患者的血清CCL2、CXCL13 水平明顯高于對(duì)照組，而CC16水平明顯低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見表1。

表1 兩組受檢者的血清CCL2、CXCL13及CC16水平比較(±s)

表1 兩組受檢者的血清CCL2、CXCL13及CC16水平比較(±s)

組別IPF組對(duì)照組例數(shù)60 60 CCL2(pg/mL)50.73±6.18 15.22±5.09 CXCL13(pg/mL)44.38±10.22 18.74±4.05 CC16(μg/L)7.23±1.34 9.55±1.83 t值P值34.355 0.001 18.066 0.001 7.923 0.001

2.2 兩組受檢者的肺功能指標(biāo)比較 IPF組患者的VC、DLco 分別為(62.83±9.28)%、(51.22±9.05)%，明顯低于對(duì)照組的(93.48±8.48)%、(94.39±6.91)%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.3 IPF 患者血清 CCL2、CXCL13 及 CC16 水平與肺功能的相關(guān)性 經(jīng)Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，IPF患者血清CCL2、CXCL13與VC、DLco均呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)，而 CC16 與 VC、DLco 均呈正相關(guān)(P＜0.05)，見表2。

表2 IPF患者血清CCL2、CXCL13及CC16與肺功能的相關(guān)性

2.4 血清 CCL2、CXCL13 及 CC16 診斷 IPF 的價(jià)值 經(jīng)ROC 曲線分析發(fā)現(xiàn)，血清CCL2、CXCL13 及CC16 聯(lián)合檢測(cè)診斷IPF 的曲線下面積、靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度均明顯高于上述三項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表3和圖1。

表3 血清CCL2、CXCL13及CC16診斷IPF的價(jià)值(%)

圖1 血清CCL2、CXCL13及CC16診斷IPF的ROC曲線

2.5 IPF 患者血清 CCL2、CXCL13 及 CC16 的相關(guān)性 經(jīng)Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，IPF 患者血清CCL2 與 CXCL13 呈 正 相 關(guān) (r=0.528，P=0.007)，與CC16 呈 負(fù) 相 關(guān) (r=-0.577，P=0.000)，且 CXCL13 與CC16呈負(fù)相關(guān)(r=-0.549，P=0.002)。

3 討論

IPF 作為特殊類型的慢性漸進(jìn)性纖維化肺炎，多見于老年人群，且病變往往僅限于肺部，主要臨床表現(xiàn)特征為成纖維細(xì)胞灶形成以及肺纖維化等，患者往往表現(xiàn)出進(jìn)行性呼吸困難以及刺激性干咳等臨床癥狀，且存在不同程度的肺功能通氣障礙、雙肺可聞及Velcro音[6-8]。相關(guān)研究數(shù)據(jù)顯示，IPF的發(fā)病率正呈逐年攀升趨勢(shì)，臨床上尚無特效治療手段，加之發(fā)病隱匿性較強(qiáng)，不易早期診斷，患者預(yù)后極差[9]。生物學(xué)標(biāo)志物主要是指可用于客觀評(píng)估機(jī)體病生理過程以及治療后藥理反應(yīng)的一系列特征量，是目前廣大醫(yī)務(wù)人員研究的熱點(diǎn)[10-11]。迄今為止，臨床上尚無公認(rèn)的IPF特異性生物學(xué)標(biāo)志物，這也促使其成為研究的熱點(diǎn)。相關(guān)研究報(bào)道表明，CCL2、CXCL13及CC16在多種呼吸系統(tǒng)疾病中均存在異常表達(dá)[12-13]，但關(guān)于CCL2、CXCL13 及CC16 在IPF 中表達(dá)的研究報(bào)道并不多見。由此，本文擬通過對(duì)IPF患者血清CCL2、CXCL13及CC16 水平進(jìn)行檢測(cè)，分析其與患者肺功能的相關(guān)性以及對(duì)IPF 的診斷價(jià)值，從而為臨床診治方案的制定提供理論依據(jù)。

本文結(jié)果表明，IPF 組血清 CCL2、CXCL13 水平均高于對(duì)照組，而CC16 水平低于對(duì)照組。這表明CCL2、CXCL13在IPF患者血清中存在異常高表達(dá)，而CC16 呈明顯低表達(dá)，三者可能在IPF 發(fā)病、進(jìn)展過程中發(fā)揮著重要的作用。分析原因，CCL2屬于CC趨化因子亞家族成員，主要介導(dǎo)機(jī)體的免疫反應(yīng)，可能通過對(duì)肺組織發(fā)揮顯著的促炎以及免疫破壞作用，繼而加劇肺組織損傷，促進(jìn)肺纖維化的發(fā)生、發(fā)展[14]。而CXCL13 可通過刺激機(jī)體內(nèi)B 細(xì)胞，繼而引起機(jī)體的免疫失調(diào)，誘發(fā)或加劇病情的進(jìn)展[15]。GUO等[16]的研究報(bào)道指出：IPF 患者的血清CXCL13 水平顯著高于慢性阻塞性肺疾病患者以及正常者，且IPF 伴有非動(dòng)脈高壓或急性加重期患者的血清CXCL13 水平更高。這與本文結(jié)果相似。CC16 主要表達(dá)于肺組織，與其相關(guān)的分子生物途徑仍存在一定的爭(zhēng)議，然而，作為內(nèi)源性生物活性物質(zhì)之一，其被廣泛認(rèn)為可能對(duì)肺組織具有極其重要的抗炎以及免疫調(diào)控作用，并可能通過影響IFN-γ等細(xì)胞因子的合成或活性，繼而在IPF的發(fā)生過程中發(fā)揮重要作用[17]。此外，IPF 組VC、DLco 均低于對(duì)照組。這可能與IPF 會(huì)促進(jìn)患者出現(xiàn)限制性通氣障礙以及氣體交換異常有關(guān)[18-19]。另外，經(jīng)Pearson 相關(guān)性分析可得：IPF 患者血清CCL2、CXCL13 與 VC、DLco 均呈負(fù)相關(guān)，而 CC16 與 VC、DLco 均呈正相關(guān)。這提示了血清CCL2、CXCL13 及CC16 水平可在一定程度上反應(yīng)IPF 患者的病情嚴(yán)重程度，即隨著血清CCL2、CXCL13 水平的不斷升高以及CC16水平的逐漸降低，患者的病情越嚴(yán)重，其可能成為臨床病情評(píng)估以及預(yù)后判斷的潛在生物學(xué)指標(biāo)。經(jīng) ROC 曲線分析發(fā)現(xiàn)：血清 CCL2、CXCL13 及CC16 聯(lián)合檢測(cè)診斷IPF 的效能較高。這表明了在臨床實(shí)際工作中可能通過聯(lián)合檢測(cè)上述三項(xiàng)指標(biāo)為IPF的診斷提供參考依據(jù)。經(jīng)Pearson 相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)：IPF 患者血清 CCL2 與 CXCL13 呈正相關(guān)，與 CC16 呈負(fù)相關(guān)，且CXCL13與CC16呈負(fù)相關(guān)。究其原因，可能是上述三項(xiàng)指標(biāo)在IPF 的發(fā)生、發(fā)展過程中具有協(xié)同互補(bǔ)作用。

綜上所述，CCL2、CXCL13在IPF患者血清中存在異常高表達(dá)，而CC16呈明顯低表達(dá)，聯(lián)合檢測(cè)上述三項(xiàng)血清學(xué)指標(biāo)，可為臨床IPF 的診斷提供參考依據(jù)。且 CCL2、CXCL13 與 IPF 患者肺功能呈負(fù)相關(guān)，而CC16與IPF患者肺功能呈正相關(guān)，可作為有效反映患者肺功能的有效指標(biāo)。