方可心,王海洋,楊 靜
1.吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院,吉林吉林市 132109;2.吉林省牧業(yè)信息中心,吉林長春 130000
犬螨蟲病主要分為疥螨、蠕形螨和耳螨。犬螨蟲感染是臨床中寵物常見的高度接觸性體外寄生蟲病,患病犬主要表現(xiàn)為滲出性炎癥、皮膚瘙癢,被毛脫落,患病部位有膿性分泌物,嚴(yán)重影響犬生長發(fā)育,同時威脅人類健康。對犬螨蟲病的治療多采用化學(xué)藥物治療,如伊維菌素、阿維菌素、多拉菌素等大環(huán)內(nèi)酯類藥物,長時間使用后出現(xiàn)了一定的耐藥性,需多次使用或增加藥量方有效果。化學(xué)藥物在體內(nèi)殘留時間長,一旦過量易引起中毒,此類藥物無特效解毒藥,在體內(nèi)代謝速度慢,容易導(dǎo)致犬死亡。中藥具有較強的抗菌、抗病毒和殺滅多種寄生蟲作用,安全性高,無副作用,不容易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點,已發(fā)現(xiàn)青蒿、苦參、丁香、雷公藤、百部和魚藤等多種中藥具有較好的殺螨活性,并成功提取了殺螨藥效成分,已廣泛應(yīng)用于螨蟲病臨床治療。肖嘯等采用小蘭杜治療犬螨蟲效果觀察研究。陸江等應(yīng)用復(fù)方丁香提取物軟膏對犬螨蟲性皮膚病防治的臨床試驗發(fā)現(xiàn),復(fù)方丁香提取物軟膏對犬螨蟲具有良好的殺滅作用。國內(nèi)對犬螨病治療多采用單味中藥治療螨病的較多,應(yīng)用多味中藥制劑對犬螨蟲的治療研究報道較少。本試驗選取多味中草藥,通過體外殺螨試驗和臨床治療試驗,對患有螨蟲性皮膚病的病犬進行研究,以期篩選出有效、安全的復(fù)方中藥,盡可能縮短治療時間,為犬螨蟲病的治療藥物的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
1.1.1 藥品
大風(fēng)子、苦參、地膚子、蛇床子、川椒、苦參、黃柏、百部、白鮮皮、蒼耳子、甘草等中草藥購自吉林省吉林市百草堂中藥店;50%甘油水溶液、液體石蠟等購自于吉林省康達(dá)動物藥業(yè)有限公司。
1.1.2 犬螨蟲樣本
犬疥螨10 份,蠕形螨15 份,耳癢螨5 份,分別采集于吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院臨床確診的患犬病料。
1.1.3 試驗器材
外科手術(shù)刀、酒精燈、顯微鏡、黑紙。
1.2.1 中藥提取物的制備
將10 種中藥組合成3 個組方,分別是:①百部20 g、黃柏15 g、苦參20 g、白鮮皮20 g、甘草20 g;②地膚子15 g、蛇床子15 g、川椒20 g、甘草20 g;③百部20 g、蒼耳子25 g、大風(fēng)子25 g、苦參20 g、甘草20 g。按上述劑量取 以上3 組中藥,每一組浸泡0.5 h,分別將其水煎2 次,過濾,兩次濾液合并濃縮。使生藥含量為1 000 mg/mL,然后進行倍比稀釋,高溫滅菌之后置冰箱備用。
1.2.2 犬螨蟲病診斷
根據(jù)犬皮膚發(fā)癢、紅色丘疹、滲出物、惡臭等癥狀初步診斷為螨蟲感染。用消毒手術(shù)刀片在犬的病變皮膚和健康皮膚交界處輕輕地刮取病料,一直刮到有鮮血滲出為止,將刮下的皮屑放于載玻片上,滴加50%的甘油水溶液,加蓋上蓋玻片,在顯微鏡下觀察,如果發(fā)現(xiàn)灰白色、圓形、背部凸起呈弧形、體表有堅韌的表皮、還具有小細(xì)紋蟲體,同時卵內(nèi)含有不均勻的卵胚或者已經(jīng)成形的幼蟲。由此即可確診病犬所患疾病為犬螨病。如果刮取的皮屑太厚,可以先使用NaOH 溶液溶解之后再進行鏡檢。
1.2.3 犬螨蟲的采集
保定犬只,觀察犬的全身,找到脫毛的患部,然后在患病部分和健康部分交界處,將犬身上比較長的毛剪去之后,使用酒精燈外焰處消毒的外科手術(shù)刀在體表輕輕地刮取病料,注意手術(shù)刀與皮膚的表面垂直,反復(fù)刮取病變處表皮,直到鮮血滲出為止,取完樣本后,棉球蘸取碘酒輕輕擦拭取樣處。本試驗采取培養(yǎng)皿內(nèi)加溫法獲得螨蟲樣本,具體操作如下:將采集到的干燥皮屑,放于先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)皿內(nèi),加上皿蓋。將培養(yǎng)皿放于35 ~40 ℃溫水的杯上,等待20 min 之后,將培養(yǎng)皿倒轉(zhuǎn),蟲體就會蘸附于培養(yǎng)皿的皿底,更多的皮屑則會落于皿蓋上,取出皿底檢查,如果仍有太多皮屑就反復(fù)三次可收集到于皮屑分離的干凈蟲體。
1.2.4 體外殺蟲試驗
將采集到的螨蟲樣本隨機分為5 部分,為這5個部分分為5 個小組,其中1、2、3 組滴加3 種中藥藥劑作為復(fù)方中藥試驗組,另外一組編為4、5組分別作為對照組(滴加伊維菌素)和空白組(滴加液體石蠟)。每個樣本滴加藥液5 滴,輕輕震動使樣本與藥液充分混合;空白組、對照組則分別滴加等量的液體石蠟與伊維菌素,同樣使其充分混合。將樣本放置于溫度為26 ~29 ℃,相對濕度為 70%~80%的保溫箱中保暖,每隔2 h 取出,在顯微鏡下觀察1 次,記錄下6 組螨蟲的活動情況,直到所有的螨蟲都失去活動能力為止。
1.2.5 臨床治療對比試驗
依據(jù)體外殺螨蟲試驗的結(jié)果,取藥效最好的復(fù)方中藥進行臨床對比治療試驗。試驗分為5 組,每組患病犬4 只,其中試驗1 組僅注射伊維菌素0.06 mL/kg;試驗2 組低劑量中藥提取液(50 g 中藥煎制)進行藥浴治療,試驗3 組中劑量中藥提取液(75 g 中藥煎制)進行藥浴治療,試驗4 組高劑量中藥提取液(100 g 中藥煎制)進行藥浴治療,記錄病犬康復(fù)情況及時間。試驗5 組中劑量中藥提取液(75 g 中藥煎制)加注伊維菌素0.03 mL/kg,記錄病犬康復(fù)情況及時間。
1.2.6 判定標(biāo)準(zhǔn)
體外殺螨試驗的死亡判定標(biāo)準(zhǔn):①螨蟲蟲體收縮或者變?yōu)榘胪该?;②螨蟲蟲體裂開,蟲體周圍出現(xiàn)油狀物質(zhì);③在高倍顯微鏡下連續(xù)觀察蟲體1 min,蟲體或者蟲足停止活動者。
犬疥螨病治愈判定標(biāo)準(zhǔn)為犬只癢感消失,即停止蹭癢,患部結(jié)痂脫落,有新的被毛長出。蠕形螨病治愈標(biāo)準(zhǔn)為毛囊周圍隆起平復(fù)及膿皰消失、浮腫消退、膿性皮炎炎癥消退以及有新的被毛長出。
由表1 可見,第1 組殺滅所有螨蟲所耗時間為8 h,第2 組為16 h,第3 組為6 h,對照組伊維菌素為6 h,空白組在20 h 之后螨蟲仍然沒有徹底死亡,說明第3 組復(fù)方中藥作用與伊維菌素的殺螨效果無差別,用時最短。
表1 中藥對體外犬螨蟲生存情況的影響
表2 臨床治療效果比較
由表2 可見,試驗1 組,即常規(guī)伊維菌素注射組治愈率為100%,治療時間為15 d;低濃度中藥藥浴治愈率只有75%,而且治療時間長達(dá)29 d,中等濃度中藥藥浴治愈率100%,治療時間為12 d;高濃度中藥藥浴治愈率也是100%,治療時間為12 d,與注射伊維菌素組比治療時間短;試驗5 組中藥與伊維菌素合用治療后,康復(fù)為8 d,療效顯著,效果優(yōu)于各藥物單獨使用,可用于臨床。
蒼耳子是菊科植物蒼耳帶總苞的成熟果實,是一種野生中草藥,其主要成分含有水溶性苷類,揮發(fā)油、酚酸類及脂肪酸等成分,具有抗菌、抗病毒、抗炎和抗過敏等作用。吳輝生研究表明,蒼耳子能夠抑制寧都黃雞消化道大腸桿菌的增長與繁殖的作用。百部的主要活性成分為百部生物堿,具有抗菌、殺蟲、抗病毒等作用。百部臨床外用于治療螨蟲病、疥瘡和真菌性感染等。鄧云夏等研究發(fā)現(xiàn)對葉百部堿具有體外殺螨活性,對兔疥螨具有殺死作用。在本試驗中,百部、蒼耳子與大風(fēng)子的組合方劑體外抗螨蟲病效果較好,優(yōu)于其他兩組中藥組合方劑,本試驗體外殺螨效果與楊海燕等研究報道的結(jié)果相一致。蒼耳子有小毒,所以在藥浴時要注意不要讓犬飲用藥液,局部藥浴后可給患犬戴伊麗莎白圈,防止舔食造成中毒,幼齡犬根據(jù)病情可適當(dāng)減少局部藥浴的次數(shù)。
治療試驗對比發(fā)現(xiàn),犬在感染螨蟲之后,其皮膚免疫力下降,部分患犬易出現(xiàn)繼發(fā)葡萄球菌感染,因此在臨床治療過程中,可先對繼發(fā)感染細(xì)菌進行分離鑒定,然后通過藥敏試驗篩選最為敏感藥物進行對癥治療,預(yù)防出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)疾病,延長治療時間。復(fù)方中藥(百部、蒼耳子、大風(fēng)子、苦參、甘草)可單獨用于犬螨蟲性皮膚病的臨床治療,同時配合伊維菌素可有效縮短治療時間。
參考文獻:略